淋巴细胞亚群在反复喘息婴幼儿血清中表达水平的研究

王进雅++诸留珍++陆璐葛++蕾丁玲

[摘要] 目的 研究反復喘息婴幼儿血清中淋巴细胞亚群的变化和意义。 方法 方便收集南京医科大学第二附属医院2013年6月—2015年1月住院反复喘息患儿54例，年龄均在3岁以下，按哮喘预测指数分3组，预测指数阳性组（A组）、哮喘预测指数阴性组（B组）、正常对照组（C组）。哮喘预测指数阳性组22例，哮喘预测指数阴性组22例，正常对照组10例。所有患儿入院当日采集静脉血，流式细胞仪检测患儿血清T淋巴细胞（CD3+）、B淋巴细胞（CD19+），T辅助性淋巴细胞（CD3+、CD4+），T抑制性淋巴细胞（CD3+、CD8+）的水平。 结果 A组共22例，淋巴细胞免疫分型异常者17例，占总数的77.27%；B组共22例，淋巴细胞免疫分型异常者3例，占总数的13.63%；C组共10例，淋巴细胞免疫分型异常者1例，占总数的11.11%。A组与C组差异有统计学意义（P>0.05）；B组与C组相比差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 反复喘息婴幼儿，哮喘预测指数阳性组淋巴细胞亚群功能失衡，而哮喘预测指数阴性组淋巴细胞亚群功能正常。

[关键词] 淋巴细胞亚群；喘息；婴幼儿；哮喘预测指数

[中图分类号] R725 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2016）12（b）-0032-04

Study on the Expression of Lymphocyte Subsets in the Serum of Infants and Young Children with Recurrent Wheezing

WANG Jin-Ya，ZHU Liu-Zhen， LU Lu，GE Lei，DING Ling

Second Affiliated Hospital of Pediatrics of Ningjing Medical University ， Nanjing， Jiangsu Province， 210003 China

[Abstract] Objective To study the changes and significance of lymphocyte subsets in the serum of infants and young children with repeated wheezing. Methods Convenient collect 54 cases of hospitalized children with recurrent wheezing in the Second Affiliated Hospital of Nanjing Medical University from June 2013 to January 2015. The tests were given to three groups according to asthma Predictive Index， which were prediction index positive group （ group A）， asthma prediction index negative group （group B）， normal control group （group C）. there were 22 cases in group A； there were 22 cases in B group，also； there were 10 cases in group C. Venous blood was collected on the day of admission for all test patients. Flow cytometry was used to detect the levels of serum T lymphocytes （CD3+）， B lymphocytes （CD19+）， T helper lymphocytes （CD3+， CD4+） and T inhibitory lymphocytes（CD3+， CD8+） in test children. Results A group of 22 cases， 17 cases of abnormal lymphocyte immune type， accounting for 77.27% of the total， the B group； 22 cases， 3 cases of abnormal lymphocyte type， accounting for 13.63% of total number of 13，63%； C group of 10 cases， 1 cases of abnormal lymphocyte immune type， accounting for 11.11% of the total， and the A group C group the difference was statistically significant（P>0.05）； B group compared with C group， the difference was not statistically significant（P>0.05）. Conclusion Repeated wheezing infants and young children， asthma prediction index positive group lymphocyte subsets function imbalance， and asthma prediction index negative group lymphocyte subsets function is normal.

[Key words] Lymphocyte subsets； Wheezing； Infants and young children； Asthma predictive indexendprint

众多研究证明，儿童支气管哮喘的早期干预和规范化管理有利于控制疾病，改善预后，儿童哮喘多起始于3岁前，因此从反复喘息的婴幼儿中把可能发展为持续性哮喘的患儿识别出来进行有效地早期干预是必要的。但目前尚无特异性的检测方法和指标，可用于对反复喘息的婴幼儿做出哮喘的确定诊断。该研究检测南京医科大学第二附属医院2013年6月—2015年1月住院反复喘息患儿54例，年龄均在3岁以下，检测患儿血清中T淋巴细胞（CD3+）、B淋巴细胞（CD19+），T辅助性淋巴细胞（CD3+、CD4+），T抑制性淋巴细胞（CD3+、CD8+），为婴幼儿哮喘的诊断与治疗提供一定的理论依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

目前国内外对婴幼儿反复喘息暂缺乏明确定义，该研究将其定义为1年内喘息发作4次以上的婴幼儿，年龄6～36个月，该研究方便选取该院住院确诊为反复喘息患儿，临床表现为反复咳嗽、喘息，肺部有哮呜音。剔除标准：支气管、肺发育不良，先天性心脏病，其他先天性畸形，免疫缺陷，曾经或正在使用免疫抑制剂和免疫调节剂。健康对照组选自同期正常健康体检患儿。

1.2 研究方法

研究按哮喘预测指数共分3组，哮喘预测指数阳性组（A组）、哮喘预测指数阴性组（B组）、正常对照组（C组）。哮喘预测指数阳性组（A组）22例，男16例，女6例；哮喘预测指数阴性组（B组）22例男15例，女7例；正常对照组（C组）10例，男7例，女3例，哮喘预测指数参照儿童支气管哮喘的诊断与防治指南（2016年版）[1]。所有患儿入院当日采集静脉血，流式细胞仪检测患儿血清T淋巴细胞（CD3+）、B淋巴细胞（CD19+），T辅助性淋巴细胞（CD3+、CD4+），T抑制性淋巴细胞（CD3+、CD8+）的水平。观察不同组间淋巴细胞亚群表达水平的差别。

1.3 统计方法

应用SPSS 13.0统计学软件对数据进行统计学分析，所有数据的分析结果均以[n（%）]表示，比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 淋巴细胞免疫分型结果

A组共22例，淋巴细胞免疫分型异常者17例，占总数的77.27%、；B组共22例，淋巴细胞免疫分型异常者3例，占总数的13，63%；C组共10例，淋巴细胞免疫分型异常者1例，占总数的11.11%。

2.2 统计学分析

A组与C组相比χ2=13.07，P<0.005，差异有统计学意义；B组与C组相比χ2=0.083，P>0.05，差异无统计学意义，见表1。

3 讨论

支气管哮喘是儿童期最常见的喘息性疾病，哮喘的定义是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞、和T淋巴细胞参与的气道慢性炎症，引起气道高反应，导致可逆性气道阻塞性疾病。由于该病喘息发作的非特异性，部分哮喘患儿易被家长忽视，也易被医生误诊，因不能明确诊断而缺乏有效抗治疗是导致儿童因支气管哮喘死亡的最常见原因之一[2]。哮喘的本质是气道的过敏性慢性炎症，气道上皮细胞因慢性炎症而损伤、脱落和坏死，进而可导致基膜下胶原沉积、杯状细胞增生和平滑肌肥厚，并致气道重构，这些形态改变可能不完全可逆[3]，因此强调对支气管哮喘必须早期识别、早期诊断和积极治疗。儿童哮喘多起始于3岁前，具有肺功能损害的持续性哮喘患儿，其肺功能损害往往开始于学龄前，因此从喘息的学龄前儿童中识别出可能发展为持续性哮喘患儿，并进行有效早期干预是必要的[4]。全球哮喘防治创议（GINA）方案示5岁以上儿童支气管哮喘的诊断有明确标准，但婴幼儿哮喘的诊断，存在一定的困难[5]。我国2016年版的儿童哮喘诊疗指南所制定的哮喘诊断标准，适用于婴幼儿，可是由于在婴幼儿肺功能等生理学检测难以进行或结果不可靠等原因，加之多种疾病可引起婴幼儿喘息，所以，对婴幼儿哮喘确定诊断是困难的[6]。

如何从婴幼儿喘息中作出哮喘诊断，存在一定的困难。首先不能完全根据发作次数来诊断哮喘，因为病毒诱导的喘息也可以有3次以上的喘息；其次哮喘也有首次发作。为避免哮喘诊断的扩大化，我国曾使用评分法诊断婴幼儿哮喘，总分≥5分者诊断婴幼儿哮喘。近年提出废除这一诊断标准，但没有一个合适的诊断标准可以替代。现在较为公认的确定婴幼儿哮喘的评估指标为全球哮喘防治创议（GINA）和PRACTALL 共识报告[7]。但此指标仍不是特异性的检测方法和指标，并且此内容中客观性的观察指标较少。

哮喘预测指数能有效地预测3岁内喘息儿童发展为持续性哮喘的危险性，也是目前临床上对反复喘息患儿是否进行抗哮喘治疗依据。但哮喘预测指数用于婴幼儿哮喘的诊断仍缺少理论依据。哮喘的本质是气道的慢性过敏性炎症，是与淋巴细胞免疫异常与功能失衡相关的慢性炎症[8]，哮喘患儿存在淋巴细胞免疫异常与功能失衡，那么哮喘预测指数阳性的反复喘息的婴幼儿是否也存在淋巴细胞免疫异常与功能失衡呢。

哮喘本质是免疫参与的气道慢性炎症性疾病，已有研究表明[9]，哮喘患兒存在持续慢性的淋巴细胞亚群的紊乱和失衡，那么这种慢性持续性淋巴细胞亚群的紊乱和失衡是否发生于婴幼儿期，是否反复喘息的婴幼儿都会发展成哮喘患儿，目前尚无特异性的检测方法和指标作为婴幼儿哮喘的诊断，目前临床主要依据症状，发作次数，严重程度及哮喘发生的危险因素评估反复喘息的婴幼儿有无发展成持续哮喘的可能，但目前这种评估方法尚缺少理论依据[10]。国内外[11]已有许多研究观察到在婴幼儿出生后早期， 喘息发生率较高，越来越多的学者开始关注<3岁婴幼儿反复喘息的危险因素，希望以此来减少反复喘息婴幼儿进展为哮喘或反复喘息本身所给患儿带来的伤害。目前公认哮喘预测指数是评估反复喘息患儿危险性的主要指标，但对预测指数阳性的患儿是否需要进行抗哮喘治疗尚未有理论依据。有研究报道哮喘易感基因与哮喘预测指数阳性婴幼儿的喘息相关，这提示哮喘预测指数阳性婴幼儿有发展为持续哮喘的可能，文献报道哮喘预测指数阳性的反复喘息婴幼儿外周血CD23、CD30、CD34及IL-17表达明显增高，存在免疫功能的紊乱[12-13]，该研究收集反复喘息婴幼儿，分哮喘预测指数阳性组，哮喘指数阴性组和正常对照组，检测患儿血清中淋巴细胞免疫分型，结果发现哮喘预测指数阳性组有明显免疫细胞分型异常，主要表现为CD3+细胞降低，以CD4+降低为主，CD19+明显增高，而哮喘预测指数阴性组患儿淋巴细胞免疫分型无明显异常。这与文献报道一致。这为哮喘预测指数阳性的反复喘息患儿抗炎治疗提供科学依据，见附表。endprint

综上所述，该研究提示反复喘息的婴幼儿，哮喘预测指数阳性组存在免疫功能的紊乱，这与哮喘患儿一直，而哮喘预测指数阴性组免疫功能正常，推测哮喘预测指数阳性的反复喘息的婴幼儿有发展成持续性哮喘患儿的可能，这为婴幼儿哮喘的诊断与治疗提供一定的理论依据。

[参考文献]

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（收稿日期：2016-09-15）endprint