Th22细胞及IL-22在特应性皮炎患者外周血中的表达及意义

任小丽，苏湘川，石青青，胡雅玉，陈祥恩，陈健

（浙江省台州市立医院，台州318000）

·论著·

Th22细胞及IL-22在特应性皮炎患者外周血中的表达及意义

任小丽，苏湘川，石青青，胡雅玉，陈祥恩，陈健

（浙江省台州市立医院，台州318000）

目的研究不同严重程度特应性皮炎（AD）患者Th22细胞及白细胞介素（IL）-22的变化，探讨其在AD发病中的作用。方法采用流式细胞术检测不同严重程度AD患者外周血Th22细胞的比例，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定外周血中IL-22表达水平，以健康成人作为对照。结果轻中度AD患者与正常人比较，外周血Th22细胞比例、IL-22水平增高（P<0.05）；重度AD患者与正常人比较，外周血Th22细胞比例及IL-22水平明显增高（P< 0.01）；重度AD患者与轻度AD患者比较，外周血Th22细胞比例及IL-22水平增高（P<0.05）；重度AD患者与中度AD患者比较，外周血Th22细胞比例及IL-22水平增高（P<0.05）。结论Th22细胞及IL-22与AD的严重程度呈正相关。

特应性皮炎；Th22细胞；白细胞介素-22

特应性皮炎（Atopic dermatitis，AD）是一种与遗传过敏素质有关的慢性炎症性皮肤病，多自婴儿期起病,病情迁延反复,部分可持续至成年期。在儿童期，特应性皮炎是一种常见疾病，发病率较高，并呈现逐年上升的趋势。特应性皮炎在亚洲发病率非常高，大量患者未能获得满意的治疗[1]。在我国儿童皮肤病中，AD占皮肤科儿童就诊人数的30%左右[2]。目前治疗AD的方法很多[3]，但由于AD确切发病机制尚未完全阐明，疾病很难完全根治，造成病情迁延反复，给患者身心带来极大的痛苦，因而深入研究AD的发病机制意义重大。本研究通过检测不同严重程度AD患者外周血Th22细胞比例及白细胞介素（IL）-22表达水平，探讨Th22型细胞及所分泌的细胞因子在AD的发病及病情发展的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料所选病例为2013年6月—2015年6月就诊于台州市立医院皮肤科门诊AD患者98例，全部符合Williams特应性皮炎诊断标准[3]。所有病例在入选前停用抗组胺药1周以上，停用系统糖皮质激素及其他免疫抑制剂或光疗1个月以上。除外合并系统感染、免疫系统疾病、或肝、肾、造血系统和内分泌系统等严重原发性疾病和精神疾病的患者。其中38例不符合纳入标准，给予剔除，剩余60例符合纳入标准，作为试验组。病情严重程度按欧洲特应性皮炎评分标准（SCORAD）进行评分[4]，评分越高，病情越重，按分值从低到高分为3组，＜25分为轻度组，25～50分为中度组，＞50分为重度组。入选患者及健康对照组一般资料见表1，正常对照组来自我院健康体检中心和儿内科门诊。各组AD患者及健康对照组性别、年龄及病程差异无统计学意义。所有检查均征得患者和自愿者的知情同意。

表1 入选患者及健康对照组一般资料例（%）

1.2 方法

1.2.1 外周血Th22细胞比例检测将2 mL外周血置于肝素抗凝管中，使用佛波酯联合离子霉素进行刺激，后加莫能霉素培养，收集培养细胞，于4℃下用10%的羊血封闭细胞表面抗体15 min，调整细胞浓度为2×106/mL，取100 μL加入CD4-FITC、IL-22-PE单克隆抗体各20 μL，于4℃下温育30 min后用Beckman流式细胞仪进行检测，最后用Cellquest软件进行分析。操作严格按试剂盒使用说明进行，试剂盒由苏州跃亚公司提供。

1.2.2 IL-22的检测将2 mL外周血1 500转/min，离心5 min后，收集血清-80℃冰箱保存备用。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IL-22水平，IL-22试剂盒由上海蓝基（BG）公司提供，操作步骤按照说明书进行，检测仪器为MK3-酶标仪（芬兰）。

1.3 统计学处理数据分析采用SPSS16.0进行，计量资料以±s表示，计数资料采用率进行描述，满足方差齐性的计量资料2组间的比较采用t检验，多组间比较采用方差分析，用SNK法比较不同严重程度患者间Th22及IL-22的差异，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

轻中度AD患者与正常人比较，外周血Th22细胞比例、IL-22水平增高（P<0.05）；重度AD患者与正常人比较，外周血Th22细胞比例及IL-22水平明显增高（P<0.01）；重度AD患者与轻度AD患者比较，外周血Th22细胞比例及IL-22水平增高（P<0.05）；重度AD患者与中度AD患者比较，外周血Th22细胞比例及IL-22水平增高（P<0.05），见表2。

表2 各组受试者外周血中Th22细胞比例及IL-22比较（±s）

表2 各组受试者外周血中Th22细胞比例及IL-22比较（±s）

注：与正常人对照比较，*P<0.05，**P<0.01；与轻度AD患者比较△P<0.05；与中度AD患者比较☆P<0.05。

组别nTh22细胞（%）IL-22（pg/mL）健康对照组200.81±0.123.74±0.85轻度AD组222.11±0.31*5.27±0.88*中度AD组202.23±0.31*6.31±0.92*重度AD组184.24±0.38**△☆9.17±1.37**△☆F 5.716.32 P＜0.05＜0.05

3 讨论

Th22细胞是近年发现的不同于Th1细胞、Th2细胞和Th17细胞的新型辅助性T细胞亚群，目前被认为与皮肤的病理生理及稳态有着密不可分的联系[5]，有研究发现AD患者皮损处Th22比例明显高于非皮损处[2]。Th22在皮肤中主要由朗格汉斯细胞和树突状细胞诱导分化而来，以分泌IL-22为主，通过IL-22对皮肤屏障功能产生破坏作用[6-7]。IL-22的作用具有组织择性，上皮细胞是其公认的靶细胞，而在皮肤上皮中的作用主要体现在对角质形成细胞的作用，该作用具有两面性，既可以是保护性的，也可以是有害性的。IL-22能够下调角质纤丝聚集蛋白、兜甲蛋白、外皮蛋白在角质形成细胞的表达，抑制角质纤丝聚集蛋白转录后的加工酶表达，引起角质纤丝聚集蛋白基因突变，加重表皮损伤，在AD的发病机制中发挥着重要的作用[8-10]。Th22细胞亦可通过诱导角质形成细胞增殖和迁移保证皮肤的完整性，而在发炎的皮肤，Th22细胞可以通过增强TNF-α诱导细胞因子和由角质形成细胞释放的趋化因子有助于免疫反应的增强[11]。

笔者研究发现特应性皮炎患者外周血Th22细胞及IL-22的表达与病情呈正相关。郭晓兰等[12]研究证实Th22细胞与特应性皮炎发展密切相关，其分泌的IL-22表达升高，且与疾病病情严重程度存在一定的关系，与本研究结果相似。Th22细胞作为一个独立的新型辅助性T细胞具有特殊的表型和生物学效应，其分泌的IL-22诱导促炎因子基因的表达，抑制上皮细胞分化和促进角质形成细胞的迁移，在AD的免疫发病机制中发挥重要作用。但Th22细胞及IL-22具体以什么方式参与特应性皮炎的发病机制，还需要进一步研究，随着研究的深入，针对细胞因子的靶向治疗成为可能，可为特应性皮炎的治疗提供新的理论依据及治疗思路。

参考文献：

[1]Noda S,Suárez-Fari觡as M,Ungar B,et al.The Asian atopic dermatitis phenotype combines features of atopic dermatitis and psoriasiswithincreasedTH17polarization[J].JAllergyClinImmunol, 2015,136:1254-1264.

[2]王侠生，廖康煌.杨国亮皮肤病学[M].2版.上海：上海科学技术文献出版社，2006：395-400.

[3]赵漂萍，于红.特应性皮炎的治疗进展[J].实用医学杂志，2015, 31（13）：2104-2106.

[4]中华医学会皮肤性病学分会免疫学组,特应性皮炎协作研究中心.中国特应性皮炎诊疗指南（2014版）[J].中华皮肤科杂志，2014，47（7）：511-514.

[5]Fujita H.The role of IL-22 and Th22 cells in human skin diseases [J].J Dermatol Sci,2013,72:3-8.

[6]Fujita H,Nograles KE,Kikuchi T,et al.Human langerhans cells induce distinct IL-22-Prodcing CD4+T cells lacking IL-17 production[J].Proc Natl Acad Sci USA,2009,106:21 795-21 800.

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[11]Cavani A,Pennino D,Eyerich K.Th17 and Th22 in skin allergy[J]. Chem Immunol Allergy,2012,96:39-44.

[12]郭晓兰，李秀娟，杨文彪.特应性皮炎患者外周血辅助性T细胞22的表达及意义[J].国际医药卫生导报，2012，18（14）:2015-2027.

Significance and Expression of Th22 and IL-22 in Perpheral Blood of the Patients with Atopic Dermatitis

Ren Xiaoli,Su Xiangchuan,Shi Qingqing,Hu Yayu,Chen Xiang'en,Chen Jian
Taizhou Municipal Hospital in Zhejiang Province,Taizhou 318000,China

ObjectiveIn order to investigate the variations of Th22 and IL-22 in peripheral blood of the patients with different severity atopic dermatitis(AD)and explore their significances.MethodsThe percentage of Th22 cells in peripheral blood of patients with AD was detected by flow cytometry,the levels of IL-22 were detected by enzyme-linked immuno sorbent assay(ELISA).Meanwhile,healthy adults were taken as controls.ResultsThe percentage of Th22 cells and the level of IL-22 were increased in patients with mild and moderate AD compared with those in healthy controls（P<0.05）.The percentage of Th22 cells and the level of IL-22 were significantly higher in patients with severe AD than those in healthy controls（P<0.01）.The percentage of Th22 cells and the level of IL-22 was higher in patients with severe AD compared with those in patients with mild AD（P<0.05）.The percentage of Th22 cells and the level of IL-22 were higher in patients with severe AD compared with theose in patients with moderate AD（P<0.05）．ConclusionTh22 cells radio and IL-22 level are positively correlated with the severity of AD.

Atopic dermatitis;T helper type 22 Cells;Interleukin-22

R758.2

A

1672－0709（2017）02-0100－03

2016-05-11）