广西大容山野生毛木耳分离及栽培试验

秦延春 陈国龙 卢玉文韦锦福 吴章荣 陈德荣 丘献娟 曹本雄 廖芳贤 李永明 高为民

（玉林市微生物研究所/广西食用菌创新团队玉林综合试验站，广西玉林537000）

图1 分离培养出毛木耳（容耳1号）

毛木耳柔滑可口，清香脆嫩，味鲜香浓，尤其是其风味独特，品质上乘，为众多菌类品种所不及。毛木耳食用、药用价值高，不但可鲜销，还可烘干作为干品销售，近年来市场价格稳中有升。由于毛木耳栽培受地域气候影响较大，且品种繁多，但真正适合广西气候的品种较少，而在广西气候条件下生长的大容山野生毛木耳香甜脆嫩。为此，笔者进行了大容山野生毛木耳的分离与栽培试验，现将试验结果总结如下。

1 材料与方法

1.1 母种分离2013年3月在大容山周边乡镇小平山、北市、新圩、民乐等进行野生毛木耳生长环境调查，并采集了野生毛木耳。将采集的毛木耳子实体带回实验室分离培养。方法是先将子实体的泥土清理干净，采用组织分离的方法在无菌条件下进行操作，分离时选择朵型正常，无病虫生长健壮的毛木耳子实体。分离取材按基部、距基部1 cm处、边缘三个部位。培养基采用PDA加富培养基，在适宜条件下进行培养，获得毛木耳菌种（暂命名为：容耳1号）用作试验菌种。

1.2 驯化试验

1.2.1 菌丝生长温度范围测定 2013年4月进行了菌丝生长温度范围的测定。将扩大培养的毛木耳菌丝接到PDA加富培养基斜面试管上，置于5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃培养条件下培养，每个温度处理培养5支试管。接种10 d后测量菌丝生长速度（mm/d）（方法：菌丝生长前端距试管底部的距离除以菌丝生长天数，再取平均数）。同时观察菌丝形态特征。

1.2.2 不同母种培养基配方筛选 试验设计了5种母种培养基配方（1000 mL）：①马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g。②马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，硫酸镁2 g，磷酸二氢钾2 g。③马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，硫酸镁2 g，磷酸二氢钾2 g，蛋白胨2 g。④马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，硫酸镁2 g，磷酸二氢钾2 g，蛋白胨4 g。⑤马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，硫酸镁2 g，磷酸二氢钾2 g，麸皮20 g。2013年5月，将分离纯化好的毛木耳母种扩大培养，取菌龄相同0.5 cm大小的接种块分别接入试管斜面中，每个配方设3个重复，共接15支斜面试管。接好后放置25℃恒温箱内培养，接种10 d后测量菌丝生长速度（mm/d），并观察菌丝形态特征。

1.2.3 母种培养基pH筛选 对PDA加富培养基设置了6个pH梯度：4、5、6、7、8和9。将纯化好的毛木耳母种扩大培养，取菌龄相同0.5 cm大小的接种块分别接入上述试管斜面中，每个pH处理设3个重复共接18支斜面。接好后放置25℃恒温箱内培养，接种10 d后测量菌丝生长速度（mm/d），并观察菌丝形态特征。

1.2.4 原种及栽培种培养试验 原种和栽培种用相同的培养基，试验设5种培养基配方：①木屑68%、棉子壳15%、麸皮15%、石膏1%、磷酸钙1%；②木屑78%、棉子壳19%、石灰2%、磷酸钙1%；③木屑97%、石膏1%、磷酸钙2%；以上各配方培养料按照常规制作，高压蒸汽灭菌→冷却→无菌室接种，每个配方设5个重复，共接15袋。接好后放置25℃恒温箱内培养，观察菌丝形态特征。

1.2.5 栽培试验 出耳温度试验：试验设计了低温（15℃±3℃）出耳，常温（25℃±3℃）出耳，35℃±3℃以上出耳，共3个处理。

袋栽试验：当菌棒袋壁上的菌丝扭结凸起时，即原基形成时，在袋壁用刀划“V”形口，喷雾保湿，保持空气相对湿度在85%～90%，促进子实体迅速生长。

段木栽培试验：当耳木含水量为40%～45%时，将耳木放入稀石灰水中浸泡1 h左右，取出晾干，打孔，接种，喷水保湿发菌，观察出耳情况。

2 结果与分析

2.1 大容山毛木耳不同部位组织分离培养结果从表1看出，毛木耳子实体不同部位组织分离成功率存在较大差异：基部组织分离成功率较低，只有60%；边缘的组织分离成功率稍高，为80%；距基部1 cm处的组织分离成功率最高，达90%。毛木耳子实体不同部位组织分离菌丝在同一培养基内的生长速度及长势存在一定的差异：基部和距基部1 cm处组织分离的菌丝不但生长速度快，而且表现出较好的生长势，即生长旺盛、菌丝前端整齐、洁白浓密、粗壮有力；而边缘组织分离的菌丝生长速度慢，长势表现一般，前端不够整齐、菌丝较为稀疏、颜色偏淡。

表1 大容山野生毛木耳不同部位分离菌丝生长情况（培养温度25～28℃）

2.2 菌丝培养温度试验结果由表2可见，不同温度对野生毛木耳菌丝生长的影响不同。菌丝生长温度范围为15～25℃，适宜的温度是20～25℃，最佳温度25℃，菌丝长势旺盛，菌丝浓密，整齐，菌丝生长速度达5.8 mm/d。当温度在高于35℃低于5℃时，菌丝不生长；温度低于15℃以下菌丝生长缓慢、微弱。

表2 不同温度对大容山野生毛木耳菌丝生长的影响

2.3 母种培养基试验结果由表3可见，在配方④和⑤培养基上，毛木耳菌丝浓密，生长旺盛，菌丝边缘整齐度好，生长速度快，分别为6.01 mm/d，6.18 mm/d。由此可见蛋白胨和麸皮可以提供丰富的营养元素适宜毛木耳菌丝的生长。

表3 5种培养基中大容山毛木耳菌丝生长情况

2.4 母种培养基pH试验结果由表4可见，大容山野生毛木耳在不同pH条件下菌丝前端整齐度、菌丝浓密、菌丝长势、菌丝生长速度有所不同。pH为6时，菌丝前端整齐、浓密、长势好，生长速度最快，为6.11 mm/d；pH为9时，菌丝微弱，菌丝稀疏，不整齐，生长速度仅为3.08 mm/d，在其他pH下的菌丝生长速度为：pH7＞pH5＞pH4＞pH8。

表4 不同p H大容山野生毛木耳菌丝生长情况

2.5 不同原种培养基培养结果配方①毛木耳菌丝生长旺盛，菌丝浓密，菌丝前端整齐，菌丝满袋需25～28 d；配方②毛木耳菌丝密，长势一般，整齐度一般，菌丝满袋需30～35 d；配方③毛木耳菌丝稀疏，长势弱，前端不整齐，菌丝满袋需32～38 d。毛木耳在供试三种培养基上均能生长，其中配方①培养基菌丝长势优于另两个培养基，菌丝满袋时间也早于另两个培养基。

表6 毛木耳不同栽培方式出耳情况

2.6 栽培试验结果由表6可见，毛木耳在15℃低温出耳的一组、25℃处理的一组和35℃以上处理一组都可以出耳，出耳最适温度为25℃处理的一组；毛木耳栽培方式上适宜袋栽，段木栽培在25℃处理的一组子实体长势一般。

3 小 结

试验表明：大容山野生毛木耳菌丝最适宜生长温度为20～25℃；最适宜生长pH 6～7；最适宜出耳温度25～30℃，温度太低或太高对毛木耳菌丝体的生长均不利；出耳不需要温差，属于中温恒温型菇类；菌丝在添加4 g蛋白胨的PDA加富母种培养基和添加20 g麸皮的PDA加富母种培养基生长较好，说明毛木耳菌丝生长要求的氮素营养较高，为此在生产中要添加适量的饼粉、麸皮、玉米粉等含氮物质。