青花菜不同组织气相色谱图谱特征

摘要 [目的]了解青花菜花冠和花茎2个不同组织的气相色谱指纹图谱特点。[方法]采用气相色谱法研究了青花菜花冠和花茎气相色谱指纹图谱。[结果]青花菜花茎组织的气相色谱指纹图谱主要表现为峰1、峰2、峰3和峰4这4个峰，而在花冠中主要表现为峰1、峰2、峰3、峰4、峰5这5个峰。其中峰1、峰2、峰3、峰4为花冠和花茎的共有峰，有相同的保留时间，且峰1、峰2的面积相近，而峰3、峰4面积差异较大。[结论]青花菜不同组织的气相色谱指纹图谱在峰的数量上有明显差异。

关键词 青花菜；花茎；花冠；气相色谱

中图分类号 S635 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）06-0085-03

Features of Gas Chromatography Fingerprint in Different Tissues of Broccoli

WANG Dong-qun （Center of Cixi Agricultural Supervising and Testing， Cixi， Zhejiang 315300）

Abstract [Objective] The aim was to research the GC fingerprint features of scape and corolla in broccoli. [Methods] The gas chromatogram characteristics of scape and corolla in broccoli were studied by gas chromatography（GC）. [Result] The scape is mainly for the peak 1， peak 2， peak 3 and peak 4， the corolla is mainly composed of peak 1， peak 2， peak 3， peak 4 and peak 5. Peak 1， peak 2， peak 3 and peak 4 are common peaks of corolla and scape， those have the same retention time. The peak area of peak 1， peak 2 is similar， but the peak area of peaks 3 and 4 has obvious difference. [Conclusion] There are obvious differences in peak number between two different tissues in broccoli.

Key words Broccoli；Scape；Corolla；Gas chromatography

青花菜营养丰富[1]，近几年对其相关研究也越来越多[1-3]。色谱指纹图谱能相对全面地反映中药的组成成分、种类及含量信息，是中药质量标准研究的主要技术手段[4]。色谱指纹图谱技术在蔬菜领域同样适用[5]，但目前由于种种原因该技术在蔬菜领域的研究较少。人们在对3个不同品种的青花菜进行气相色谱图谱研究时，发现不同品种的青花菜有明显不同的气相色谱图谱[6]，该特点在青花菜的品种区分、质量控制等领域具有广阔的应用空间。目前对青花菜气相色谱图谱研究还很少，为了更深入地了解青花菜气相色谱图谱的特点和规律，非常有必要对其进行深入研究。

在对青花菜气相色谱图谱进行研究时通常会对整个青花菜进行取样分析，忽视了青花菜不同组织如花冠和花茎气相色谱图谱差异。笔者用特定方法分别对青花菜的花冠和花茎进行定量检测分析，以期掌握青花菜不同组织的气相色谱图谱特点和规律，为更好地研究和利用青花菜气相色谱图谱提供基础性资料。

1 材料与方法

1.1 材料

2015年3月23日在慈溪市坎墩玉兰蔬菜农场随机抽取了品种名为“喜鹊”的青花菜样品3个。由于该青花菜为生产晚期抽取，处于正要开花而未开花的状态，花冠颜色微微泛黄。在实验室分别对青花菜分花冠和花茎2取样，3个青花菜混合，采用四分法缩份取样，均做3个重复。选用的青花菜花冠、花茎分别见图1、2。

主要仪器：Agilent公司6890N气相色谱仪，配7683自动进样器，采用火焰光度检测器（FPD），选取DB-1701（30 m×0.32 mm×0.25 μm）作为检测用色谱柱；IKA T18基本型高速匀浆机；TD5A-WS离心机；DSY-III氮吹仪。

主要试剂：丙酮为色谱纯，乙腈为AR级。

1.2 气相色谱条件 DB-1701色谱柱，载气为高纯氮气，流量30 mL/min；氢气流量为75 mL/min，空气流量110 mL/min；柱前压68.60 kPa，恒流方式，尾吹氮气；进样口温度220 ℃，检测器温度25 ℃；采用不分流进样方式，进样量1 μL，进样0.85 min后吹扫。柱温程序：初始温度100 ℃，以40 ℃/min升温至200 ℃，再以2 ℃/min升温至210 ℃，然后以30 ℃/min升温至240 ℃并保留4 min，至样品全部流出[6]。

采用保留时间定性，峰面积定量，变异系数（RSD）来判定数据稳定性。

1.3 提取与净化 称取25.0 g青花菜样品置于125 mL试剂瓶中，加入乙腈50.0 mL，用匀浆机高速匀浆2 min，静止提取30 min，充分振荡1 min，摇匀，倒入50 mL离心管中；离心管以4 000 r/min离心5 min，吸取上層乙腈10.00 mL到10 mL带塞玻璃试管中，用水浴80 ℃的氮吹仪吹至近干，用丙酮定容至5.0 mL[6]。

2 结果与分析

2.1 青花菜（喜鹊）不同组织的气相色谱图

青花菜（喜鹊）组织花冠、花茎经溶剂乙腈提取，提取液经气相色谱仪（6890N）配火焰光度检测器（FPD）和DB-1701毛细管柱分离检测，分别得到图3和图4，为方便文字阐述，对主要的峰分别编为峰1～峰5。从图3和图4中可见，花茎中主要表现为峰1、峰2、峰3、峰4这4个峰，而在花冠中主要表现为峰1、峰2、峰3、峰4和峰5这5个峰。在花冠和花茎有峰1、峰2、峰3和峰4这4个保留时间相同的共有峰。峰5只在花冠中出现，而在花茎中没有。峰4在花冠与花茎中峰高均较低。

2.2 不同组织得到的峰数量和峰面积的变化特点

花冠和花茎各做3次重复，对各峰面积进行统计，计算平均值和变异系数RSD，得到表1和表2。从表1、表2的数据比较发现，3次重复试验的各峰面积都比较接近，花冠、花茎中各峰的面积RSD分别在4.25%～26.14%和1.29%～13.34%，可见重复试验得到的数据比较稳定。从图5中可见，峰1、峰2的面積在花冠和花茎中很相近，而峰3、峰4面积差异较大，且花冠中峰3、峰4面积明显要比花茎中的大。

3 结论与讨论

该试验得出，青花菜同一组织3次重复得到的峰面积RSD比较小，可见数据稳定。通过对青花菜不同组织的气相色谱图谱分析表明， 花冠与花茎的气相色谱图谱差异明显。青花菜不同组织在峰的数量上有明显差异，花茎中主要表现为峰1、峰2、峰3和峰4这4个峰，而在花冠中主要表现为峰1、峰2、峰3、峰4、峰5这5个峰，且峰1、峰2的峰面积相近，而峰3、峰4面积差异较大。这也提示人们在利用青花菜作为样本进行气相色谱图谱研究时，一定要考虑取样的组织部位，最好对花冠与花茎分别制样进行相关研究。当以整个青花菜作为研究对象时，样品一定要充分混匀。从各峰峰面积大小来看，峰1、峰2在青花菜花冠和花茎中面积很相近，而峰3、峰4面积差异较大，且花冠中峰3、峰4面积明显要比花茎中的大。

参考文献

[1] 林俊城，吴秋云，高灿红，等.青花菜硫、硒代谢竞争及其对保健功能的影响研究进展[J].中国细胞生物学学报，2011，33（4）：422-432.

[2] 陆信娟，杨峰，樊继德.青花菜主要农艺性状的相关分析[J].江西农业学报，2011，23（1）：49-51.

[3] 徐霞，朱智伟，应兴华.西兰花中13种有机含磷农药在不同色谱柱上的色谱保留行为[J].理化检验（化学分册），2012，48（7）：803-806.

[4] 于雪，辛莹娟，蒋绪.色谱指纹图谱在中药质量控制中的应用[J].现代盐化工，2016（3）：43-44.

[5] 李桂凤，万松军，张政军，等.一种利用HPLC指纹图谱鉴定果蔬真伪及农残含量的方法：CN201410270909.9[P].2014-10-29.

[6] 王冬群.3个品种青花菜气相色谱分析[J].浙江农业科学，2016，57（4）：500-503.