蒙药参竹精片对肾阴虚小鼠的抗疲劳及耐缺氧作用研究

邬林祥 常绍琴 刘云乐 邢艺龄 姚 莉 樊官伟 柳占彪*

(1.元和药业股份有限公司,内蒙古 呼和浩特 010080；2.天津中医药大学中医药研究院，天津 300193)

参竹精片由黄精、玉竹、手掌参、制何首乌、广枣组成，具有补肾强身的功效，主治肾虚，精血不足，筋骨酸痛，年迈体弱等症[1]。现代医学研究表明这5种药材均具有抗疲劳作用[2-5]，本项研究观察由这5种药材组成的复方制剂即参竹精片是否对肾阴虚小鼠具有抗疲劳及耐缺氧作用。

1 实验材料

1.1 动物: 昆明小鼠，体重30±2g，雌性，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号为 SCXK(京)2012-0001，合格证号为11400700068351。动物分笼饲养，室温22±2℃，相对湿度50±5%，饲料为全价颗粒饲料，饮水用清洁自来水，自由饮用。

1.2 药物 : 参竹精片，将手掌参、黄精、玉竹、何首乌(制)、广枣混合，经水提、过滤、干燥制成片剂，元和药业股份有限公司提供(批号：20140901)；六味地黄丸，北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂(批号：14030409)。

1.3 试剂: 复方利血平，石药集团欧意药业有限公司(批号：361140610)；左甲状腺素钠片(Merck KGaA，批号：175731)；钠石灰，上海五四化学试剂有限公司(批号：540815)。

2 实验方法

2.1 肾阴虚造模方法:选昆明雌性小鼠，体重30±2g，以利血平15μg/只+甲状腺素25μg/只，ig，1次/d，连续7d，小鼠进食减少，饮水增多，体重减轻，躁动不安，易惊，后期出现瞎眼等，确定造模成功。

2.2 负重游泳试验方法:选肾阴虚造模成功小鼠60只，随机分为模型组、参竹精0.5g/kg、0.25g/kg、0.125g/kg组和六味地黄丸0.45 g/kg阳性药对照组，每组12只，另选12只健康小鼠作为正常对照组，给药组按照设定的剂量，ig，1次/d，连续7d，正常对照组和模型组给予等量生理盐水。各组于末次给药后2 h，尾根部负荷2g铅丝，分别置于游泳箱中游泳，水深30cm，水温23℃,记录自游泳开始至头部全部沉入水中8s不能浮出水面的时间,作为小鼠力竭游泳时间。

2.3 耐缺氧试验方法: 选肾阴虚造模成功小鼠60只，分组和给药方法同上。以上各组在末次给药后2 h，每次取3只小鼠放入1000mL广口瓶，(实验前瓶内装入钠石灰60g,用以吸收二氧化碳和水份),将盖盖严，并用凡士林密封。观察小鼠的活动情况，记录小鼠的存活时间。

2.4 统计学分析: 所得数据均用SPSS 17.0软件统计，数据用±s表示，各组间比较均采用方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。

5 实验结果

5.1 参竹精片对肾阴虚小鼠负重游泳的影响

表1 参竹精片对肾阴虚小鼠负重游泳的影响

注：与正常组比较 **P<0.01；与模型组比较 #P<0.05， ##P<0.01

如表1所示，模型组小鼠与正常组比较力竭游泳时间均明显减少(P<0.01)，表明肾阴虚小鼠的抗疲劳能力降低。参竹精3个剂量治疗组与模型组比较力竭游泳时间均明显增加(P<0.05或P<0.01)，结果表明参竹精具有提高肾阴虚小鼠的抗疲劳作用。

5.2 参竹精片对肾阴虚小鼠耐缺氧的影响

表2 参竹精片对肾阴虚小鼠耐缺氧的影响

注：与正常组比较**P<0.01；与模型组比较##P<0.01

如表2所示，模型组小鼠与正常组比较耐缺氧存活时间均明显减少(P<0.01),表明肾阴虚小鼠的耐缺氧能力降低。参竹精片0.5g/kg、0.25g/kg、0.125 g/kg3个剂量治疗组与模型组比较耐缺氧存活时间均明显增加(P<0.01)，结果表明参竹精片可提高小鼠的耐缺氧时间。

4 讨论

采用甲状腺素片和利血平是复制肾阴虚小鼠模型常用的实验方法[6，7]，临床表现可呈现与中医肾阴虚证相似的阴虚内热类型，这种模型具有两个显著的特点,即类似甲状腺机能亢进和交感神经兴奋性增强，表现为动物进食减少，饮水增多，体重减轻，躁动不安，易惊等。本研究以利血平15μg+甲状腺素25μg/只/日，ig，每日1次，连续7d，小鼠出现进食量减少，身体消瘦，体重降低，躁动，易惊，表明造模成功。中医学认为肾阴虚证是指肾阴亏损，失于滋养，虚热内生所表现的证候，目前对于肾阴虚的证候评价缺乏客观量化指标。本研究以力竭游泳时间、耐缺氧为观察指标，对肾阴虚小鼠的体能进行了观察，结果发现模型小鼠的力竭游泳时间、耐缺氧存活时间均明显低于正常小鼠，实验结果表明这些观察指标可用于肾阴虚小鼠体能及其药物疗效的评价指标。

蒙医学古籍《四部甘露》中记载赫依病症状为“疲乏无力、各关节疼痛、神志不清、睡眠不安、头晕…”，巴达干病症状为“身心沉重、懈怠、食欲不佳…”[8]。由此可见，肾阴虚所致的体能降低可归属于蒙医学的“巴达干、赫依”性疾病范畴，病因是由巴达干、赫依功能紊乱所致，治疗应以调体素，行巴达干、赫依为治则[9]。参竹精片由制何首乌、黄精、玉竹、广枣、手掌参组成，具有补肾，滋补强身的功能，方中手掌参补益气血，生津止渴；黄精补中益气，润心肺，强筋骨；玉竹养阴、润燥，除烦，止渴；何首乌(制)补肝肾，益精血，强筋骨；广枣行气活血，养心安神，诸药配伍通过健脾、养胃、补肝生津作用[10]，一方面可加强机体的代谢功能，促进养分的吸收，补充“精血”和“肾精”不足，增加体能；另一方面可促进代谢产物的分解，加快体内“赫依”的排出，以此恢复三根平衡，起到补肾，滋补强身的作用。现代药理研究表明手掌参、玉竹、黄精、何首乌、广枣单独应用均具有抗疲劳、抗氧化、减缓衰老和增强机体免疫力的作用[2-5]，本研究结果显示参竹精片能够延长肾阴虚小鼠的力竭游泳时间和耐缺氧存活时间，表明参竹精片具有抗疲劳及耐缺氧作用，本实验结果可为参竹精片治疗肾阴体弱提供实验依据。

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准蒙药分册[S].1998.127.

[2]宋士军,李芳芳,岳华,等.何首乌的抗疲劳及耐缺氧作用研究[J].河北中医药学报,2003,18(3):32～33.

[3]吴晓岚,王玉勤,车光昇,等.黄精和玉竹抗疲劳作用的实验研究[J].中国冶金工业医学杂志,2009,26(3)：271～272.

[4]王笑琴，王力伟，赵岩,等.广枣的化学成分和药理活性研究进展[J].食品科学,2004,35(13)：281～285.

[5]赵亮,刘国清.手掌参合剂抗疲劳作用的实验研究,中医临床研究,2011,3(22):17.

[6]李玉洁,魏丹丹,魏茂林,等.基于动物物质与能量代谢检测评价3种肾阴虚证模型建立方法[J].中医学报,2017,32(224):83～88.

[7]李仪奎.中药药理实验方法学[M].第2版,上海:上海科学技术出版社,2006.151.

[8]伊稀巴拉珠尔.四部甘露[M].呼和浩特:内蒙古人民出版社,1998.314～330.

[9]策·苏荣扎布,等.蒙古学百科全书·蒙医学[M].内蒙古人民出版社,2004.31.

[10]乌力吉特古斯,乌云斯日古楞,白玉风,等.蒙药参竹精片(毛浩日查干-5)治疗肾虚的体会[J].中国民族医药杂志,2014,20(5):21～22.