正五聚蛋白3在儿童过敏性紫癜中的表达

王凤英，黄路圣，徐康，叶林华，黄云，肖飞

（扬州大学附属泰兴医院儿科，江苏 泰兴 225400）

正五聚蛋白3在儿童过敏性紫癜中的表达

王凤英，黄路圣，徐康，叶林华，黄云，肖飞

（扬州大学附属泰兴医院儿科，江苏 泰兴 225400）

目的 检测过敏性紫癜（HSP）患儿外周血正五聚蛋白3（PTX3）、白细胞介素8（IL⁃8）、肿瘤坏死因子α（TNF⁃α）、超敏C反应蛋白（hs⁃CRP）的表达，探讨PTX3表达在HSP患儿中的意义。方法 选取HSP患儿36例（HSP组）和健康儿童17例（对照组）作为研究对象。采用酶联免疫吸附法检测血清PTX3、IL⁃8、TNF⁃α水平，全自动生化分析仪检测血清hs⁃CRP水平。结果HSP组急性期外周血PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP的水平均较对照组增高，差异有统计学意义（均P＜0.05）；HSP组伴有关节和（或）消化道症状和（或）肾脏受累的患儿PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP表达水平较仅有皮肤受累的患儿增高（均P＜0.05）。HSP患儿PTX3表达水平与IL⁃8、TNF⁃α的表达呈正相关（r分别为0.514、0.833，均P＜0.05），PTX3与hs⁃CRP表达无相关性（r=0.292，P＞0.05）。HSP患儿PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP表达均无性别差异（均P＞0.05）。结论 PTX3高表达与HSP患儿炎症反应程度有关，PTX3可能在HSP发病中起重要作用。

正五聚蛋白3；白细胞介素8；肿瘤坏死因子α；超敏C反应蛋白；过敏性紫癜；儿童

过敏性紫癜（Henoch⁃Schönlein purpura，HSP）是一种IgA介导的白细胞碎裂性小血管炎，是儿童血管炎最常见类型。2012年6月Chapel Hill会议提出将HSP更名为IgA血管炎，分类上属于小血管炎下的免疫复合物性血管炎。研究［1］认为HSP发病是多种因素综合作用的结果，在环境因素、个体遗传等作用下HSP引起机体免疫功能紊乱，产生多种细胞因子、炎症介质、抗体等，引起全身小血管的损伤和炎症。其中细胞因子是HSP发病中重要的因素之一。尽管对HSP发病机制既往有多种研究，但迄今为止，HSP确切的病因和发病机制尚未完全清楚［2］。正五聚蛋白3（pentraxin3，PTX3）为新型的炎性细胞因子，与C反应蛋白（C⁃reactive protein，CRP）在结构功能上具有同源性，同属于正五聚蛋白家族。PTX3作为一种可识别多种外源性物质的急性相反应蛋白，在固有免疫、炎症调节、基质沉积、血管重塑、妊娠中均发挥重要作用［3⁃4］，研究［5⁃7］发现在许多心血管疾病、免疫性疾病、急慢性肾脏损伤、脓毒血症等多种疾病中PTX3表达增高，认为可作为一种炎症标志物。超敏C反应蛋白（high sensitivi⁃ty C⁃reactive protein，hs⁃CRP）是使用高敏感的检测方法检测到的低浓度CRP，在HSP急性期CRP等反映炎症的指标可增高。白细胞介素8（interlukin⁃8，IL⁃8）和肿瘤坏死因子α（tumornecrosisfactor⁃α，TNF⁃α）是研究较成熟的炎性细胞因子，在很多炎症性疾病中表达增高。本研究通过检测HSP患儿血PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP的表达水平，分析PTX3与IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP的相关性，旨在探讨PTX3在儿童HSP发病过程中的作用。

1 材料与方法

1.1 研究对象

HSP诊断符合2013年中华医学会儿科学分会免疫学组制定的儿童HSP循证诊治建议［8］。HSP患儿（HSP组）均为初次发病，病程在3 d内；受检前4周内未使用任何糖皮质激素或细胞毒性药物；除外伴有其他内科疾病或HSP暂不能确诊者。对照组儿童为正常健康体检儿童，既往无过敏性疾病病史，4周内未使用任何糖皮质激素或细胞毒性药物，采血前24 h无用药史，性别、年龄与HSP患儿相匹配。本研究经我院医院伦理委员会批准，所有研究对象家长均知情同意。HSP组患儿36例，男21例，女15例，平均年龄（7.8±3.2）岁，仅有皮肤损害8例（单纯型），伴有皮肤外的脏器损害28例（混合型，其中有23例伴有关节症状，16例伴消化道症状，5例伴肾脏损害）。对照组儿童17例，男10例，女7例，平均年龄（7.5±2.5）岁。2组儿童的年龄、性别差异无统计学意义（t=0.19，P=0.871；χ2=0.01，P= 0.931）。

1.2 标本采集

HSP患儿入院当日或次日清晨采集空腹外周静脉血4 mL，对照组体检日采集空腹外周静脉血4 mL，离心取血清，-80℃冰箱保存待测PTX3、IL⁃8、TNF⁃α含量。同时用临床免疫管采集外周血测定hs⁃CRP。

1.3 血清PTX3、IL⁃8、TNF⁃α检测

采用酶联免疫吸附法检测血清PTX3、IL⁃8、TNF⁃α水平，试剂盒购自Elabscience公司，按照仪器操作规程和试剂盒说明书要求进行，严格质量控制，减少误差。以标准品浓度作为横坐标，OD值作为纵坐标，绘制标准曲线，得出标准方程，根据标准方程计算出每个样本的浓度。

1.4 血清hs⁃CRP含量检测

应用全自动生化分析仪检测血清hs⁃CRP，严格按照操作程序完成定标和检测，同时进行室内质量控制。

1.5 统计学分析

采用SPSS 19.0统计软件进行统计学分析。计量资料以表示，2组间均数比较采用独立样本t检验。采用Pearson相关进行指标间相关性的分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP水平比较

HSP患儿血清PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP水平均较对照组高，差异有统计学意义（均P＜0.05），见表1。临床表现不同的HSP患儿中，混合型HSP患儿PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP表达均较单纯型增高，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表2。不同性别HSP患儿PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP的表达差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表3。

2.2 HSP组PTX3与IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP的相关性分析

HSP患儿PTX3与IL⁃8、TNF⁃α的表达相关（r分别为0.514、0.833，P分别为0.01、＜0.001）；PTX3和hs⁃CRP的表达不相关（r=0.292，P=0.166）。

表1 HSP组和对照组PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP表达水平的比较Tab.1 Comparison of expression levels of PTX3，IL⁃8，TNF⁃α and hs⁃CRP between HSP group and control group

表2 不同临床表现的HSP患儿PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP表达水平的比较Tab.2 Comparison of expression levels of PTX3，IL⁃8，TNF⁃α and hs⁃CRP between patients with different clinical feature

表3 不同性别的HSP患儿PTX3、IL⁃8、TNF⁃α、hs⁃CRP表达水平的比较Tab.3 Comparison of expression levels of PTX3，IL⁃8，TNF⁃α and hs⁃CRP between different gender

3 讨论

PTX3是由BREVIARIO等［9］研究发现的一种长链五聚体蛋白，为长PTXs成员之一，分子量为（40～50）×103，又称肿瘤坏死因子刺激基因14。PTX3一般情况下在正常人血清和组织中表达很低，接受到TNF⁃α、IL⁃1β等细胞因子、Toll样受体激动剂、脂多糖等炎症信号时，单核巨噬细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞、脂肪细胞、树枝状细胞、中性粒细胞等多种细胞均可合成，其合成受IL⁃1及TNF的调节；PTX3作为多功能模式识别受体，在进化上高度保守，在体内具有多种生物学效应，可清除微生物、活化补体、结合P⁃选择素、减轻炎症部位的白细胞募集，参与免疫防御、炎症反应、细胞凋亡和血管再生、女性生殖生育的调节等［3⁃6，10］。

PTX3是一种多功能蛋白，在许多疾病中发挥不同的作用。有研究［11⁃13］认为在自身免疫性疾病和炎症中，患者血清中的PTX3水平与其疾病的活动性和治疗的反应性相关；在血管炎中，PTX3不仅参与了血管炎症反应，且其血浆水平可以反映血管炎症的活动性。YÜKSEL等［14］研究认为HSP患者血清PTX3增高和皮肤IgM沉积预示肾脏受累。GE等［15］研究认为PTX3在儿童HSP的多系统血管受累中起重要作用，参与了紫癜性肾炎的发生，可作为儿童过敏性紫癜型肾炎的早期预测因子。本研究发现PTX3在儿童HSP血清中表达增高，且伴有关节和（或）消化道症状和（或）肾脏受累的患儿较仅有皮肤受累的患儿其血清PTX3的增高程度更明显，提示PTX3参与了儿童HSP的发病，PTX3增高明显者更易出现皮肤外的其他系统受累，说明其血浆水平可以反映血管炎症的程度和累及范围，同以往研究［15］结果一致。在本研究中未发现HSP患儿存在PTX3性别表达差异。

本研究发现IL⁃8、TNF⁃α在儿童HSP血清中表达增高，在伴有关节和（或）消化道症状和（或）肾脏受累的患儿较仅有皮肤受累的患儿上述因子血清水平的增高程度更明显，与既往研究［16］结果一致，提示IL⁃8、TNF⁃α参与了HSP的发病。相关分析表明，PTX3和TNF⁃α高度相关，和IL⁃8呈中等程度相关。PTX3合成受IL⁃1、TNF⁃α等炎症介质调节［9］，TNF⁃α可上调PTX3的表达［17］，本研究显示PTX3和TNF⁃α表达均增高，呈两者高度相关，认为HSP患儿PTX3和TNF⁃α交互作用，相互促进，从而加重HSP的小血管炎症反应。本研究中PTX3和IL⁃8存在相关，故认为PTX3和IL⁃8之间亦可能存在相互作用。

研究［18］表明CRP本身也是促炎症介质，具有激活补体，增强吞噬细胞活性、参与细胞凋亡、参与炎症反应等过程，其水平高低与炎症反应的程度有关。本研究HSP组hs⁃CRP水平显著高于对照组，与文献报道一致［19］，且伴有关节、和（或）消化道症状和（或）肾脏受累的患儿较仅有皮肤受累的患儿hs⁃CRP表达水平亦增高，提示HSP患儿体内高浓度hs⁃CRP可损伤血管内皮细胞，直接参与HSP的发病。在本研究中PTX3和hs⁃CRP均增高，但相关分析表明PTX3与hs⁃CRP无明显相关性，但与IL⁃8、TNF⁃α等炎性细胞因子存在相关性，故认为PTX3可能独立于CRP，直接参与了HSP的血管炎症反应。hs⁃CRP在促炎症介质的诱导下由肝脏分泌，而PTX3主要由血管内皮细胞和巨噬细胞产生，故有学者［13，20］推测PTX3水平更能反映脉管系统的炎症状态，是更好的血管炎症预测因子，具有更高的特异性，本研究支持上述结果。

HSP病理变化是以毛细血管炎为主的广泛的白细胞碎裂性小血管炎，血管内皮细胞损伤、肿胀。一些导致血管内皮损伤的因子作用于具有遗传背景的个体，导致TNF⁃α、IL⁃8等炎性细胞因子释放，从而介导PTX3的表达，PTX3表达增高后进一步促进TNF⁃α、IL⁃8等表达，这些因子相互作用又进一步加重炎症反应和血管内皮系统受损，引起全身小血管的损伤和炎症。PTX3可望成为一种不同于CRP的新的生物学标志物用于临床诊断、评定疾病活动性和严重性，但其敏感性和特异性等问题还需要进一步研究。

致谢：感谢本院检验科蔡波主任，临床实验室叶婷老师在本研究中给予的帮助。

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（编辑 武玉欣）

Expression of Pentraxin 3 in Children with Henoch⁃Schöenlein Purpura

WANG Fengying，HUANG Lusheng，XU Kang，YE Linhua，HUANG Yun，XIAO Fei
（Department of Pediatrics，The Affiliated Taixing Hospital of Yangzhou University，Taixing 225400，China）

Objective Henoch⁃Schönlein purpura（HSP）is a common multisystemic vasculitis in children，but the exact pathogenesis remains unknown.Pentraxin 3（PTX3），a new kind of inflammatory cytokines，has a strong inflammatory effect，and is involved in occurrence and develop⁃ment of a variety of autoimmune diseases.The objective of this study is to evaluate the expression of PTX3，interleukin⁃8（IL⁃8），tumor necrosis fac⁃tor⁃α（TNF⁃α）and high sensitivity C⁃reactive protein（hs⁃CRP）in children with HSP，and explore the clinical significance of PTX3 in HSP devel⁃opment.Methods Thirty⁃six children（HSP group）and 17 healthy children（control group）were enrolled in the study.Serum levels of PTX3，IL⁃8 and TNF⁃α were detected by enzyme⁃linked immunosorbent assay.Serum hs⁃CRP levels were measured by automatic biochemical analyzer.Re⁃sults The serum levels of PTX3，IL⁃8，TNF⁃α，and hs⁃CRP were up⁃regulated in HSP group compared with the control group（P＜0.05）.The levels of PTX3，IL⁃8，TNF⁃α，and hs⁃CRP in patients with joint symptoms，or/and gastrointestinal symptoms，or/and kidney injury were significant⁃ly higher than those patients without joint symptoms，or/and gastrointestinal symptoms，or/and kidney injury（P＜0.05）.The expression of PTX3 was positively correlated with the expression of IL⁃8 and TNF⁃α（r=0.514，0.833，allP＜0.05），but there was no correlation between PTX3 and hs⁃CRP（r=0.292，P＞0.05）.The expression of PTX3，IL⁃8，TNF⁃α and hs⁃CRP in HSP patients had no gender difference（allP＞0.05）.Con⁃clusion The high expression of PTX3 is related to the degree of inflammation in children with HSP.The up⁃regulated expression of PTX3 may play an important role in pathogenesis of HSP in children.

pentraxin 3；interleukin⁃8；tumor necrosis factor⁃α；hypersensitive C⁃reactive protein；Henoch⁃Schönlein purpura；chil⁃dren

R725.9

A

0258-4646（2017）02-0156-04

10.12007/j.issn.0258⁃4646.2017.02.014

王凤英（1975-），女，副主任医师，硕士. E-mail：wfy6699@163.com

2016-05-11

网络出版时间：