Survivin和Smac在乳腺癌中的表达及临床意义*

刘兆华，卢思英，张振涛

(1.廊坊卫生职业学院护理系，河北廊坊 065000；2.承德护理职业学院护理系，河北承德 067000；3.河北省廊坊市人民医院医务科 065000)

Survivin和Smac在乳腺癌中的表达及临床意义*

刘兆华1，卢思英2△，张振涛3

(1.廊坊卫生职业学院护理系，河北廊坊 065000；2.承德护理职业学院护理系，河北承德 067000；3.河北省廊坊市人民医院医务科 065000)

目的 探讨Survivin、Smac在乳腺癌中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学法检测Survivin蛋白和Smac蛋白在88例乳腺癌组织和32例远端正常组织中的表达水平，分析其表达与乳腺癌的关系以及二者之间的相关性。结果 Survivin、Smac在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为71.59%、55.68%，Survivin、Smac在癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率分别为6.25%、84.28%，比较差异均有统计学意义(P<0.05)；Smac的阳性表达、Survivin的阳性表达与乳腺癌患者肿瘤的临床分期、病理分级、淋巴结转移相关(P<0.05)，与患者的年龄及肿瘤大小无明显相关性(P>0.05)。Survivin、Smac二者的表达呈负相关(r=-0.410，P<0.05)。结论 Smac、Survivin与乳腺癌的发生、发展有关，可作为判断乳腺癌生物学行为的重要指标，联合检测能更好地判断乳腺癌的预后。

乳腺肿瘤；免疫组织化学；Survivin；Smac

近年来，我国乳腺癌发病率明显升高，且有年轻化的趋势[1]。本研究试图用免疫组织化学SP法检测Survivin蛋白和Smac蛋白在乳腺癌中表达情况，以寻找乳腺癌新的有效的检测分子，为乳腺癌的临床诊断治疗，以及预后的判断提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取廊坊市人民医院肿瘤外科在2011-2012年中手术切除并已全部确诊为乳腺癌的组织标本88例，来源均为女性患者，年龄32～83岁，平均(52.5±6.2) 岁。肿瘤直径为0.5～9.0 cm。临床分期Ⅰ～Ⅱ期52例，Ⅲ～Ⅳ 36例；病理分级Ⅰ～Ⅱ级59例，Ⅲ级29例；淋巴有转移者56例，淋巴无转移者32例。选取远端正常组织(癌灶>10 cm)32例，年龄39～77岁，平均(56.3±5.0)岁。患者均为首次发现肿瘤，术前未做过放、化疗和内分泌方面的治疗。选取的所有标本的病理诊断均由两名高年资病理科医师给出。本研究患者均知情同意。

1.2 主要试剂 Survivin兔抗人单克隆抗体和Smac兔抗人多克隆抗体购于北京BIOSS生物技术公司；二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒，兔免疫组织化学试剂盒购于北京中杉金桥生物技术公司。

1.3 方法 所有手术切除标本(均经病理证实为癌浸润)及癌旁正常组织均使用10%甲醛溶液固定，制作石蜡切片并连续切成若干张厚4 μm的切片，分别进行苏木精-伊红(HE)染色，Smac免疫组织化学染色和Survivin免疫组织化学染色。一抗分别使用Smac 兔抗人多克隆抗体(1∶100)、Survivin兔抗人单克隆抗体(1∶60)。抗原修复均采用微波修复。用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作阴性对照，用已知的Survivin蛋白阳性的乳腺癌组织和Smac蛋白阳性的心肌组织为对应的阳性对照。

1.4 结果判断 参照许良中等[2]免疫组织化学结果的判断标准，在光学显微镜下(×100)每张切片选10个视野进行观察，计数各视野中癌细胞的染色情况，采用半定量计数方法判定结果。(1)染色强度：无色为0分，淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色或褐色为3分；(2)阳性细胞所占的比例：阴性为0分，阳性细胞(≤10%)为1分，阳性细胞(10%～50%)为2分，阳性细胞(>50%～75%)为3分，阳性细胞(>75%)为4分。判断标准a为染色强度分值×阳性细胞比例分值,a<3分为阴性(-)；a≥3分为阳性(+)，两名高年资病理科医生双盲读片判定以上结果。

1.5 统计学处理 采用SPSS17.0版统计软件，计数资料用率表示，组间采用χ2检验，Smac和Survivin表达的相关性采用Spearman等级相关分析，检验水准α=0.05，P<0.05差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 Survivin、Smac在乳腺癌组织和正常组织中表达的差异 癌组织中Survivin阳性表达率为71.59%，正常组织中Survivin的阳性表达率6.25%，癌组织中的表达率高于正常组织，比较差异有统计学意义(χ2=40.356，P<0.05)；癌组织中Smac阳性表达率为55.68%，正常组织中Smac阳性表达率84.38%，癌组织中的表达率低于正常组织，比较差异有统计学意义(χ2=8.320，P<0.05)。

2.2 Survivin、Smac的表达与临床病理特征的关系 Survivin阳性表达率的升高与乳腺癌病理分级、临床分期的提高呈正相关，比较差异有统计学意义(P<0.05)，而乳腺癌中Smac蛋白的表达与之相反；有淋巴结转移者Survivin的阳性表达率高于无淋巴结转移者，比较差异有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移者Smac阳性表达率低于无淋巴结转移者，比较差异有统计学意义(P<0.05)；乳腺癌中Survivin和Smac的表达与患者年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)，见表1。

表1 Survivin、Smac在乳腺癌中的表达与临床病理特征间的关系[n(%)]

2.3 Survivin与Smac在乳腺癌中表达的相关性 乳腺癌中Survivin蛋白与Smac蛋白的表达呈负相关(r=-0.410，P<0.05)，见表2。

3 讨 论

Survivin基因是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的成员之一，研究显示，在乳腺癌组织中，Survivin的阳性表达率高于远端正常组织[3-5]，提示Survivin的高表达可能与乳腺癌的发生、发展有关。本研究结果显示，Survivin在乳腺癌组织中的阳性表达率高于在远端正常组织中的阳性表达率，与上述文献报道结果类似。此外，在乳腺癌不同病理分级中，Survivin表达不同，在Ⅰ～Ⅱ级的乳腺癌中的阳性表达率低于在Ⅲ级的乳腺癌的阳性表达率。Survivin在乳腺癌不同临床分期中的表达也不相同，Ⅰ～Ⅱ期中的Survivin的阳性表达率低于Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌的阳性表达率，这提示Survivin在乳腺癌中的表达与肿瘤病理分级和临床分期的有关，肿瘤细胞的恶性程度越高，Survivin的表达越高，预后越不佳，与耿聃等[6]的研究结果相似。乳腺癌有淋巴结转移组Survivin的阳性率明显高于无淋巴结转移组，由此可以推断，Survivin的表达越高越容易发生淋巴转移，与Al-Joudi等[7]、Tsai等[8]的研究报道结果类似。

Smac是一种新型线粒体促凋亡蛋白，由Du等[9]在2000年时从Hela细胞分离出来的，有研究表明该蛋白能中和或拮抗一种或几种凋亡抑制蛋白(IAP)家族成员，对肿瘤细胞有促凋亡作用。有研究显示，Smac在正常乳腺组织中的表达高于在乳腺浸润性导管癌组织中的表达[10-12]，本研究也得出相似的结果。另外，本研究显示Smac的表达与乳腺癌病理分级、临床分期呈负相关，在无淋巴转移组织中高表达，可推测Smac通过促肿瘤细胞凋亡参与乳腺癌的发生、发展，Smac的表达水平越低，肿瘤的恶性程度越高，预后不良，易发生淋巴结转移。

本研究结果显示，乳腺癌中Survivin与Smac表达的负相关可推测二者存在负反馈调节作用或拮抗作用，Smac表达的降低可引起Survivin表达的升高，抑制了肿瘤细胞凋亡，促进了肿瘤的发生、发展及恶性增殖。

综上所述，乳腺癌的发生、发展是复杂病理过程，与许多因素有关。从不同系肿瘤组织研究中能看出Survivin、Smac在癌细胞的发生、发展中有着非常重要的作用。

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验交流·

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.14.031

廊坊市科学技术研究与发展计划项目(2013013019C)。 作者简介：刘兆华(1979-)，硕士，讲师，主要从事护理及病理方面研究。△

，E-mail：bellbird3301@163.com。

R365

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1671-8348(2017)14-1966-02

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