上皮性钙黏蛋白在胃癌中的表达及与化疗疗效的关系

徐文思 刘红丹 张 博 张慧宇

(齐齐哈尔医学院附属第三医院消化内科，黑龙江 齐齐哈尔 161099)

上皮性钙黏蛋白在胃癌中的表达及与化疗疗效的关系

徐文思 刘红丹 张 博 张慧宇

(齐齐哈尔医学院附属第三医院消化内科，黑龙江 齐齐哈尔 161099)

目的 探讨上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)在胃癌发生、发展中的作用及其临床应用价值。方法 122例原发胃癌患者纳入研究，手术或胃镜活检取出肿瘤组织，采用免疫组化方法检测E-cadherin表达水平，统计分析E-cadherin表达水平与临床病理各项参数的关系；并分析E-cadherin表达与化疗疗效和患者生存期的关系。结果 E-cadherin 主要在胃癌细胞膜呈现阳性表达。122例患者中有48例E-cadherin阳性表达，占患者总例数的39.34%。E-cadherin阳性表达在60岁以上胃癌患者中检出率较高，且高、中分化的胃癌组织中E-cadherin 阳性表达率显著高于低分化胃癌组织(P<0.05)。E-cadherin阳性表达组化疗疗效明显优于阴性组(P<0.05),生存期比较未见明显差异(P>0.05)。结论 E-cadherin表达是胃癌的抑癌因素，E-cadherin阳性表达与年龄、肿瘤分化程度及疗效相关，E-cadherin表达水平联合其他胃癌标志物可能会显示出更加重要的临床指导价值。

上皮性钙黏蛋白；胃癌

胃癌是世界上癌症致死的第二大病因，我国是胃癌高发国家，患病率及死亡率很高，均为世界平均水平的2倍多。我国每年胃癌新发病例占全世界新发病例半数以上〔1〕。且我国胃癌发病特征为早期症状不明显，发展迅速，恶性程度高，大多数患者确诊时已处于中晚期，往往错过最佳治疗时期，失去手术机会，化疗成为最重要的非手术治疗方法。然而，目前临床上胃癌化疗方案的设置是根据以大样本统计学结果为基础选择化疗药物，有效率偏低，多数患者不能从中获益，胃癌的治疗疗效已逐渐达到一个平台期。上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)是一种上皮细胞黏附分子，在恶性肿瘤的发生发展过程中起抗转移作用。研究发现，在多种不同类型的肿瘤细胞侵袭和转移过程中E-cadherin下调，其表达下调与预后不良有关，其异常表达亦可能与肿瘤细胞化疗敏感性有关联〔2〕。本研究旨在研究E-cadherin在胃癌中的表达情况与化疗疗效的关系，以期为临床决策提供有益帮助。

1 资料与方法

1.1 研究对象 本研究已获得学院伦理委员会批准，且所有入组受试对象均知情同意。研究对象选自2011年1月至2013年1月经胃镜和病理明确诊断为原发胃癌，且可按规定完成治疗方案的患者122例，男98例，女24例，年龄42～76〔平均(67.73±6.05)〕岁。其中乳头状腺癌31例,管状腺癌26 例,差分化腺癌42 例,黏液细胞癌/黏液腺癌23 例。临床分期：Ⅱ期19例，Ⅲ期45例，Ⅳ期58例。分化类型：低分化46 例，中分化37 例，高分化39 例。

1.2 指标检测方法

1.2.1 E-cadherin免疫组化测定 经胃镜或行手术取得胃癌组织后，用4%多聚甲醛固定24 h，常规石蜡包埋，行4 μm连续切片，鼠抗人E-cadherin 抗体购自美国Sigma公司(U3254)，抗体工作浓度为1∶100，免疫组化(S-P)试剂盒及二氨基联苯胺(DAB)显色剂均购自北京中杉生物技术有限公司，操作按照试剂盒说明进行。胞膜或胞质检测到棕黄色颗粒判定为阳性结果，半定量分析以400倍光学显微镜下计数5个视野或1 000个细胞计算，阳性细胞数<10%为阴性，≥10%为阳性。

1.2.2 化疗方法及疗效判定 本研究采取 FOLFOX4化疗方案对所有患者化疗，即奥沙利铂(Oxaliplatin)85 mg/m2，静滴，第1天；亚叶酸钙(Leucovorin，CF)200 mg·m-2·d-1，在氟尿嘧啶(5-FU)前2 h静滴，第1～2天；5-FU 400 mg·m-2·d-1，静脉注射，然后再用 600 mg·m-2·d-1，22 h持续泵入，第1～2天；14 d为一个周期〔3〕。临床疗效评估根据WHO 实体瘤疗效评价标准分为〔4〕:完全缓解(CR)；部分缓解(PR)；稳定(SD)：疾病进展(PD)四级。疗效以CR + PR 为有效，以SD + PD 为无效〔4〕

1.3 随访 患者出院后，每月对患者进行随访，生存时间以疾病诊断时间到最后随访时间或者死亡时间。

1.4 统计学方法 应用SPSS19.0统计软件进行分析，E-cadherin表达与病理参数关系及疗效分析行χ2检验；生存曲线采用Kaplan-Meier分析。

2 结 果

2.1 免疫组化检测胃癌组织标本中 E-cadherin 蛋白表达 122例患者中有48例E-cadherin阳性表达，占总患者例数的39.34%。E-cadherin 主要在胃癌细胞膜呈现阳性表达。见图1。

2.2 E-cadherin 阳性表达与临床病理特征的关系 在发病年龄参数中，E-cadherin阳性表达在超过60岁发病的老年胃癌患者中检出率较高(χ2=5.671，P=0.017)；在分化程度参数中，E-cadherin 阳性表达率在高、中分化的胃癌中显著高于低分化胃癌(P<0.05)。见表1。

2.3 E-cadherin 阳性表达与化疗疗效的关系 患者按既定周数完成化疗后，评价患者疗效,E-cadherin阳性表达组化疗疗效优于E-cadherin阴性表达组(χ2=4.972，P=0.026)，见表2。

2.4 E-cadherin 阳性表达与患者生存率关系 见图2。随访1年内，全组患者有12例失访，其中E-cadherin 阳性组失访4例，E-cadherin 阴性组失访8例，E-cadherin 阳性表达患者生存率较E-cadherin 阴性表达高，但差异无统计学意义(P>0.05)。

表1 E-cadherin 阳性表达与临床病理特征的关系(n)

表2 E-cadherin阳性表达与化疗疗效关系(n)

图1 E-cadherin免疫组化结果(×400)

图2 E-cadherin表达与患者生存率的关系

3 讨 论

E-cadheirn 是一种介导同种细胞相互黏附的钙依赖性跨膜糖蛋白,人E-cadheirn定位于16q22.1,由上皮钙黏连素(CDH1) 基因编码，属于钙黏蛋白家族成员，其功能对维持上皮细胞正常形态，并且介导细胞黏附,直接或间接介导细胞间信息传递，对肿瘤的发生、发展和转移发挥作用〔5〕。近年来，E-cadherin生物学功能和病理学意义不断被拓展，其参与调控生命过程和发育过程的重要性不断巩固，同时发现它在肿瘤的发生发展中是一个抑癌因子，受到越来越多研究的肯定。胃癌是起源于胃上皮的恶性肿瘤，其发病与上皮细胞功能失调关系非常密切。因此，研究E-cadherin在胃癌中的表达情况与化疗疗效的关系，对胃癌临床治疗具有非常重要的意义。

胃癌好发于中老年男性，青少年及女性患者所占比例较少,与流行病学调查结果一致〔6〕。本实验中，入组病例临床分期分布规律符合我国胃癌发病就诊特点，即在我国，大多数胃癌患者就诊时，肿瘤往往已进展至中晚期。

本实验免疫组化结果显示E-cadherin 蛋白的表达位置为细胞膜，与文献〔7，8〕所报道E-cadherin在正常组织生长发育过程中起到维持上皮组织形态完整及细胞黏附作用结论符合。有部分病例样本中表现出细胞质的着色，颜色较浅，提示在胃癌组织中E-cadherin的表达能力下降或缺失，可能对于胃癌的产生和发展起到重要影响。E-cadherin 阳性表达率在高、中分化的胃癌中显著高于低分化胃癌，提示E-cadherin可能起到肿瘤抑制因子作用。E-cadherin的表达的下降或缺失，可破坏细胞之间的黏附功能，从而促进肿瘤细胞的生长和转移。E-cadherin 表达缺失亦可诱导上皮细胞向间充质细胞的转化，增强肿瘤细胞的侵袭力和抗凋亡能力〔9〕。同时，研究表明〔10〕在浸润型胃癌中E-cadherin 的表达能力普遍下调，而当细胞间的黏附能力被抑制后，则会影响分化与浸润表型，证明肿瘤组织的浸润转移与 E-cadherin 表达能力下调相关。

本研究中60岁以上老年患者居多，因此选用的是FOLFOX4化疗方案，该方案老年胃癌患者的化疗常规治疗方案。E-cadherin阳性表达组化疗疗效明显优于阴性组，提示E-cadherin 的表达下调不仅可影响肿瘤的转移、侵袭、浸润，也可影响胃癌细胞对化疗、放疗的敏感性和耐药性。

1 房静远,高琴琰.胃癌临床诊治的变迁与研究进展〔J〕.中华消化杂志，2015;35(1)：4-6.

2 Singhai R，Patil VW,Jaiswal SR,etal.E-cadherin as a diagnostic biomarker in breast cancer〔J〕.N Am J Med Sci，2011；3(5):227-33.

3 王海英,郑瑞鹏,姚志华,等.SOX方案与FOLFOX4方案治疗老年晚期胃癌的临床分析〔J〕.中国老年学杂志，2015;35(6):1525-7.

4 张贺龙.实体瘤疗效评价标准及演变〔J〕.现代肿瘤医学，2010;18(5):839-40.

5 Bezdekova M，Brychtova S，Sedlakova E，etal.Analysis of Snail-1，E-cadherin and claudin1 expression in colorectal adenornas and carcinomas〔J〕.J Int Mol Sci，2012;13(2):1632-43.

6 陈万青,郑荣寿,曾红梅,等.1989-2008 年中国恶性肿瘤发病趋势分析〔J〕.中华肿瘤杂志，2012;34(7)：517-24.

7 Chen X,Wang Y,Xia H,etal.Loss of E-cadherin promotes the growth,invasion and drug resistance of colorectal cancer cells and is associated with liver metastasis〔J〕.Mol Biol Rep,2012;39(6):6707-14.

8 Brouxhon SM,Kyrkanides S,Teng X,etal.Soluble E-cadherin:a critical oncogene modulating receptor tyrosine kinases,MAPK and PI3K/Akt/mTOR signaling〔J〕.Oncogene,2014;33(2):225-35.

9 Heindl S,Eggenstein E,Keller S,etal.Relevance of MET activation and genetic alterations of KRAS and E-cadherin for cetuximab sensitivity of gastric cancer cell lines〔J〕.J Cancer Res Clin Oncol,2012;38(5):843-58.

10 Wang ZS,Shen Y,Li X,etal.Significance and prognostic value of Gli-1 and Snail/E-cadherin expression in progressive gastric cancer〔J〕.Tumour Biol,2014;35(2):1357-63.

〔2015-12-09修回〕

(编辑 袁左鸣)

齐齐哈尔市科学技术计划项目(SFZD-2014079)

徐文思(1984-)，女，硕士，主治医师，主要从事消化系统常见病及疑难病的诊断及治疗研究。

R735.2

A

1005-9202(2017)07-1663-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.07.041