苗药复方通光散对实热型胃溃疡大鼠血浆、胃窦部组织中PGE2含量的影响
2017-05-18邢德伦崔海明
邢德伦 张 林 崔海明
(1.重庆市垫江县中医院,重庆 垫江 408300;2.河北省中医院,河北 石家庄 050000;3.重庆市石柱县中医院,重庆 石柱 409100)
苗药复方通光散对实热型胃溃疡大鼠血浆、胃窦部组织中PGE2含量的影响
邢德伦1张 林2崔海明3
(1.重庆市垫江县中医院,重庆 垫江 408300;2.河北省中医院,河北 石家庄 050000;3.重庆市石柱县中医院,重庆 石柱 409100)
目的:研究“复方通光散”对wistar大鼠实热型胃溃疡的药效,为临床运用民族医药“复方通光散”治疗实热型胃溃疡提供理论依据。方法:取wistar大鼠60只,随机分为6组,即空白组、模型组、丽珠得乐组、复方通光散低、中、高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组均建立大鼠实热型胃溃疡模型。在造模成功的次日,给予各组大鼠灌服相应药物,早晚各1次,给药时间共计16d,于实验的第26d将大鼠脱颈处死,取血并进行胃黏膜取材,并测定大鼠血浆和胃窦部组织中前列腺素E2(PGE2)的水平。结果:与空白组比较,模型、复方通光散低、中剂量组均有极显著性差异(P<0.01),而丽珠得乐和高剂量组则没有显著性差异(P>0.05);与模型组比较,空白、丽珠得乐、复方通光散中、高剂量组均有极显著性差异(P<0.01),而低剂量组则没有显著性差异(P>0.05);与丽珠得乐组比较,复方通光散低剂量组有极显著性差异(P<0.01),中剂量组则有显著性差异(P<0.05),高剂量组则没有显著性差异(P>0.05)。结论:①复方通光散高、中剂量组对实验性大鼠实热型胃溃疡有确切的疗效,且高、中剂量组均优于低剂量组,具有一定的量效关系。②复方通光散高、中剂量组可促进胃黏膜组织的表面黏液细胞合成、分泌、释放PGE2,这可能是该药抗实验性大鼠实热型胃溃疡的主要机制之一。
复方通光散;实热型胃溃疡;PGE2
胃溃疡是以饥饿不适、饱胀嗳气、泛酸、或餐后定时慢性中上腹疼痛,严重时可伴有黑便或呕血为典型症状的一种常见的慢性胃肠道疾病。各种与胃溃疡的发生有关的因素,通过不同途径或机制,均可促使溃疡的发生,已严重危害人民的健康,所以应予以高度重视。现代医学在治疗胃溃疡方面取得了一定的疗效。然而,诸多西药所带来的副作用也日益引起了人们的关注。近年来大量临床报道表明,中医药、民族医药通过其传统的中医理论对胃溃疡进行多途径、多靶点的辨证施治,取得了确切的疗效。因此,本课题选取临床疗效明确的中药复方制剂复方通光散,通过动物实验进一步验证它治疗实热型胃溃疡的疗效。
1 实验材料
1.1 实验动物:wistar大鼠,雌雄各半,体重200±20g,清洁级二级,由贵阳医学院实验动物中心提供。大鼠置于室温为20~24℃,湿度为50%左右[1]的普通级环境中饲养。实验期间各组大鼠自由饲食,饮用自来水。
1.2 主要药品及试剂:复方通光散以通光散为领头药,辅以朱砂莲和蒲公英,按6:5:2比例组成。3味药材均由贵阳中医学院方药教研室汪毅教授自黔东南雷山采集提供,经鉴定为正品后入药。按照人和大鼠每千克体重剂量折算系数[2]折算,将其水煎液浓缩为1g/mL,置于4℃冰箱内保存。
丽珠得乐枸橼酸铋钾胶囊(规格:0.3g/粒):丽珠集团丽珠制药厂生产,批准文号:国药准字H10920098号,临用前用生理盐水稀释。
干辣椒粉:重庆市沙坪坝区雯棋食品厂生产,批准文号:执行标准QCWQ3-2007号,临用时打开即可使用。
无水乙醇:分析纯,重庆川东化工集团有限公司化学试剂厂生产,批准文号:国药准字H20070110号,临用前可按照所需浓度进行配比。
冰醋酸:重庆川江化学试剂厂生产,批准文号:国药准字H20070429号,临用前将其配成20%的冰醋酸。
1.3 主要仪器及设备:JJ200型精密电子天平(常熟双杰测试仪器厂生产);800型离心沉淀器(上海手术器械厂生产);手术显微镜(常州三能光学设备有限公司)。
2 实验方法
2.1 实热型胃溃疡大鼠模型的建立:依照文献[3][4]将各组wistar大鼠用2%的戊巴比妥纳2mL/kg腹腔麻醉后,以仰卧位固定于手术台上,剪掉腹壁被毛,按无菌操作,在剑突下做2.0~2.5cm的腹部正中切口,用弯镊在肝脏下方将十二指肠轻轻勾出,并将腺胃部轻轻提起,在胃的腹侧面,胃体部与幽门窦交界处,用1mL注射器从浆膜面进针0.4~0.5mm,将0.05mL20%醋酸注入黏膜下,形成丘疹,而空白对照组则按同样的方法,将0.05mL的生理盐水注入黏膜下,将胃轻轻送回,关腹,可用80万单位的青霉素钠涂于伤口,防感染。将手术造模后的wistar大鼠置于干燥的鼠笼中,并给予MTC微波手术治疗仪照射,予以抗炎、保暖。溃疡造模后,次日施加热因刺激,空白对照组给予2mL/100g灌饲生理盐水,其他各组均给予等量的辣椒汁混合液(干辣椒粉:50%乙醇=1:10)1次/d,共计6d。
2.2 动物的分组及处理方法:选用wistar大鼠60只,雌雄各半,常规饲养1周后,随机抽取10只作为空白组;其余50只大鼠进行造模,造模结束时大鼠死亡9只,随机抽取5只(4只模型组大鼠和1只空白组大鼠),取胃窦部组织做病理切片(3d),结果显示已形成胃溃疡。随后将剩余37只大鼠随机分为5组:模型组7只、丽珠得乐组8只、复方通光散低剂量组7只、复方通光散中剂量组8只、复方通光散高剂量组7只。在造模成功的次日给予各组大鼠灌服相应药物,早晚各1次。空白组和模型组每次灌服生理盐水各2mL;丽珠得乐组给药剂量为0.07g/kg;复方通光散低剂量组给药剂量为1.93g/kg;复方通光散中剂量组给药剂量为3.85g/kg;复方通光散高剂量组给药剂量为7.70g/kg,以上各给药组均用生理盐水稀释至2mL。给药时间共计16d,于实验的第26d将大鼠脱颈处死。
2.3 观测指标及检测方法
2.3.1 大鼠血浆中PGE2的测定:采用放射免疫法,按试剂盒说明书进行规范操作。
2.3.2 大鼠胃窦部组织中PGE2的测定:采用放射免疫法,按试剂盒说明书进行规范操作。
3 统计方法
4 实验结果
4.1 复方通光散对各组大鼠血浆中PGE2含量的影响(见表1)
表1 各组大鼠血浆中PGE2含量的比较
注:与空白组相比,aP<0.01;与模型组相比,bP<0.01
4.2 复方通光散对各组大鼠胃窦部组织中PGE2含量的影响(表2)
表2 各组大鼠胃窦部组织中PGE2含量比较
注:与空白组相比,aP<0.01;与模型组相比,bP<0.01
5 讨 论
受试药物“复方通光散”是源于黔东南雷山等地的苗族验方,该方由通光散、朱砂莲、蒲公英3味药组成,针对实热型胃溃疡病机,适证加减,临床取得了较好的疗效。复方通光散中的通光散具有清热解毒,软坚散结止痛之功效,本方重用之,为领头药;朱砂莲既能清热解毒,理气散瘀,又能助通光散镇痛,为方中铺底药;蒲公英具有清热解毒,消痈散结之功效,与通光散和朱砂莲配伍可加强凉血散瘀止痛之作用,为方中监护药。三药合用,共凑清热解毒,理气散结,镇痛止血之功效。
本实验结果显示,复合因素诱发大鼠实热型胃溃疡后,PGE2的含量显著降低,与空白组形成极显著差异(P<0.01),说明模型组大鼠溃疡处于形成过程中,其胃黏膜分泌细胞保护性激素功能受损。经复方通光散灌胃治疗后,其含量明显升高,以丽珠得乐及复方通光散中、高剂量组最为明显,与模型组有极显著差异(P<0.01),但与正常组尚有距离,表明复方通光散中、高剂量可显著促进实热型胃溃疡大鼠胃黏膜上皮细胞合成和分泌PGE2,从而增强胃黏膜的防御功能。因此,本实验结果表明复方通光散对实验性大鼠实热型胃溃疡具有较好的治疗效果。
综上所述,复方通光散高、中剂量组对实验性大鼠实热型胃溃疡有确切的疗效,且高、中剂量组均优于低剂量组,具有一定的量效关系。且中、高剂量组可显著提高大鼠血浆及胃窦部组织中PGE2的含量,表明该药可促进胃黏膜组织的表面黏液细胞合成、分泌、释放PGE2,这可能是该药抗实验性实热型胃溃疡的主要机制之一。
[1] 邹移海.实验动物学[M].第8版.北京:科学出版社,2004:46-48.
[2] 苗明三.实验动物和动物实验技术[M].北京:中国中医药出版社,1997:144-145.
[3] 陈奇.中药药理研究方法学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2006:79-96,430-445.
[4] 黎敬波.胃溃疡胃实寒、实热症模型大鼠经穴辐射热、pH值、氧分压的检测研究[J]. 湖南中医学院学报,1998,18(3):56.
2016年9月12日收稿
Impact of Miao medicine complex tongguang powder on content of PGE2 in rats real hot gastric ulcer
XING De-lun1ZHANG Lin2Cui Hai-ming3
(1. Chongqing dianjiang county TCM hospital, Chongqing Dianjiang 408300;2. The Chinese medicine hospital in hebei province, Hebei shijiazhuang 050000;3. Shizhu county TCM hospital of Chongqing, Chongqing Shizhu 409100)
Objective:To study the effect of "compound Tong San San" on the Wistar rat model of gastric ulcer and to provide the theoretical basis for the treatment of heat type gastric ulcer.Methods: 60 Wistar rats were randomLy divided into six groups: control group, model group, lizhudele group, compound light scattered low, medium and high dose groups, 10 rats in each group. In addition to the blank group, the other groups were all established rat model of gastric ulcer. In the modeling, the rats given orally with corresponding drugs, sooner or later each 1 times, delivery time of a total of 16 days, on the twenty-sixth day of the experiment, the rats were sacrificed, blood and gastric mucosa were measured and prostaglandin E2 plasma and gastric antrum tissue of rats (PGE2) the level of.Results: compared with the blank group, model, compound Marsdenia low and middle dose group had significant difference (P<0.01), and lizhudele and high dose group had no significant difference (P>0.05); compared with the model group, blank, lizhudele and compound light scattered in the high dose group there were significant differences (P<0.01), low dose group were no significant difference (P>0.05); and lizhudele group, compound Marsdenia low dose group had significant difference (P<0.01), middle dose group had significant difference (P<0.05), while there was no significant difference between high dose group (P>0.05).Conclusion: the high dose group and middle dose group have definite therapeutic effect on experimental gastric ulcer in rats, and the high and middle dose group are better than low dose group, and have a certain dose effect relationship. The high and medium dose group could promote the synthesis, secretion and release of PGE2 in gastric mucosa tissue. This may be one of the main mechanisms of the drug resistance to experimental gastric ulcer in rats.
Compound Tong light powder; solid heat type gastric ulcer; PGE2
R291.6
A
1006-6810(2017)03-0045-03