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多指标正交实验优化蒙药泡囊草制膏、牛奶浸泡法炮制工艺Δ

2017-06-05包明兰乌云嘎巴根那乌力吉王秀兰

中国民族医药杂志 2017年4期
关键词:山莨菪碱蒙药炮制

包明兰 乌云嘎 巴根那 奥·乌力吉 王秀兰

(内蒙古民族大学蒙医药学院,内蒙古 通辽 028000)

工艺与制备

多指标正交实验优化蒙药泡囊草制膏、牛奶浸泡法炮制工艺Δ

包明兰 乌云嘎*巴根那 奥·乌力吉 王秀兰

(内蒙古民族大学蒙医药学院,内蒙古 通辽 028000)

目的:优选炮制泡囊草的最佳工艺。方法:以山莨菪碱和莨菪碱为综合指标,采用高效液相色谱法进行含量测定,采用L9(3)4正交试验设计法考察泡囊草制膏工艺(加水量、煎煮时间、煎煮次数)、泡囊草牛奶浸泡法(加牛奶量、浸泡时间、烘干温度、烘干时间)对炮制工艺的影响,确定最佳炮制工艺。结果:泡囊草制膏法最佳工艺为加药材的8倍量水,煎煮3次,每次30min;泡囊草牛奶浸泡法最佳工艺为加药材的4.5倍牛奶,浸泡4h,40℃温度烘干2.5h。结论:该研究为泡囊草炮制工艺的标准化操作提供了科学的参考依据。

泡囊草;炮制工艺;正交实验;山莨菪碱;莨菪碱

泡囊草系茄科植物泡囊草(PhysochlainaPhysaloides(L)G.Don)的干燥根[1]。具有杀“黏”,消肿,解痉,镇痛之功能。用于胃“黏”痧,炭疽,“亚麻”病,“黏”症,脑刺痛,牙痛,阳痿病[2-3]。由于泡囊草有大毒,常采用奶制法、制膏法或烘干[4]法炮制,但缺乏规范的炮制工艺。现代研究表明泡囊草的有效成分,山莨菪碱、莨菪碱、东莨菪碱和阿托品具有平喘止咳,安神镇惊之功效[5]。本研究以山莨菪碱和莨菪碱的含量为综合指标,采用正交实验对泡囊草的牛奶浸泡法[6]、制膏法工艺进行了优化研究,以其为规范泡囊草的炮制工艺提供技术参数。

1 材料与方法

1.1 仪器:日本岛津LC-20AD高效液相色谱仪;HH2数显恒温水浴锅(苏州威尔);AUW120D电子天平(沈阳龙腾);DHG-9240A电热恒温鼓风干燥箱(上海鸿都);KQ-600DB数控超声波清洗器(昆山)等。

1.2 试药与试剂:泡囊草(批号20160630)采于锡林郭勒阿巴嘎旗;山莨菪碱对照品(BZP1402),莨菪碱对照品(BZP1400)均有中国药品生物制品鉴定所提供;甲醇为色谱纯,其余为分析纯,水为超纯水。

2 实验方法

2.1 色谱条件:岛津LC-20AT分析型高效液相色谱仪,lnertsil NH2ColumnsC18(4.6×300mm,5μm)流动相为甲醇:水(含0.02mol/L醋酸钠溶液和0.02%三乙胺,并用冰乙酸调PH6.0);流速:1.0mL·min-1;检测波长:215nm;柱温:35℃;进样量:10μL。

2.2 对照品溶液的制备:取莨菪碱1.5mg,精密称定,置100mL容量瓶,加甲醇至刻度,得浓度为0.015mg/mL莨菪碱对照品溶液。取山莨菪碱1.5mg,精密称定,置10mL容量瓶,加甲醇至刻度,从溶液中取2mL加3mL甲醇稀释,得浓度为0.06mg/mL的山莨菪碱对照品溶液[7]。

2.3 供试品溶液的制备:精密称取9份泡囊草生品和制膏法、牛奶浸泡法的炮制品各约1.0g,加甲醇25mL,超声处理40min,冷却,称重,用甲醇补重,过虑,滤液各精密吸取1mL,加甲醇定容至10mL,制成样品液。

表1 泡囊草制膏工艺正交实验考察因素与水平表

表2 制膏法的L9(34)正交实验

注:结果=(山莨菪碱×50%+莨菪碱×50%)×100%

2.4 正交实验设计优选泡囊草炮制工艺

2.4.1 正交实验设计优化泡囊草制膏法工艺:称取泡囊草生品9份,每份约5.0g,按表1设计的因素水平和表2的L9(3)4正交设计条件,制备供试品。采用HPLC法以山莨菪碱和莨菪碱含量结果为综合指标进行方差分析(表3),对泡囊草制膏法炮制工艺进行优选。

表3 方差分析表

注:F0.02(2,2)=19.00

表4 泡囊草牛奶浸泡法工艺正交实验考察因素与水平表

表5 牛奶浸泡法的L9(34)正交实验

注:结果=(山莨菪碱×50%+莨菪碱×50%)×100%

表6 方差分析表

注:F0.02(2,2)=19.00

2.4.2 正交实验设计优化泡囊草牛奶浸泡法工艺:称取泡囊草生品9份,每份约5.0g,按表4设计的因素水平和表5的L9(3)4正交设计条件,制备供试品。采用HPLC法以山莨菪碱和莨菪碱含量结果为综合指标进行方差分析(表6),对泡囊草牛奶浸泡法工艺进行优选。

3 结果与分析

3.1 制膏法的正交实验设计结果:表3结果表明,各因素的影响规律为A>C>B>D,结合直观分析结果,最终确定泡囊草制膏法最佳工艺为A1B1C3D3即加药材的8倍量水,煎煮3次,每次30min,合并煎煮液浓缩至膏状,即得。

3.2 牛奶浸泡法的正交实验设计结果:表6结果表明,各因素的影响规律D>B>A>C,结合直观分析结果,最终确定泡囊草牛奶浸泡法最佳工艺为A2B2C1D1,即加药材的4.5倍量牛奶,浸泡4h,40℃温度烘干2.5h至得。

4 讨论

4.1 蒙药炮制与临床疗效之间有着密切关系,大部分药材需经过炮制才能用于临床和制剂的生产。泡囊草有毒必须经炮制入药,因此该试验在现行的有关泡囊草药材炮制基础上,通过正交试验设计、多指标含量测定的综合评分方法,优选出泡囊草牛奶浸泡法和制膏法最佳炮制工艺,在加量、时间、温度、次数等方面确定了具体因素,对于规范泡囊草的炮制工艺,科学合理应用于临床,保证泡囊草的质量有一定的意义。

4.2 山莨菪碱和莨菪碱是目前已知的泡囊草药材的有效成分,该试验采用综合评分的方法,在工艺优化的评价指标中综合考虑了各指标的变化影响。最终确定牛奶浸泡法和制膏法工艺的评价指标为(山莨菪碱×50%+莨菪碱×50%)×100%的综合评分。

[1]国家中医药管理局.中华本草蒙药卷〔M〕.上海:上海科技出版社,2004.233.

[2]朱亚民.内蒙古植物药志(第三卷)[S].1989.17~19.

[3]国家中医药管理局.中华本草梦瑶卷[M].上海:上海科技出版社,2004.233.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准·蒙药分册〔M〕.1998.31.

[5]刘晓平.莨菪类药物的研究进展与临床应用[J].中华医史杂志,1999,29(1):46-47.

[6]吴香杰.蒙药炮制学[M].呼和浩特:内蒙古人民出版社,2011.200.

[7]张润祥.HPLC法测定蒙药材泡囊草(混-浩日素)中莨菪碱的含量[J].中国药品标准,2011;12(6):419~421.

2016年12月20日收稿

Optimization of the optimal processing technology of Physochlaina by multi-indexes orthogonal test

BAO Ming-lan2WU Yun-ga1BA Gen-na2AO Wu-liji2WANG Xiu-lan2

(1.College of Mongolian Medicine and Pharmacology,Inner Mongolia University for the Nationalities,Master of 2015 grade student;2.College of Mongolian Medicine and Pharmacology,Inner Mongolia University for the Nationalities,Inner Mongolia Tongliao 028000,China)

Objective:To optimize processing technology of Physochlaina.Method:With anisodamine and scopolamine as a comprehensive index,using high performance liquid chromatography.By L9(34) orthogonal experiment,effects of Paste making process(the amount of water,decocting time and time),Milk soaking method(milk amount,soaking time,drying temperature,drying time),on varies products of grinder gardenia were investigated.To determine the optimal processing technology of Physochlaina.Results:Paste the optimal process for 8 times the amount of water and medicine,3times decoction,every time 30min,the best process for the 4.5times the milk,soaked 4h,40 degrees Celsius temperature drying 2.5h for milk soaking methodof Physochlaina.Conclusion:The study provides scientific reference basis for regulating gardenia processing technology.

Physochlaina;processing technique;orthogonal experiment;Anisodamine;Scopolamine

内蒙古自治区蒙医药科技重大专项子课题(GCY201508036)

包明兰(1979-)女,副教授,博士,研究方向:蒙药炮制与方剂作用机制研究

R291.2

A

1006-6810(2017)04-0053-03

*内蒙古民族大学蒙医药学院2015级硕士研究生

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