蒸发光法检测蒙药胡芪降脂胶囊中黄芪甲苷的含量

2017-05-18赵俊苹

中国民族医药杂志 2017年3期

关键词：甲苷降脂黄芪

赵俊苹

(内蒙古自治区呼和浩特市食品药品检验所，内蒙古呼和浩特 010020)

蒸发光法检测蒙药胡芪降脂胶囊中黄芪甲苷的含量

赵俊苹

(内蒙古自治区呼和浩特市食品药品检验所，内蒙古呼和浩特 010020)

目的：建立高效液相色谱法测定胡芪降脂胶囊中黄芪甲苷含量的方法。方法： MGⅡ C18柱(5μm、4.6×250mm)，流动相：乙睛-水(35∶65)，检测器：蒸发光散射检测器，柱温30℃。结果：黄芪甲苷在0.5082～5.0825μg范围内呈良好的线性关系。回归方程为y=1.874x+11.20 ,r=0.9992，平均回收率为102.07%，RSD为0.95(%)。结论：本法简便、可靠，可作为该药的质量控制方法。

胡芪降脂胶囊;黄芪甲苷;高效液相色谱法

胡芪降脂胶囊由黄芪、当归、荜茇3味药组成，是内蒙古自治区国际蒙医医院临床使用处方，具有清血、降血脂、增加免疫力等功效，主治冠心病、肝炎、高血压、高血脂等疾病。为了保证临床用药安全质量可控原则，对此品种进行质量标准研究。

本文参照《中国药典》2010年版一部 “补中益气丸(水丸)”项下蒸发光散射器检测含量测定方法[1-2]，以黄芪甲苷作为指标成分，进行含量测定方法研究。经分析方法验证，该方法重现性好，专属性强，方法中其它成分对黄芪的测定无干扰，专属性较强。结果报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器: Waters高效液相色谱仪1525，蒸发光散射检测器(ELSD)2424，Empower 色谱工作站。

1.2 试剂与试药：黄芪甲苷对照品(批号110781-200613，供含量测定用)中国药品生物制品检定所；样品胡芪降脂胶囊(批号：20130822、20131022、20131208)、黄芪、当归、荜茇均由内蒙古国际蒙医医院提供；乙腈为色谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

2.1.1 色谱柱：色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，本实验研究采用资生堂 MGⅡ C18柱 (5μm，4.6×250mm)及Alltima C18柱(5μm ，4.6×250mm)。

2.1.2 供试品溶液提取方法：取装量差异项下的本品内容物，研细，取3g，精密称定，置索氏提取器中，加入甲醇适量，加热回流提取7h，提取液回收甲醇至干，残渣加水25mL，微热使溶解，用乙醚轻摇洗涤2次，每次20mL，水溶液再用水饱和的正丁醇振摇提取6次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次40mL，正丁醇液回收溶剂至干，残渣用甲醇溶解，转移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.1.3 对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液，即得。

2.1.4 阴性对照试验：按2.1.2及2.1.3项下的方法制备供试品溶液、对照品溶液，另取按处方比例并以相同工艺制备的缺黄芪的阴性对照，按供试品溶液制备法制得阴性对照溶液。在上述色谱条件下，分别精密吸取对照品溶液、阴性对照溶液、供试品溶液各20μL ，分别注入液相色谱仪，测得结果为阴性对照色谱图中在与黄芪甲苷对照品以及供试品色谱相对应的保留时间处无色谱峰出现，表明处方中其它组分对黄芪甲苷的测定无干扰。见图1、2、3。

2.1.5 线性关系考察：精密称取黄芪甲苷对照品约2.032mg，置10mL 量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。(黄芪甲苷0.2033mg/mL)分别取2.5、5、10、15、20、25μL 进样，按上述色谱条件测定，以峰面积对进样浓度对数方程进行回归分析，结果黄芪甲苷在0.5082～5.0825μg 范围内呈良好的线性关系。回归方程为y=1.874x+11.20 r=0.9992。

2.1.6 稳定性试验：取同一份供试品溶液，分别在0h、2h、4h、8h、10h、18h进行测定，结果黄芪甲苷在18h内的面积积分值未超0.6%。

2.1.7 重复性试验：取同一批号样品(批号20130822)6份，各取约3g，按含量测定方法操作，测定每份样品含量，按标准曲线对数方程计算含量。结果平均含量为0.4560mg/g，RSD为0.28%。

2.1.8 加样回收试验：取供试品(批号20130822，含量0.45305mg/g)6份，各约1.5g，精密称定，置索氏提取器中，加入甲醇适量，加热回流提取7h，提取液回收甲醇至干，残渣加水25mL，微热使溶解，再分别依次精密加入黄芪甲苷对照品溶液(黄芪甲苷0.3120mg/mL)2.0mL，用乙醚轻摇洗涤2次，按2.1.2项下方法操作，测定每份含量，计算回收率，结果见表1。