CIK细胞对一线化疗后晚期非小细胞肺癌维持治疗的疗效分析

王秀文 易基群 梁继珍 潘兆军 朱 平



CIK细胞对一线化疗后晚期非小细胞肺癌维持治疗的疗效分析

王秀文 易基群 梁继珍 潘兆军 朱 平

目的 探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK) 维持治疗一线化疗后晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及安全性。方法 收集96例ⅢB～Ⅳ非小细胞肺癌患者，一线治疗为4～6个周期的含铂两药方案化疗，将疗效达稳定或以上的患者随机分两组，一组给予CIK免疫治疗，一组给予支持治疗，比较两组的PFS、有效率、外周血T淋巴细胞亚群、KPS评分及评估安全性。结果 CIK组和对照组的中位PFS分别为8.0个月(95% CI 7.3～8.7)和6.0个月(95% CI 4.8～7.2)(P=0.002)。CIK组疾病控制率为81.25%，显著高于对照组的62.50%(P<0.05)。CIK治疗组患者外周血CD3+、CD3+/CD4+细胞比率较治疗前显著上升，对照组T淋巴细胞亚群没有变化。CIK 细胞治疗后患者KPS 评分为(71.53±7.96)分，较治疗前显著提高 (P<0.05)。CIK 治疗组中3例出现一过性发热，3例皮疹，2例肌肉痛。结论 CIK维持治疗一线化疗后稳定的晚期非小细胞肺癌患者，可提高PFS及近期疾病控制率，改善免疫功能及生活质量，安全性好。

CIK；非小细胞肺癌；维持治疗

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:473～476)

化疗是晚期NSCLC的主要治疗手段[1]，传统治疗模式是患者先经4～6个周期的一线化疗，复发后再接受二线化疗。但50%～60%的患者因疾病进展时体力状态变差而无法接受二线化疗[2]。对完成4～6个周期的一线化疗后疾病无进展，继续治疗可能推迟疾病进展、延长生存期和改善生活质量[3]。

单药维持治疗的不良反应远小于含铂两药方案，耐受性好，其疗效得到了多项临床研究的肯定[4]。除细胞毒及分子靶向药物的维持治疗外，过继免疫治疗备受关注。CIK源于 CD3+和 CD56+T 细胞，同时具备 T 淋巴细胞的抗肿瘤活性和 NK 细胞的杀伤活性。CIK/DC-CIK被广泛用于肝癌、乳腺癌、胃癌、结肠癌、肾细胞癌等，并取得初步成效[5]。针对CIK治疗的低毒高效特点，本研究对晚期NSCLC一线化疗后稳定的患者进行CIK维持治疗研究，探讨CIK维持治疗对该类患者的免疫功能、疗效及安全性的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2010年3月至2013年3月在本院肿瘤科初治且无手术指征的ⅢB～Ⅳ期NSCLC患者,采用标准的长春瑞滨、吉西他滨、紫杉醇、多西他联合赛顺铂/卡铂等方案一线化疗，且4～6个周期化疗后无进展(即CR+PR+SD)入组，共96例。入组患者随机分两组，患者的一般情况见表1。两组患者在年龄、性别、分期以及病理类型等方面差异无显著。患者均经组织病理学确诊为肺癌，KPS评分≥50分，预计生存期>3个月，治疗前血常规、心电图正常，肝肾功能各指标正常。本临床应用程序均经医院伦理委员会审查批准，接受生物治疗患者均签署知情同意书。

表1 两组患者的临床资料/例

1.2 方法

1.2.1 CIK细胞的制备及回输 CIK组患者于清晨空腹状态下抽取患者外周血80 ml，肝素抗凝，在符合cGMP标准的实验室，用Ficoll淋巴细胞分离液分离并收集单个核细胞。用自体血清培养基培养，加IFN-γ1 000 U/ml，置于37 ℃、5%CO2孵箱中培养，24 h后加入IL-2 1 000 U/ml 和抗CD3单抗50～100 ng/mL。

此后每2～3天更换培养液并补加IL-2。培养至第8 天时取部分细胞进行细菌及霉菌检测，如结果阴性则继续培养。第13 天检测细胞杀伤活性，用台盼蓝染色计数，总数达2×109以上后收集细胞，悬浮于1%白蛋白生理盐水中回输，回输第1 天起每日皮下注射rhIL-2增强CIK细胞活性。

1.2.2 维持治疗与随访 维持治疗在4～6个周期一线化疗结束后2周进行，实验组每例患者治疗2个疗程，每疗程回输细胞总数>1×1010。每个周期中分5 次于培养的第15、17、19、21、23天回输给患者；对照组患者在化疗后给予一般对症支持治疗。疗程间隔15天。治疗结束后随访观察1年。

1.2.3 观察指标 检测外周血T淋巴细胞表型：化疗结束后2周及CIK治疗2个疗程结束后2周采集患者外周血2 ml，Ficoll密度梯度离心法分离淋巴细胞，流式细胞仪检测T 细胞亚群变化。生活质量评估：以Karnofsky为标准比较化疗后2周与CIK细胞免疫治疗结束后2周患者的生活质量。

1.3 评价疗效

48例患者均可评价疗效，通过 CT、MRI、PET-CT等检查进行疗效评价，每3个月复查评估，有病情进展随时进行疗效评价。2个周期的CIK细胞维持治疗后影像学评价按 RECIST 评价标准分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、疾病稳定(SD)和疾病进展(PD)。以CR+PR计算客观有效率;以CR+PR+SD计算疾病控制率。无进展生存期(PFS)定义为自首次CIK维持治疗开始至疾病进展或无法耐受不良反应。观察评估时间至2013年2月。

1.4 随访及统计学分析

2 结果

2.1 疗效评价

2个周期CIK细胞治疗结束后经影像学评价，CIK治疗组完全缓解2例，13例部分缓解，17例稳定，客观缓解率(ORR)与对照组比较无显著差异。但CIK治疗组疾病控制率(DCR)较对照组明显提高，存在显著性差异(P<0.05)(表2)。

表2 近期疗效比较/例

与治疗前比较，*为P<0.05。

48例患者中有3例未完成2个疗程的CIK细胞治疗。CIK治疗组的中位PFS是8.0个月(95% CI 7.3～8.7)，对照组的中位PFS是6.0个月(95% CI 4.8～7.2)，两者的生存曲线存在显著性差异(P=0.002)(图1)。CIK组的PFS时间比对照组长。

图1 两组患者无进展生存时间曲线

2.2 外周血淋巴细胞亚群的变化

48例患者中有3例未完成2个疗程的CIK细胞输注，每个疗程细胞回输数量在1.0×1010以上。CIK细胞维持干预治疗后患者CD3+、CD3+/CD4+细胞亚群比率较干预前提高，存在统计学差异(P=0.002,P=0.008)，CD3+/CD8+细胞亚群比率在CIK治疗后提高，但差异无统计学意义(P=0.072)。对照组治疗前后CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+细胞亚群百分数比较差异无统计学意义(表3)。

2.3 CIK治疗前后肺癌患者生活质量变化

CIK组治疗前后48 例肺癌患者的KPS评分为(64.98±9.46)分和(71.53±7.96)分，差异有统计学意义(P<0.05)，CIK治疗后患者体力状况改善；而对照组的48例患者治疗前后的 KPS 评分为(65.72±7.49)分和(64.8±8.76)分，无统计学差异。

2.4 CIK细胞治疗的安全性评价

CIK细胞回输过程中及回输后最常见的不良反应为发热，共3例，以低热为主，自行缓解或对症处理后缓解，未出现高热、 寒战。3例出现皮疹，2例出现肌肉酸痛，未予处理自行缓解，未出现明显肝肾功能异常、骨髓抑制等不良反应。

3 讨论

肺癌作为发病率和病死率最高的恶性肿瘤，大部分为非小细胞肺癌，其中有相当部分患者在确诊时已失去手术机会[6]。以铂类为基础联合第三代化疗药物是目前临床上晚期非小细胞肺癌的一线治疗方案。多项大规模临床试验和Meta分析结果表明，不同的一线方案在总体生存率及有效率方面并无显著性差异[7]。NSCLC一线标准化疗方案已经达成共识，但疗效已达到平台。NSCLC患者经一线标准化疗而且获得客观缓解或疾病稳定后进行维持治疗，已获得广泛的认可。理想的维持治疗药物应具备单药治疗有效、不良反应少、使用方便等特点。CIK细胞治疗是近年发展起来的肿瘤过继免疫治疗的全新策略[8]，CIK 细胞能调节和增强患者自身免疫功能，抑制肿瘤生长和清除残留微小病灶的作用，可以有效提高肿瘤的生存率和治愈率，防止肿瘤复发、转移[9]。国内外的实验结果证实，CIK细胞治疗具有毒副反应少和延长生存期等优点，是1种低毒有效的治疗[10-11]。Hontscha 等[10]对多项临床试验归纳发现，CIK治疗的384 例恶性肿瘤患者中，24例获得完全缓解，27 例患者部分缓解。多项研究发现DC-CIK或CIK细胞联合化疗用于晚期非小细胞肺癌患者，可以提高化疗的临床疗效，延长PFS，毒副反应少，提高生活质量[11]。鉴于CIK细胞治疗在晚期SNCLC的疗效及低毒的特点，DC-CIK或CIK细胞免疫治疗用于维持治疗成为肺癌研究的新热点。

本研究显示一线化疗后稳定的晚期非小细胞肺癌经CIK细胞治疗2个周期，CIK治疗组疾病控制率较对照组明显提高，多数接受CIK治疗的患者疾病维持稳定，罗虎等[12]亦报告CIK治疗显著提高肺癌患者治疗的有效率及疾病控制率。本研究中CIK组的PFS时间较对照组延长2个月，存在统计学差异。Runmei 等[13]报道CIK联合化疗组比单纯化疗组治疗晚期NSCLC的中位PFS显著提高(13 vs 6个月)。Shi 等[14]研究 DC-CIK 细胞用于晚期非小细胞肺癌接受常规的两药联合方案化疗后的维持治疗，结果显示DC-CIK 维持治疗可以延长 PFS(3.20 vs 2.56个月，P<0.05)，该实验与本研究都表明晚期肺癌化疗后进行CIK维持治疗有效地提高PFS。本研究发现CIK治疗后患者的CD3+、CD3+/CD4+细胞亚群百分率明显升高，外周血T 细胞亚群发生变化，与治疗前比较差异有统计学意义，对症治疗组无显著改变，表明患者治疗后免疫功能得到改善。Congguo等[15]研究发现肺癌患者CIK治疗干预后4组患者T淋巴细胞亚群百分数均出现显著提高，免疫功能增强，与本研究结果一致。同时在本研究中48例肺癌患者CIK治疗后的 KPS 评分较治疗前也有显著提高，表明CIK治疗明显改善患者的生活质量，是CIK治疗的优势所在。CIK治疗组少数患者出现发热、皮疹、肌肉痛等，均易缓解，未出现肝肾功能、骨髓抑制等不良反应，安全性高，耐受性好。

表3 48例患者治疗前后外周血T细胞表型变化

注：与治疗前比较，*为P<0.05。

综上所述，CIK细胞维持治疗一线化疗后稳定的晚期肺癌患者能够显著提高其近期疾病控制率，延长PFS，改善免疫功能和生存质量，安全性好。CIK细胞维持治疗作为1种新的治疗手段可能是未来晚期肺癌治疗的方向，推荐用于常规4～6个周期化疗结束稳定的晚期肺癌患者。

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(编辑：吴小红)

Effect of Cytokine-induced Killer Cells in Maintenance Therapy of Patients withAdvanced Non-small Cell Lung Cancer after Effective First-line Chemotherapy

WANG Xiuwen,YI Jiqun,LANG Jizhen,et al.

Guangzhou Red Cross Hospital,Medical College,Jinan University,Guangzhou,510220

Objective To evaluate the safety and effectiveness of cytokine induced-killer cells in maintenance therapy of advanced non-small cell lung cancer after effective first-line chemotherapy.Methods After 4～6 cycles of the 2-drug regimen treatment with platinum,the 96 patients with advanced non-small cell lung cancer in phase ⅢB or Ⅳ reached stable or much better condition.The patients were then randomly divided into 2 groups.One group was treated with CIK therapy(CIK group),and the other was treated with optimal supportive care(control group).Progression-free survival(PFS),therapeutic effects,quality of life(Karnofsky score),the changes of immune system including subsets of T cells and side effects were compared between the 2 groups.Results The median progression-free survival of the CIK group and the control group was 8.0 months(95% CI 7.3～8.7) and 6.0 months(95% CI 4.8～7.2)(P=0.002),respectively.The disease control rate(DCR) were 81.25% in the CIK group，which was significantly higher than those of the control group(62.50%,P<0.05).The ratios of CD3+ and CD3+/CD4+T cells significantly increased(P<0.05) after CIK cells therapy,while there was no significant change in the control group.KPS score significantly increased in the CIK group,which was 71.53±7.96(P<0.05).In CIK group,fever was fond in 3 cases,skin rash in 3 cases,and muscular aches in 2 cases.Conclusion The maintenance therapy of CIK cell immuntherapy is safe and effective for advanced non-small cell lung cancer patients after chemotherapy.It can improve PFS,DCR,quality of life and the immune functions of patients.

Cytokine-induced killer cells;Non-small cell lung cancer;Maintenance therapy

广东省科技计划项目[编号：(2011)70号-85]

510220 广州市红十字会医院，暨南大学医学院附属广州红十字会医院

易基群

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.03.037

R734.2

A

1001-5930(2017)03-0473-04

2016-04-25

2016-12-15)