大别山区金樱子多糖的抗衰老作用研究

李 峰，沈业寿，陈秀明

(1.皖西卫生职业学院，安徽 六安 237005；2.安徽省中药研究与开发重点实验室，安徽 合肥 230039)

大别山区金樱子多糖的抗衰老作用研究

李 峰1，沈业寿2，陈秀明1

(1.皖西卫生职业学院，安徽 六安 237005；2.安徽省中药研究与开发重点实验室，安徽 合肥 230039)

通过建立D-半乳糖致衰老的小鼠，对大别山区金樱子多糖是否有抗衰老作用进行初探，方法是测定胸腺指数、脾脏指数和小鼠血清、肝和脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)，实验表明，大别山区金樱子多糖可以使衰老模型实验小鼠胸腺指数、脾脏指数显著增加，显著降低MDA、NO含量并显著提高衰老小鼠SOD、GSH-Px活力，并表现良好剂量依赖关系。结果表明了大别山区金樱子多糖可以提高机体抗氧化能力及直接清除自由基等来发挥其延缓衰老作用。

金樱子；多糖；抗衰老；D-半乳糖

金樱子(Rosa laevigata Michx)是蔷薇科蔷薇属的植物金樱子的果实，始载于《蜀本草》，俗称山石榴、刺梨子、糖罐子等，在我国分布广泛，安徽省的大别山区也有生产。其味酸、甘、涩，性平、无毒。主要用于遗精滑精，遗尿尿频，崩漏带下，久泻久痢。现代医学研究表明，金樱子具有调节免疫、降糖降脂、抗炎抗菌等药理作用[1](P2096-2097)，其有效成分主要为黄酮、三萜、多糖等[2-3]。本研究初探大别山区金樱子多糖是否具有抗衰老作用和可能作用机制。

1 材料和方法

1.1 材料和试剂

大别山区金樱子多糖(实验室提取)，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)试剂盒，南京建成生物工程研究所。D-半乳糖(用时配制溶液)，上海试剂二厂。其他试剂(实验中使用的)为分析纯。

昆明种健康小鼠，安徽医科大学实验动物中心购买，雌雄各半，7～8周龄，小鼠的质量是18～22 g，饲养在标准化房，动物合格证号是皖医实动准第01号。

1.2 方法

1.2.1 动物分组与给药[4]

在喂养50只昆明实验小鼠3 d后，随机进行分成5组，每组有10只小鼠，正常对照组、模型组、大别山区金樱子多糖低、中、高剂量组。在实验中室温维持在20～25 ℃。每个组(正常对照组除外)实验小鼠按120 mg/kg/天，进行颈部皮下注射D-半乳糖，正常对照组实验小鼠皮下注射生理盐水。连续进行皮下注射 D-半乳糖60 d，正常对照组和模型组的实验小鼠分别灌胃生理盐水，大别山区金樱子多糖组高、中、低剂量组，则按每天溶液灌胃分别为400 mg/kg、200 mg/kg、100 mg/kg。

1.2.2 指标测定和胸腺(脾脏)指数测定

进行称实验小鼠体重，从实验小鼠的眼眶里取血，分离取血清，快速取小鼠的肝脏、脑，用生理盐水洗净，滤纸吸干，然后取肝、脑的质量后，进行粉碎，加定量生理盐水制成5%肝脏、脑组织匀浆。同时摘除小鼠胸腺、脾脏，用生理盐水洗净，来计算脏器指数，胸腺(脾脏)指数=胸腺(脾脏) / 小鼠。SOD、MDA、NO、GSH-Px的测定操作，按照说明书来做，测定蛋白质含量用考马斯亮蓝方法。

1.3 处理数据

2 结果

2.1 金樱子多糖对体重和胸腺、脾脏指数的影响

实验结果发现，模型组与正常组小鼠相比较胸腺、脾脏指数下降显著，与模型组比，金樱子多糖中、高剂量组对小鼠胸腺、脾脏指数的影响差异显著(P<0.05)。与正常组相比较，模型组体重的减轻差异极显著(P<0.01)，与模型组小鼠相比较，金樱子多糖中、高剂量组差异显著(P<0.05)，低剂量组差异不显著。

表1 金樱子多糖对小鼠体重和胸腺、脾脏指数影响±s，n=10)

注：**P<0.01，*P<0.05，与正常组相比较；▲▲P<0.01，▲P<0.05，与模型组相比。

2.2 金樱子多糖对血清、肝组织中SOD和MDA的影响

实验结果发现，与正常组相比较，模型组SOD活力、MDA含量差异极显著(P<0.01)。与模型组相比，金樱子多糖高剂量组小鼠血清、肝脏中的SOD活力差异极显著(P<0.01)。金樱子多糖中、高剂量组MDA的含量都差异极显著(P<0.01)，这表明金樱子多糖可以抑制SOD活力下降和MDA含量上升。

表2 对血清、肝组织中SOD和MDA的影响

注：**P<0.01，*P<0.05，与正常组相比较；▲▲P<0.01，▲P<0.05，与模型组相比。

2.3 金樱子多糖对脑组织SOD、GSH-Px、MDA和NO的影响

实验结果发现，与正常组相比较，模型组小鼠脑组织中的SOD、GSH-Px活力差异极显著(P<0.01)，MDA、NO含量明显升高(P<0.01)，与模型组比较，金樱子多糖高剂量组脑组织SOD差异极显著(P<0.01)。金樱子多糖高剂量组GSH-Px活力及MDA、NO的含量有差异显著(P<0.05)。

表3 对脑组织中SOD、GSH-Px、MDA和NO的影响

注：**P<0.01，*P<0.05，与正常组相比较；▲▲P<0.01，▲P<0.05，与模型组相比。

3 讨论

研究表明，自由基与生物体的衰老关系密切，多余自由基在体内滞留是导致生物体衰老的原因。当今，增进生物体健康,延缓生物体老化是各国人民所希望的，故自由基清除剂研制和开发受到各国家的重视,随着年龄的上升，由于生物体内抗氧化酶活性的降低，清除自由基剂能力自然下降，这样造成集聚过多自由基，多余的自由基就会攻击体内的生物体的细胞内生物大分子，正常细胞结构和机能遭到自由基的破坏，使生物体组织器官容易受损，从而加速生物体衰老[5-6]。

血清和组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量均是反映生物体清除自由基能力的指标。SOD和GSH-Px是生物体内清除自由基重要的抗氧化酶，SOD的作用在于阻断自由基的一级反应，而减少活性氧的生成；GSH-Px能够保护生物膜免受损害，维持细胞的正常功能；MDA、NO含量可以反映了生物体细胞受自由基攻击的程度[7-9]；研究表明，大别山区金樱子多糖可以显著降低MDA和NO含量，提高衰老小鼠SOD和GSH-Px活力，这表明了大别山区金樱子多糖可通过清除生物体内自由基，抑制生物体内脂质过氧化，来增加生物体防御能力。研究也表明，大别山区金樱子多糖可以使胸腺、脾脏指数增加，为大别山区金樱子多糖进一步加工成抗衰老方面保健品提供了一定实验依据。

[1]李时珍.本草纲目(下册)[M].北京：人民卫生出版社，1978.

[2]周恩红，李峰.超声提取法测定大别山区金樱子多糖的含量[J].广州化工，2016，44(7)：67-69.

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Study on Antisenile Effects of Polysaccharides fromRosalaevigataMichx

LI Feng1, SHEN Yeshou2, CHEN Xiuming1

(1.WestAnhuiHealthVocationalcollege,Lu’an237005,China；2.KeyLaboratoryofResearchandDevelopmentofChineseMedicine,Hefei230039,China)

The antisenile effects were studied about polysaccharides from Dabie Mountains Rosa laevigata Michx using a mouse model induced by D-galactose. The thymus index and spleen index of mice were determined. Activities of glutathione peroxidase(GSH-Px)，superoxide dismutase(SOD), contents of malondialdehyde(MDA) and nitrogen monoxide(NO) in the serum, liver tissue， and brain tissue of mice were measured. The results showed Polysaccharides from Dabie MountainRosalaevigataMichxcould increase thymus and spleen index of mice obviously. It could also decrease obviously MDA and NO contents, increase significantly SOD and GSH-Px activities of mice. There were dose-dependently in groups. Polysaccharides from Dabie MountainsRosalaevigataMichxhad certain antioxidant activity, and scavenged oxygen free radicals. The results showed that they had a significant antisenile effect.

RosalaevigataMichx；polysaccharides；antisenile；D-galactose

2016-12-12

安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2015A427)。

李峰(1974-)，男，安徽六安人，副教授，研究方向：生化与分子生物学。

Q949.751.8

A

1009-9735(2017)02-0006-03