清气凉营颗粒抗流感病毒药效学研究和分子机制分析

王 旭，余苏云，沈培亮，汪思亮，韦忠红，刘兆国，王爱云,3，陈文星,3，陆 茵,3

(1. 南京中医药大学药学院，江苏 南京 210023；2. 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室，江苏 南京 210023；3. 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心，江苏 南京 210023)

◇复方药物药理学◇

清气凉营颗粒抗流感病毒药效学研究和分子机制分析

王 旭1,2，余苏云1,2，沈培亮1,2，汪思亮1,2，韦忠红1,2，刘兆国1,2，王爱云1,2,3，陈文星1,2,3，陆 茵1,2,3

(1. 南京中医药大学药学院，江苏 南京 210023；2. 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室，江苏 南京 210023；3. 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心，江苏 南京 210023)

目的 探讨清气凉营颗粒抗流感病毒药效学研究和分子机制分析。方法 体内实验验证清气凉营颗粒抗甲型流感药效，同时利用活性成分筛选、靶点预测技术，结合生物信息学手段，确定清气凉营颗粒治疗流感的特异性靶点，并进行信号通路富集分析，探讨其治疗流感的分子机制。结果 体内实验显示清气凉营颗粒具有抗甲型流感的作用，而其抗流感的分子机制主要参与了Wnt信号通路，调控细菌侵袭性上皮细胞信号通路，同时也影响了致病性大肠杆菌感染信号通路、军团杆菌病信号通路和甲型流感信号等通路。结论 清气凉营颗粒主要从抑制细菌感染、抗病毒感染和抑制病毒复制3个方面抑制流感。

清气凉营颗粒；中药复方；流感；系统药理学；网络药理学；分子机制

流感是常见的急性呼吸道感染疾病，主要病原体为流感病毒，属于正粘病毒科的含包膜的RNA病毒。由于其基因突变性较高，人体对新病毒株缺乏免疫性, 每年爆发的流感病毒会造成2～4万人死亡，给社会带来严重的经济负担[1]。现有的预防和治疗流感的药物主要包括生物疫苗、神经氨酸酶抑制剂(oseltamivir和zanamivir)、M2离子通道抑制剂(金刚烷胺类)等，但由于流感病毒高抗原漂移性，这些针对单靶点的抗流感药物都面临着耐药性和滞后性的问题[2]。而中药及其复方具有抑制病毒复制、阻止病毒致细胞病变、调节免疫功能、改善肺循环、镇痛抗炎等综合功效，在治疗流感的同时可以有效地控制流感并发症。因此，中药复方在防治流感方面具有独特优势和广阔发展前景[3-6]。

清气凉营颗粒在国医大师周仲瑛教授“病理中心在气营”及“到气就可气营两清”的理论基础上，由清气凉营注射液工艺优化开发而来，由大青叶、金银花、大黄、知母、淡竹叶、野菊花等组成，具有清气泄热、凉营解毒的功效[7]。临床研究证实，清气凉营注射液对于流感具有较好疗效，能够明显改善流感并发症状[8]，而优化的清气凉营颗粒抗流感作用虽有较为充足的临床使用经验，但缺乏药效学研究，药效物质基础和分子机制至今尚不明确。因此，实验验证清气凉营颗粒抗病毒的药效，分析清气凉营颗粒起效的活性成分和作用靶点，分析其可能的作用机制，对于阐述清气凉营颗粒的科学内涵，促进其临床推广应用具有重要意义。对于中药复方研究，目前已有的研究手段存在检测灵敏度低、缺乏可靠评价指标等问题，难以科学、全面阐释中药复方的作用机制。

系统药理学提供了整套基于系统生物学理论，从系统水平研究中药复方潜在活性成分和作用靶点的研究策略。本文利用口服生物利用度、药物相似性对清气凉营颗粒中所有已报道的成分进行筛选，预测可能入血的活性成分，同时利用化合物相似性等特征预测其分子靶标[9-10]。结合生物信息学芯片分析和蛋白质相互作用网络分析的手段，进一步预测清气凉营颗粒治疗流感的作用靶点，对靶点进行富集分析，探讨其可能的作用机制。流程图见Fig 1。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验药物 清气凉营颗粒：清气凉营浸膏，由江苏苏中药业集团股份有限公司提供，批号：20110602，每克浸膏折合生药量3.572 g。以下均以生药量计。双黄连颗粒：哈药集团中药二厂，批号：101106；利巴韦林颗粒：四川百利药业有限责任公司，批号：100702。

Fig 1 The molecular mechanism analysis flow chart of QingQiLiangYing granule in treatment of influenza

1.1.2 实验用病毒 甲型流感病毒A/PR8/34(H1N1)：由中国预防医学科学院病毒研究所提供。

1.1.3 实验动物 ICR小鼠由南通大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(苏)2008-0010。实验用全价营养颗粒饲料，由江苏协同医药技术有限责任公司提供。ICR小鼠随机分组，分笼饲养，喂饲全价营养颗粒饲料，自由饮水，室温(22±2)℃，湿度55%～65%。

1.1.4 仪器与试剂 FA1004电子天平：上海精科天平厂；超净工作台：苏州净化设备厂；孵箱：上海分析仪器厂；乙醚：上海中试化工总公司，批号：20100425。

1.2 方法

1.2.1 清气凉营颗粒对甲型流感病毒A/PR8/34感染小鼠死亡的影响 取ICR小鼠140只，体质量13～16 g，♀♂各半，随机分7组，每组20只。正常组给予等容积生理盐水(normal saline，NS)；模型组给予等容积NS；双黄连颗粒组给予双黄连颗粒23.4 g·kg-1；利巴韦林组给予利巴韦林0.1 g·kg-1；清气凉营颗粒低、中、高剂量组分别给予清气凉营颗粒10.53、31.59、 63.18 g·kg-1。给药体积10 mL·kg-1。以上各组按上述剂量灌胃给药，每天1次，连续7 d。于给药当日，各组小鼠(除正常组)在乙醚浅麻醉下，以甲型流感病毒尿囊液给小鼠滴鼻感染。每鼠100 μL，观察动物感染后发病及死亡情况，记录14 d内死亡数。

1.2.2 清气凉营颗粒对甲型流感病毒感染小鼠肺指数的影响 取ICR小鼠70只，体质量13～16 g，♀♂各半，随机分7组，每组10只。正常组给予等容积NS；模型组给予等容积NS；双黄连颗粒组给予双黄连颗粒23.4 g·kg-1；利巴韦林组给予利巴韦林0.1 g·kg-1；清气凉营颗粒低、中、高剂量组分别给予清气凉营颗粒10.53、31.59、63.18 g·kg-1。给药体积10 mL·kg-1。以上各组按上述剂量灌胃给药，每天1次，连续7 d。于给药d 1各组小鼠(除正常组)在乙醚浅麻醉下，以甲型流感病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每鼠100 μL。实验前禁食不禁水，连续给药7 d后，d 8各组小鼠称重，脱颈处死，解剖，观察肺部病变，取全肺称重，计算各鼠肺指数值，比较各组间差异，并取肺用10%甲醛固定，做病理组织学检查。

1.2.3 清气凉营颗粒中活性成分的筛选和靶点预测 通过检索中药成分数据库TCMSP，构建清气凉营颗粒所有成分数据库。TCMSP是国内较为全面的中药成分靶点数据库，包含了药典收录的505味中药，12 144个已有报道的中药成分，每个成分含有详细的ADME参数，包括口服吸收利用度(oral bioavailability，OB)、药物相似性(drug-likeness，DL)、Caco-2细胞渗透性、半衰期、血脑屏障、脂水分布系数等。根据前期研究结果，推荐的筛选条件为OB≥30%，DL≥0.18，将获取的活性成分与文献比对，同时利用TCMSP靶点预测模型预测活性成分作用靶点[11]。

1.2.4 清气凉营颗粒“活性成分-靶点网络”构建 将从TCMSP获取的成分、靶点关系导入网络图像化软件Cytoscape 3.2.1，构建清气凉营颗粒“活性成分-靶点网络”，其中分子、靶蛋白用“节点”(node)表示, 成分与靶点之间的关系用“边”(edge)表示。完成网络构建后，进一步利用Cytoscape软件中的 network analyzer插件分析网络特征，分析清气凉营颗粒中较为重要的成分和靶点。并通过文献查阅，分析节点作用。

1.2.5 GEO芯片数据分析流感相关靶点 从Gene Expression Omnibus数据库(GEO，http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/)下载编号为：GSE17156的芯片数据原始文件，该芯片数据的原始文件包含了113个人的血液样本，3种不同的感染方式(鼻病毒、呼吸道合胞病毒和N3H2亚型猪流感病毒)感染人体，通过检测感染前和感染后症状最严重时患者的血样，并进行了基因测序。笔者通过下载其原始文件，对其进行二次分析，利用robust multiarray average(RMA)算法对原始文件进行背景校正和矩阵数据归一化处理，利用limma包对芯片数据进行分析，计算P值(Pvalue)和差异倍数(fold change，FC)，显著差异基因的筛选条件为：Pvalue<0.01，FC>1.5[12]。

1.2.6 已知的流感相关疾病靶点检索 利用“influenza”作为关键词，检索已知的疾病靶点数据库。包括：① TTD(http://database.idrb.cqu.edu.cn/TTD/)；② DrugBank数据库 (http://www.drugbank.ca/)；③ OMIM数据库(http://www.omim.org/)；④ GAD (http:// geneticassociationdb.nih.gov/)；⑤ PharmGKB (https://www.pharmgkb.org/index.jsp)。检索的靶点删除重复，获得流感发病过程已知的靶点。

1.2.7 蛋白质相互关系网络构建和关键靶点筛选 将清气凉营颗粒作用靶点和流感相关的疾病靶点分别映射到蛋白质相互作用关系网络中，利用蛋白质相互作用网络绘制插件BisoGenet绘制2个蛋白质相互作用关系网络[13]。BisoGenet包含了6种蛋白质相互作用关系数据库：Biological General Repository for Interaction Datasets(BioGRID),Biomolecular Interaction Network Database(BIND),Molecular Interaction Database(MINT),Human Protein Reference Database(HPRD), Database of Interacting Proteins(DIP)和Biological General Repository for Interaction Datasets(GRID)。再利用cytoscape将2个蛋白质相互作用关系网络合并，抽取交集网络。而这个交集网络则是清气凉营颗粒治疗流感的直接和间接靶点调控网络。

利用网络拓扑分析插件CytoNCA，借助自由度、中心中介性、特征向量中心性、紧密度、网络中心性和局部边连通性等指标筛选网络中的关键节点[14-15]。根据前期文献研究，首先筛选出自由度大于所有节点自由度中位数2倍的节点，将这些节点定义为“Big hubs”。然后，再筛选其他几个指标大于所有节点中位数的节点，即为关键节点(关键基因)。清气凉营颗粒则有可能是直接、间接调控这些节点，发挥抗流感的作用。

1.2.8 Pathway富集分析 本文使用了较为新颖的ClueGO分析插件，并利用信号通路富集分析功能。ClueGO插件具有形象的图像化功能，能够将富集分析的结果以节点的形式展现，同一种颜色的节点代表同一类型的信号通路，而节点的大小则代表了该信号通路的显著性，节点越大即信号通路的显著性越高，该通路的重要性越高[16]。本文利用ClueGO对清气凉营颗粒治疗流感的关键靶点进行通路富集分析，并根据重要程度绘制信号通路占比饼状图。

2 结果

2.1 清气凉营颗粒体内抗甲型流感病毒药效学研究

2.1.1 清气凉营颗粒对甲型流感病毒A/PR8/34感染小鼠死亡的影响 10.53、31.59、63.18 g·kg-1清气凉营颗粒对甲型流感病毒(H1N1)感染小鼠有明显的保护作用，可明显延长甲型流感病毒(H1N1)感染后小鼠的存活天数，与模型组比较差异具有显著性(P<0.05，P<0.01)。见Tab 1。

2.1.2 清气凉营颗粒对甲型流感病毒感染小鼠肺指数的影响 清气凉营颗粒高、中剂量组均可明显降低甲型流感病毒感染小鼠的肺指数值，与模型组比较差异有显著性(P<0.05，P<0.01)，见Tab 2。Fig 2病理结果显示，成功复制了甲型流感病毒感染小鼠肺部炎性病变。主要表现为化脓性支气管炎、支气管肺炎、间质性肺炎，部分伴有明显的肺出血。与模型组相比，各药物均有减轻肺组织病变的趋势，但支气管炎病变改善不明显。抗甲型流感病毒效果以利巴韦林组、清气凉营颗粒高剂量组效果为明显。

以上结果提示清气凉营颗粒能够提高受感染小鼠的存活率和存活天数。同时也能够降低小鼠的肺指数，改善病理形态，提示清气凉营颗粒具有较好的抗甲型流感作用。

GroupDose/g·kg-1NumberofanimalsNumberofdeathsSurvivalrate/%Survivaldays/dVehicle-20010014．0±0．0Model-2018107．5±2．8##ShuangHuangLian23．4201050∗10．7±3．6∗∗Ribavirin0．1020195∗∗13．7±1．6∗∗QingQiLiangYing10．53201145∗10．0±3．9∗31．5920860∗∗11．0±3．9∗∗63．18201050∗10．4±4．1∗

##P<0.01vscontrol；*P<0.05，**P<0.01vsmodel

Fig 2 Pathological changes of lung tissue in mice infected with influenza A virus(HE×100)

A:Vehicle;B:Model;C:Model;D:Ribavirin 0.1 g·kg-1;E:ShuangHuangLian 23.4 g·kg-1;F:QingQiLiangYing 10.53 g·kg-1;G:QingQiLiangYing 31.59 g·kg-1;H:QingQiLiangYing 63.18 g·kg-1

GroupDose/g·kg-1Weight/gLungweight/gLungindex/g/10gVehicle-17．57±1．920．15±0．030．83±0．16Model-12．66±1．18##0．20±0．06##1．62±0．45##ShuangHuangLian23．414．74±2．49∗0．15±0．04∗1．05±0．34∗∗Ribavirin0．1014．46±1．27∗∗0．14±0．02∗∗0．97±0．17∗∗QingQiLiangYing10．5315．00±2．10∗∗0．19±0．031．30±0．3131．5915．15±1．59∗∗0．17±0．051．15±0．34∗63．1815．07±1．17∗∗0．16±0．02∗1．08±0．18∗∗

##P<0.01vscontrol；*P<0.05，**P<0.01vsmodel

2.2 清气凉营颗粒活性成分筛选与ADME分析 检索TCMSP数据库，搜集清气凉营颗粒中6味中药中所有的已报道的成分及其ADME参数，共搜集到485个成分，其中大青叶45个，金银花225个，大黄92个，知母81个，淡竹叶12个，野菊花30个。根据口服吸收利用度(OB)和药物相似性(DL)筛选清气凉营颗粒中入血的活性成分，共搜集到入血成分71个(Fig 3A)。清气凉营颗粒各味中药中符合口服吸收利用度和药物相似性成分比例图，见Fig 3B。此外，有8个成分虽然不符合筛选参数，但文献报道有较好的抗流感活性，同时也纳入作为清气凉营颗粒的活性成分，因此，根据ADME参数筛选和文献确证最终筛选得到79个活性成分。同时，利用系统药理学靶点预测技术，预测活性成分作用靶点，删除重复靶点，共获得246个预测靶点。

Fig 3 ADME parameters distribution of active ingredients in QingQiLiangYing granule

A:Components that meet the criteria for screening in QingQiLiangYing granule;B:Component ratio in accordance with the screening conditions in each herb in QingQiLiangYing granule

2.3 清气凉营颗粒“活性成分-靶点网络”构建和分析 利用网络图形化工具Cytoscape绘制潜在活性成分和作用靶点的关系网络。进一步对网络进行分析，寻找网络中的关键节点，确定清气凉营颗粒中发挥重要作用的成分和靶点。如Fig 4所示，通过cytoscape构建的网络共有325个节点，1 257个关系。进一步分析“成分-靶点网络”发现，有效成分槲皮素、β-谷甾醇、山奈酚和木犀草素能作用于网络中的多个靶点，而PTGS2、CDK2、CA2等靶点，也能与多个成分作用。前期研究表明，槲皮素、山奈酚能够预防和治疗流感[17]；而β-谷甾醇具有消炎、镇痛等功效，能够缓解流感发生过程中发热、头痛等并发症[18]；木犀草素在体内、外均有较好的抗流感作用，尤其是抗流感病毒H1N1效果较好[19-20]。而网络中重要的靶点PTGS2是流感发生过程中诱导干扰素γ1产生的关键因子，能够协同其他抗病毒因子发挥抗流感作用[21]。“成分-靶点网络”分析显示，清气凉营颗粒的有效成分之间存在协同，而协同调控的靶点也在流感的发生发展中发挥不同作用，具有治疗流感的潜力。

2.4 流感相关基因分析和检索

2.4.1 流感相关差异表达基因分析 通过对基因芯片进行分析，获取不同感染方式感染后明显影响和改变的基因，进一步分析清气凉营颗粒的作用靶点是否与这些明显改变的基因相关。通过对GEO芯片数据库的芯片数据进行二次挖掘分析，共找出107个变化最为明显的基因，而这些基因则可能与流感及其并发症的发生发展密切相关。差异表达基因热图见Fig 5。

2.4.2 数据库检索已有流感相关靶点 寻找已知的流感相关靶点基因，还可以通过检索疾病相关靶点数据库获取。本文检索了5个国际公认的疾病基因相关数据库，搜集前期已经有大量研究和报道的与流感发生发展密切相关的靶点基因。TTD、DrugBank、OMIM、GAD、PharmGKB分别检索到35、3、88、9、1个靶点。去除重复靶点，共检索到106个已知的流感发病过程中相关的靶点。共检索到101个流感相关的疾病靶点基因。

2.5 清气凉营颗粒治疗流感的蛋白相互作用网络构建与关键靶点筛选

2.5.1 清气凉营颗粒治疗流感的蛋白相互作用 网络构建机体的内在调控是复杂的调控网络，而非单一的信号通路，不同的信号通路和靶点之间会存在信号的转导，因而药物的治疗作用也不仅仅是成分靶点的直接结合，更为常见的调控方式是直接调控靶点，同时间接调控其他靶点。而蛋白质相互作用关系数据为认识靶点的直接、间接调控作用提供了可能。通过构建蛋白质相互作用网络，我们发现清气凉营颗粒可以直接或间接与7 240个靶点产生作用，而这些靶点与靶点之间的联系多达133 765种。同样，对流感相关的靶点绘制蛋白质相互作用网络，也发现与流感直接或者间接相关的靶点多达2 701个。利用蛋白质相互作用网络，我们可以深入分析清气凉营颗粒影响流感发生发展中的靶点，绘制蛋白质相互作用靶点网络，为进一步的网络分析和机制探讨提供了可能。

2.5.2 清气凉营颗粒治疗流感的关键 靶点筛选通过对清气凉营颗粒调控流感的蛋白质相互作用交集网络进行分析，利用网络节点的拓扑属性，寻找网络中关键节点。根据网络拓扑学理论，这些节点在网络中能够传递更多的信息，信息传递效率更高，单一节点能够影响的节点更多，因而也在网络中发挥着更加重要的作用。通过网络拓扑分析，笔者共发现了113个关键节点。筛选策略示意图见Fig 6。

2.6 清气凉营颗粒治疗流感的机制分析 利用ClueGO对113个关键节点进行分析，分析他们参与的主要信号通路，研究清气凉营颗粒治疗流感可能的作用机制。分析结果显示，关键节点涉及的信号通路主要与以下三类信号通路相关，见Fig 7。

Fig 4 Compound-target network of QingQiLiangYing granule

Fig 5 Different expression genes of influenza virus infection

Blue ribbon represented blood samples before infection; brown bands represented the blood sample after infection

2.6.1 细菌感染相关信号 通路细菌感染是流感发生发展过程中重要的并发症之一，而细菌感染相关的信号通路也是最为主要的信号通路，主要富集在细菌侵袭性上皮细胞信号通路、致病性大肠杆菌感染信号通路和军团杆菌病信号通路几种信号通路。细菌感染时，黏附于细胞上，除少数定植的细菌在表面引起局部感染外，大部分细菌还会侵入细胞内，并扩散到其他的细胞、组织或全身而引起侵袭性感染[22]；腹泻是流感的重要并发症之一，致病性大肠杆菌在腹泻的发生中扮演了重要角色[23]；军团菌感染则是流感并发症细菌感染所致肺炎的重要因素之一[24]。以上结果提示，清气凉营颗粒治疗流感的机制之一是缓解流感发生过程中细菌感染相关并发症及其信号通路。

2.6.2 病毒感染相关信号 通路病毒感染是流感发生的直接诱因，病毒感染相关的信号通路主要富集在Influenza A(甲型流感信号通路)和Herpes simplex infection(单纯疱疹感染信号通路)，这2种病毒感染中尤其以甲型流感感染更为常见。甲型流感是一种急性传染病，病毒基因变异后能够感染人类，感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡，病死率很高[25]。而单纯疱疹病毒一般经呼吸道、生殖器黏膜以及破损皮肤进入体内，潜居于人体正常黏膜、血液、唾液及感觉神经节细胞内，引发高热、咽痛、溃疡等症状[26]。这提示清气凉营颗粒可以直接抑制甲型流感病毒信号通路，并且其作用靶点还具有抑制单纯疱疹病毒感染的潜力。

Fig 6 Target screening strategy for key nodes in QingQiLiangYing granule

A:The core protein-protein network of QingQiLiangYing granule and influenza; B: Big hubs; C:The key node of QingQiLiangYing granule in the treatment of influenza

Fig 7 Results of signal pathway analysis of QingQiLiangYing granule in treatment of influenza

2.6.3 病毒复制 相关信号通路病毒不具有能独立进行代谢的酶系统，因此只有进入活的易感宿主细胞内，由宿主细胞提供合成病毒核酸与蛋白质的原料，如低分子量前体成分、能量、必要的酶等，病毒才能增殖。病毒增殖的方式不是二分裂，而是自我复制[27]。清气凉营颗粒作用靶点富集分析结果显示，病毒复制也是其重要的调控信号通路之一。尤其是Wnt信号通路，除了在流感发生过程中机体发热和炎症的过程中产生影响，研究表明其与流感病毒的复制密切相关[28-29]。

3 讨论

近年来，新型流行性感冒不断爆发，抗流感病毒药物的研发难度不断增加。许多中药和中药复方也被证实具有抗流感病毒的作用。清气凉营颗粒则是在中医理论指导下，结合国医大师多年临床实践开发出的验方，具有较好的临床疗效。实验室前期的药效学研究也证明，清气凉营颗粒在体内具有较好的抗甲型流感作用。笔者利用系统药理学分析手段，筛选了清气凉营颗粒的入血成分，并预测了其可能的直接作用靶点。进一步的蛋白质相互功能网络构建及分析，确定了清气凉营颗粒治疗流感的直接和间接调控靶点[30]，并以此为基础分析及可能的作用机制。从笔者分析的结果来看，清气凉营颗粒主要机制是直接抑制流感病毒和间接改善流感相关并发症。例如调控Wnt信号通路抑制病毒复制，直接调控甲型流感相关信号通路；同时，抑制细菌感染，缓解流感发病过程中细菌感染相关的并发症。例如，细菌侵袭表皮细胞或者全身组织引起的侵袭性感染，军团菌诱发的肺炎，致病性大肠杆菌诱发的腹泻等。

后续研究可以此分析为基础进行实验设计和机制探讨，优化实验研究设计。使实验研究更加合理，更加具有指导性。同时，本文也为中药复方机制的研究提供了思路和方法，尤其是中药复方针对某种特定疾病的机制分析。

(致谢:本文主要在江苏省中药药效与安全性评价重点实验室完成，衷心感谢南京中医药大学附属医院药理室朱萱萱教授课题组对抗病毒实验的指导和协助。)

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Analysis of anti-influenza virus pharmacodynamics of QingQiLiangYing granule and its molecular mechanism

WANG Xu1,2,YU Su-yun1,2, SHEN Pei-liang1,2, WANG Si-liang1,2, WEI Zhong-hong1,2, LIU Zhao-guo1,2, WANG Ai-yun1,2,3,CHEN Wen-xing1,2,3, LU Yin1,2,3
(1.SchoolofPharmacy,NanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing210023,China;2.JiangsuKeyLaboratoryforPharmacologyandSafetyEvaluationofChineseMateriaMedicine,Nanjing210023,China; 3.JiangsuCollaborativeInnovationCenterofTraditionalChineseMedicinePreventionandTreatmentofTumor,Nanjing210023,China)

Aim To analyse the anti-influenza virus pharmacodynamics of QingQiLiangYing ganule and explore the possible mechanism in the treatment of influenza.Methods The anti-influenza effect of QingQiLiangYing granule was confirmed byinvivoexperiment. Unique targets regulated by QingQiLiangYing granule were predicted using the systematic pharmacology and bioinformatics technology. Further pathway enrichment analysis was performed to research the potential mechanism of QingQiLiangYing curing influenza.Results Theinvivoexperiment showed that QingQiLiangYing granule had the anti-influenza effect and its molecular mechanism of anti-influenza was mainly involved in Wnt signaling pathway, regulation of bacterial invasion of epithelial cells, thus affecting the pathogenicEscherichiacoliinfection, Legionella disease and influenza A disease processes.Conclusion QingQiLiangYing granule inhibits influenza mainly from three aspects:anti-bacterial infection, anti-viral infection and inhibition of virus replication.

QingQiLiangYing granule；Chinese herbal compound；influenza；systematic pharmacology；network pharmacology；molecular mechanism

2017-01-18,

2017-02-28

国家自然科学基金资助项目(No 81673725, 81573859,81673648,81403260)；中国博士后科学基金(No 2014M 551639)；江苏省自然科学基金资助项目(No BK2012 854)；江苏省博士后资助项目(No 1401138C)；2013年江苏高校优秀科技创新团队计划；江苏高校品牌专业建设工程资助项目(No PPZY2015A070)；江苏高校中药学优势学科建设工程资助项目(PAPD)

王 旭(1992-)，男，硕士生，研究方向：中药复方药理机制，E-mail: wxtcm1992@foxmail.com; 陆 茵(1965-)，女，博士，教授，博士生导师，研究方向：肿瘤药理学，通讯作者，Tel: 025-85811239, E-mail: luyingreen@126.com

时间：2017-4-24 11:21

http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20170424.1121.050.html

10.3969/j.issn.1001-1978.2017.05.025

A

1001-1978(2017)05-0719-10

R282.71；R283.6；R373.13；R978.7