室温下不同血液标本及存放时间对神经元特异性烯醇化酶检测结果的影响

郭健

【摘要】 目的：分析研讨室温下不同血液标本及存放时间对神经元特异性烯醇化酶（NSE）检测结果的影响。方法：随机采集25名健康体检者的血样本，空腹采集静脉血，将每份血液分别用肝素抗凝管（设为对照组）和促凝剂管/分离胶管（设为研究组），在1 h内离心，并检测血液标本中NSE水平，再将标本存放于室温（25±0.5）℃中，分别测定存放2、3、4 h时的NSE水平。结果：对照组血液样本在室温下放置1～4 h时NSE水平均明显高于研究组，组间数据比较差异有统计学意义（P<0.05）；研究组血液标本在室温下存放不同时间点的NSE检测结果对比差异无统计学意义（P>0.05）；对照组血液标本在室温下存放2、3、4 h时NSE检测结果均显著高于1 h时，且4 h时NSE检测结果均高于2、3 h，组间数据比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：室温存放4 h内的促凝管/分离胶管血液样本，其重复性较好，检测结果可靠，可作为临床样本复核、检测，为分析前检测质量提供科学合理依据。

【关键词】 神经元特异性烯醇化酶； 血液标本； 室温； 存放时间； 检测结果

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.11.038 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2017）11-0070-02

神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）主要是参与糖酵解途径中的一种甘油分解而出的最后的酶，其存在于神经内分泌组织以及神经组织中[1]。并且NSE在脑组织细胞中的活性最高，其次神经分泌组织和外周神经组织的活性居中，可作为神经元损伤的一种标志物，同时也可作为一种肿瘤标志物用在垂体腺瘤、小细胞肺癌及神经母细胞癌等疾病的诊断中。由于血小板和红细胞也有着NSE同工酶共存在，若全血标本存放周期延长或者有溶血现象出现时，这是NES同工酶将会释放至细胞外，因此引起血清中NES水平明显偏高[2]。为了减少影响NSE分析的因素，此次将25名健康体检者的血样本纳入讨论中，其目的则在于分析室温下不同血液标本及存放时间对神经元特异性烯醇化酶（NSE）检测结果的影响，具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取来笔者所在医院参与健康体检者25名，男18名，女7名，年龄26～59岁，平均（43.17±5.09）岁。每位体检者分别应用肝素锂真空采血管（对照组）和促凝剂/分离胶（研究组）收集血液标本。

1.2 方法

仪器：罗氏全自动电化学发光免疫分析系统；试剂：采取新购买的配套试剂。两组均严格依照正规操作方式，于空腹状态下，采集4 ml静脉血，抗凝管采集后，及时充分混匀，将标本均放置于室温（25±0.5）℃内，在1 h内离心，检测NSE水平，血液标本无溶血及明显黄疸、脂血；离心后再将标本存放于室温（25±0.5）℃中，分别测定存放2、3、4 h时的NSE水平。血液标本每次检测时，均要对其上层血浆或血清进行混匀，对每份样本检测2次，并取其平均值。

1.3 统计学处理

用SPSS 13.0软件分析所得数据，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

对照组血液样本在室温下放置1～4 h时NSE水平均明显高于研究组，组间数据比较差异有统计学意义（P<0.05）；研究组血液标本在室温下存放不同时间点的NSE检测结果对比差异无统计学意义（P>0.05）；对照组血液标本在室温下存放2、3、4 h时NSE检测结果均显著高于1 h时，且4 h时NSE检测结果均高于2、3 h，组间数据比较差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

*与存放1 h对比，P<0.05；#与存放2 h对比，P<0.05；△与存放3 h对比，P<0.05

3 讨论

NES为烯醇化酶中的一种同工酶，而烯醇化酶是五种同工酶构成，各自由γ、β、α这三种亚基构成的二聚体，在这里面由两个γ亚基组成的二聚体存在于神经元和神经内分泌细胞，故称之为NSE。NSE不仅作为反映脑损伤的程度的重要指标之一，而且也是神经母细胞瘤临床诊断敏感度和特异性、小细胞肺癌较好的肿瘤标志物[3]。

NSE在临床中应用广泛，但是其检测的影响因素较多。NSE在红细胞和血小板中同时存在，溶血标本肯定会对NSE的检测结果产生影响。所以，在分离标本的时候要尽可能地避免溶血，在临床检验中若是遇到了溶血标本应该及时退回重新采集，不然签发检验报告的时候必须予以注明。另外标本在处理前的放置过程中，存放时间的延长、不同程度的振荡、多次离心、温度的改变等都可能会使红细胞和血清中的NSE进入血清当中，导致NSE检测结果的错误偏高[4-5]。NSE检测要求在样本采集完成后，应该在1 h以内离心样本并完成NSE的测定。但是实际工作中往往达不到此要求，这是因为病房里的血液标本大多在凌晨6点开始采集，标本被送去测定的时候至少已经过了3 h，另外若是医院规模过于庞大，则样本NSE的测定需要推延到第2天送到总院集中测定，故临床检验中的NSE结果往往都是偏高的，这在一定程度上增加了患者的检查负担和心理压力，因此在本试验中观察了不同的采血管、标本存放时间对NSE检测结果的影响，以便能够为临床提供更为精确的检测结果。

本次研究结果显示放置1 h的标本的NSE检测结果的差异有统计学意义。当标本放置时间延长后，并且经过了标本的保存、送檢、处理等流程后，这时做的NSE检测结果和阳性率都有了较大幅度的提高。将标本在低温下静置几小时，不经过任何的处理流程直接进行NSE的测定，其结果差异并有统计学意义。另外在检验中，使用血清分离胶可以有效地缩短血液凝固时间，离心完毕后形成的固化屏障隔离层同时可以使细胞和血清完全分离，保证了血清的成分不会受到细胞成分的影响。在日常工作中，医院应尽量使用分离胶采血管，同时临床采血人员应能够正确使用采血管和及时送检待检测样本，当标本送达实验室时，应立即离心测定，这样可以缩短标本的放置时间，减少红细胞和血清间的相互干扰，保证NSE检测结果的准确性和稳定性[6]。

綜上所述，检测室温存放4 h内的促凝管/分离胶管血液样本，其重复性较好，检测结果可靠，可作为临床样本复核、检测，为分析前检测质量提供科学合理依据。

参考文献

[1]隋靖喆，李山，秦雪，等.标本不同处理因素对神经元特异性烯醇化酶测定的影响[J].国际检验医学杂志，2014，25（14）：1950-1951.

[2] Tolan N V，Vidal-Folch N，Algeciras-Schimnich A，et al.Individualized correction of neuron-specific enolase （NSE） measurement in hemolyzed serum samples[J].Clinica Chimica Acta：International Journal of Clinical Chemistry and Applied Molecular Biology，2013，424（4546）：216-221.

[3]黄妩姣，田春华，朱伟才，等.不同采血管、标本处理过程以及存放时间对，NSE检测结果的影响[J].检验医学与临床，2016，13（15）：2090-2091.

[4]仇彩霞，江崇才，王盛楠，等.影响神经元特异性烯醇化酶检测的新因素[J].青岛医药卫生，2013，45（1）：19-21.

[5]谢军，张侠，李红林，等.不同血液标本及存放时间对神经元特异性烯醇化酶测定的影响[J].蚌埠医学院学报，2013，38（12）：1654-1655.

[6] Torsetnes S B，L?vbak S G，Claus C，et al.Immunocapture and LC-MS/MS for selective quantification and differentiation of the isozymes of the biomarker neuron-specific enolase in serum[J].Journal of Chromatography，B.Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences，2013，929（7）：125-132.

（收稿日期：2016-12-23）