顶果木组培芽苗生根培养基的优化探究

曾建英

摘 要 顶果木为中国特有种，属国家重点保护植物。为促进顶果木的推广种植，优化顶果木组培芽苗的生根培养基，探讨了外植体材料的采集与消毒、芽的诱导分化、继代增殖培养及组培苗的生根培养等方面对顶果木生根成活的影响及其最优组合，旨在为建立顶果木优良无性系繁殖体系打下良好的基础。

关键词 顶果木；组织培养；生根培养基；优化

中图分类号：S792.99 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2017.03.060

顶果木又名顶果树，不同的地方有不同的叫法，别名有毛榔、白椿等，顶果木属于苏木科高大落叶乔木，其外形高大通直，木材能够久藏，可制家具和装修用料；树顶和枝丫含有丰富的木纤维素，可用作纤维板和纸张的制作材料；顶果树开花鲜艳，可以用作行道树装饰街景作为风景树。近年来，顶果树作为珍贵树种，受到越来越多的人的重视和了解，社会对顶果树的需求量也逐渐增加，但由于顶果树稀少，已被国家列为三级保护树种，顶果树的种子育苗数量也逐渐受到限制。为了解决顶果树稀少这一问题，发展顶果树的繁殖培养技术是主要途径。

1 材料与方法

1.1 材料

研究材料为顶果木的幼嫩叶芽，选取顶果木的幼苗进行萌芽促生。任意选取顶果木的一段枝干，并截取30 cm，将截取出来的顶果木枝干上的叶芽作为外植体培养物。

1.2 方法

1.2.1 外植体采集方式

任意剪取顶果木上一段枝干，将枝干上叶片剪除，留取枝干上新生萌芽，清洗干净后剪取新生萌芽约1.5～2.0 cm作为外植体，采集60棵外植体，并将外植体放置在干净器皿上等待消毒。

1.2.2 顶果木外植体消毒

外植体的消毒方式主要选用3种，将60棵外植体均分3组，分别按照以下方式消毒：（1）将过氧化氢稀释成含量为10%的消毒水，消毒外植体8 min；（2）将酒精稀释成含量为70%的消毒水，用来消毒外植体10 s，随后再用第一种消毒方式消毒5 min；（3）采用含量0.1%的氯化汞稀释液，添加2、3滴混合液消毒外植体6 min。60棵外植体消毒完毕之后再采用无菌清水清洗3到5次，并采用滤纸吸干外植体上附着水滴。最后将60棵外植体接种在1/2 MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA诱导培养基中。

1.2.3 外植体诱导分化

60棵（三组）外植体分别经过3种消毒方式后接种在培养基上，并将外植体均分2份，分别采[1]用全光照或暗培养的培养方式进行顶果树幼芽诱导分化。其中，暗培养诱导分化先进行7 d的暗培养，随后进行全光培养。3组外植体均培养30 d，随后观察记录外植体的生长情况。顶果树外植体材料经过消毒和芽诱导分化后的结果见表1。

1.2.4 外植体增殖培养和生根培养

1.2.4.1 外植体增殖培养方式

将诱导成功的外植体分别接种在三种培养基上（6-BA、KT、NAA三种培养基）[2]，培养温度和光照条件分别设置为25～30 ℃和8～10h/d。

1.2.4.2 外植体生根培养方式

增殖外植体苗芽后进行生根培养，共选用三种生根培养基（NAA、IBA、6-BA）。

外植体的增殖培养和生根培养均采用正交设计方法，两种培养方式因子与水平见表2。

2 结果与分析

2.1 外植体消毒与诱导分化统计结果

由本次试验可知，在3种消毒方式对比中，以第二种消毒方式最佳，即：先70%酒精消毒10 s，再用10%的过氧化氢消毒5 min；3種光照培养方式中以暗培养+全光培养的诱导方式最好。经统计，外植体平均消毒成功率和平均诱导成功率分别为80.0%和55.2%。

2.2 顶果树芽的继代增殖培养统计结果

外植体继代增殖培养40 d后试验结果见表3。由表3可知：在4种试验因子中，序号2和序号4的因子增殖系数极差最大，分别为0.8和0.7，由此可知，序号2和序号4是重要因子。结合正交试验，可以得出4种较好的组合水平。分别为：A组合（MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.2mg/L NAA）；B组合（MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.4mg/L NAA）；C组合（MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.2mg/L NAA）；D组合（MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.4mg/L NAA）。

按以上4种组合配制培养基又做了一次辅助试验，结果表明A、B、C、D组合对应繁殖系数为3.2、3.6、2.8和2.4。由此可知，A组合的增殖效果较好。

2.3 组培苗的生根培养统计结果

外植体增殖之后进行生根试验培养基培养[3]，外植体生根培养30d后进行正交试验，正交试验结果见表4。由表4可知，在1-4序号中，第4序号极差较大，表明这一因子是外植体的主要调节因子。结合正交试验，可以得知四种较好的正交组合，分别为：E组合（1/2MS+0.5mg/L NAA+0.5mg/L IBA+0.1mg/L 6-BA）；F组合（1/2MS+0.5mg/L NAA+0.5mg/L IBA+0.3mg/L 6-BA）；G组合（1/2MS+0.5mg/L NAA+1.0mg/L IBA+0.1mg/L 6-BA）；H组合（1/2MS+0.5mg/L NAA+1.0mg/L IBA+0.3mg/L 6-BA）。

以上E、F、G、H四种组合的生根培养基生根概率分别为0.62%、0.82%、0.65%、0.58%，由此可知，F组合的生根率最佳。

3 结论

当前我国在推广顶果树种植中，培育良种和育苗是急需解决的问题。为了保障顶果树的育苗数量和生长质量，本文进行了培养试验，将顶果树的叶芽作为外植体，总结一种顶果树的组织培养繁殖技术。试验结果表明，在外植体3种消毒方式对比中，以第二种消毒方式最佳，即70%酒精+10%的过氧化氢消毒方式；在3种诱导分化对比中，以暗培养7 d+全光培养的方式最佳；在继代增殖培养和生根培养试验中，两者的最佳培养基组合分别为A组合和F组合，两者的增殖系数和生根率可达到3.6和82%。

参考文献

[1]黎素平，朱昌叁，廖英汉，等.顶果木扦插繁殖技术研究[J].林业实用技术，2011（10）：25-27.

[2]黎素平，郭耆，朱昌叁.顶果木高产栽培技术[J].现代农业科技，2011（14）：229-230.

[3]徐位力，许潮漩，林荣华.顶果木组培增殖培养基的优化[J].广东林业科技.2014，30（4）：58-61.

（责任编辑：赵中正）