缸染法抗酸染色显微镜方法检查抗酸杆菌结果分析

王敏娣+孙丽娜+梁慧+邱颖+陈然

[摘要] 目的 分析抗酸杆菌应用缸染法抗酸染色显微镜方法进行检查的结果。方法 方便选择2008年1月—2016年1月该单位收治的100例结核病患者作为观察组，并将该单位同期收治的100例结核病患者设为对照组，予以对照组单片分置染色，予以观察组单片浸入混合染色，比较两组检查结果。 结果 观察组抗酸杆菌检出率95.00%，对照组抗酸杆菌检出率80%，对比差异有统计学意义（P<0.05）。观察组污染率0.00%，对照组污染率10.00%，对比差异有统计学意义（P <0.05）。结论 缸染法抗酸染色显微镜方法应用在抗酸杆菌检验中，检出率高，污染发生率较低，值得推广。

[关键词] 抗酸杆菌；缸染法抗酸染色显微镜；检查结果

[中图分类号] R331 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2017）03（b）-0083-03

[Abstract] Objective To analyze the application effect of cylinder dyeing acid-fast stain microscopy method in examining the acid-fast bacilli results. Methods 100 cases of patients with tuberculosis admitted and treated in our unit from January 2008 to January 2016 were conveniently selected as the observation group， and 100 cases of patients with tuberculosis admitted and treated in our unit at the same period were selected as the control group， the control group were given the monolithic separated dyeing， while the observation group were given the monolithic immersion mixture dyeing， and the examine results were compared between the two groups. Results The difference in the test rate of acid-fast bacillus between the observation group and the control group had statistical significance by comparison （95.00%vs 80.00%）（P<0.05）， and the difference in the pollution rate between the observation group and the control group had statistical significance（0.00% vs 10.00%）（P<0.05）. Conclusion The test rate of cylinder dyeing acid-fast stain microscopy method in examining the acid-fast bacilli is high and the incidence rate of pollution is lower， which is worth promotion.

[Key words] Acid-fast bacilli； Cylinder dyeing acid-fast stain microscopy； Examination results

結核病是我国发病率极高的一种慢性传染病，该病主要由结核杆菌感染而诱发，因此给予结核病患者应用一种可靠、操作简单的筛选方法进行检查意义重大[1-2]。在临床上预防和诊断结核疾病的途径主要是通过检测结核杆菌及分析其病理而实施的，所以，如何科学有效地检查出分支杆菌的细菌，准确迅速发现传染源对于结核病患者的临床诊治具有十分重要的意义。缸染法抗酸染色显微镜方法是当前临床检查结核病常用的方法之一，该检查方法查找患者痰液中的抗酸杆菌时，操作较简单，并不需要使用昂贵的仪器设备，同时具有极强的特异性，临床工作人员可以省去进一步确认的步骤，从而明显提高结核病控制工作的质量[3-5]。为了分析抗酸杆菌应用缸染法抗酸染色显微镜方法进行检查的结果，该文对2008年1月—2016年1月该单位收治的200例结核病患者作出研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选择该单位收治的100例结核病患者作为观察组，其中男64例，女36例；年龄21～37岁，平均年龄（22.26±1.08）岁；病程0.1～3年，平均病程（1.02±0.27）年。同时将该单位同期收治的100例结核病患者设为对照组，其中男62例，女38例；年龄20～36岁，平均年龄（22.14±1.02）岁；病程0.2～3年，平均病程（1.06±0.25）年。两组患者的一般资料经对比差异无统计学意义（P>0.05），可进行对比。

1.2 方法

两组患者在2周内已进行抗酸杆菌检查，若患者检查结果显示为阳性，则均取1份痰液标本，每份痰液标本均作直接涂片6张，自然干燥后，固定放置在100 mL初染剂中进行染色，时间为5 min，然后取出4片使用自来水冲洗，用脱色剂脱色后，再用自来水冲洗，其中2片放置在100 mL脱色剂中，剩下2片则放置在100 mL复染剂中。上述涂片均各使用1张新玻片将其涂层尽量刮擦下来混入各染色组分中，并且当做当天的污染攻击染液组分。其中对照组患者的标本直接涂片采取单片分置染色，观察组患者的标本直接涂片采取单片浸入混合染色，模拟进行平行检测。同时取两组抗酸杆菌检查结果为阴性者的痰标本直接涂片3份，主要当做污染法阴性无污染对照。

1.3 统计方法

选择SPSS 19.0统计学软件以及excel软件分析两组患者的全部数据资料，计数资料采用[n（%）]表示，采用χ2检验，以P <0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者镜检结果对比

观察组患者的抗酸杆菌检出率为95.00%，对照组患者的抗酸杆菌检出率为80%，将两组患者的抗酸杆菌检出率进行对比，发现观察组明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.2 两组患者污染率对比

观察组患者的抗酸杆菌检查污染率为0.00%，对照组患者的抗酸杆菌检查污染率为10.00%，将两组患者的抗酸杆菌检查污染率进行对比，发现观察组明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表3。

3 讨论

目前临床检查抗酸杆菌时，临床标本直接涂片抗酸染色显微镜方法是应用范围较广的一种检查方法，该检查方法相对于热染法来说，操作步骤更简单，并且染液用量更少，同时还能对环境进行保护[6-9]。当前国内结核病控制对策中，通过痰涂片对抗酸杆菌进行的实验方法是结核病控制工作人员找出传染源的主要方法，该检查方法设备并不复杂，操作难度低，同时可以快速获取报告结果，具有极高的特异性[10-12]。但是直接涂片抗酸染色显微镜方法也存在部分缺点，比如敏感性不高，检验结果较容易受痰标本质量、留置时间以及临床检验人员等因素的影响。基于此，详细分析缸染法抗酸染色显微镜方法的优缺点，并制定对应措施，可直接关系到抗酸杆菌的临床检查结果[13-14]。

该研究结果显示，观察组抗酸杆菌检出率95.00%，对照组抗酸杆菌检出率80.00%，对比差异有统计学意义（P<0.05）。观察组污染率0.00%，对照组污染率10.00%，对比差异有统计学意义（P<0.05）。该研究结论与孙丽娜等人[15]的研究观点一致。值得一提的是，在该研究中，观察组患者均未出现污染现象，该结果充分缸染法值得应用在日常工作中。目前，已有部分临床实验报道指出，通常情况下涂片阳性1 mL标本内含菌量并不低于5万，一般需要大概10 000个抗酸菌/mL才可以取得阳性结果。如果标本污染浓度低于上述浓度，则说明污染造成的影响并不大，再通过多个步骤冲洗后，也许污染已经被消除。但是为了确保检查结果，临床工作人员还是应该建议复核，这是因为每天工作中的检出片数并不是很多[16-17]。基于此，缸染法并未产生污染现象，检出者也提出复核建议，若该检查方法进一步被改善后，则能够在很大程度降低临床工作人员的工作量，再加上该检查方法所使用的仪器价格并不高，全面推广的难度也不大。即使缸染法没有进一步被改善，但是其手工操作也十分简单，相对于单片分置手动染色来说，工作效率更大，因此在某种程度上也可以缓解临床工作人员的工作量，并且为临床治疗提供有参考价值的数据[18-20]。另外，该研究中，缸染法抗酸染色显微镜方法检查组患者的检出率为95.00%，再结合以往登记情况，需要进行复核的人数并不多，该结果从另外一个方面说明，临床对于己知感染患者，可省去复核这一步骤。由此可知，缸染法能够当做目前临床未检出抗酸杆菌的筛选方法。此外，缸染法中所使用的各试剂组分只要不对染色效果产生影响，则可以适当重复应用或者进行过滤后再继续应用，甚至再次添加原液继续应用，从而在很大程度上降低成本[21]。但是临床工作人员还是需要注意：参与混染全部涂片均需要彻底自然干燥同时固定后才可以进行染色，如果未干燥，则多数属于问题标本，较容易致使污染，甚至形成染液报废现象[22]。该种现象出现后，临床镜检特点表现为产生的陈旧性絮状夹带与背景并不相同，同时出现连续多片污染，染色过程中一触碰便为污染。除非染色原因外，涂片或者涂片前也能造成污染，这些均值得临床工作人员的重视。

综上所述，抗酸杆菌检验过程中使用缸染法抗酸染色显微镜方法，污染发生率较低，保证检查结果，值得推广。

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