重组埃博拉疫苗No.1

2017-04-17

生物技术通讯 2017年1期

重组埃博拉疫苗No.1

埃博拉病毒包膜糖蛋白小鼠CTL表位的预测及鉴定

背景：埃博拉病毒（EBOVs）能够引发严重的出血热，具有极高的致死率。目前世界上尚无批准上市的疫苗以及对该病毒感染的有效治疗手段。有研究表明，体液免疫和细胞免疫反应是控制埃博拉病毒感染的关键，而且CD8+T细胞在介导疫苗引发的免疫保护方面发挥着重要作用。本研究旨在对埃博拉病毒包膜糖蛋白(GP)H-2d单元型的T细胞表位进行鉴定。

结果：利用计算机辅助算法对埃博拉病毒两种亚型（苏丹型和扎伊尔型）包膜糖蛋白H-2d单元型的T细胞表位进行预测。对预测的肽进行合成，在免疫了表达埃博拉GP复制缺陷型腺病毒的BALB/c小鼠上进行鉴定。酶联免疫斑点试验和细胞内细胞因子染色结果表明肽RPHTPQFLF(苏丹型埃博拉病毒)，GPCAGDFAF和YDRLASTV(扎伊尔型埃博拉病毒)能够刺激免疫后小鼠的脾细胞产生大量的IFN-γ。

结论：经鉴定，对于2种亚型埃博拉病毒的包膜糖蛋白共有3条肽被确定为T细胞表位。这些表位的确定将有助于以埃博拉病毒包膜糖蛋白为有效成分的疫苗在BALB/c小鼠模型上的评价。

2012年6月13日，军事医学科学院陈薇团队中的5名成员以吴诗坡博士为第一作者，在美国《Virology Journal》杂志上在线发表了一篇短论文。吴诗坡当时并不一定想到，在4年后，表达2014扎伊尔型埃博拉病毒包膜糖蛋白的基于Ad5载体的重组埃博拉病毒疫苗成为了现实。作为陈薇团队一员，这些年他一直参与埃博拉疫苗及强致病性病原的各项研究工作，他如此评价该工作的意义：

研究表明，体液免疫和细胞免疫反应是控制埃博拉病毒感染的关键。在体外对淋巴细胞使用重叠肽库刺激是细胞免疫反应检测中刺激细胞的通用方法。然而，重叠肽库的合成成本很高。因此，找到相应的CTL表位，将极大的方便相关疫苗细胞免疫反应的评价。利用计算机辅助算法对糖蛋白的CTL表位进行预测，选择最可能的表位进行合成，经验证，我们最终找到了苏丹型和扎伊尔型埃博拉病毒包膜糖蛋白在BALB/c小鼠上的CTL表位。这些表位的发现将有助于分析不同埃博拉疫苗在小鼠模型上的细胞免疫反应。而我们的研究也揭示了计算机预测-免疫学验证的方法是CTL表位鉴定的一种简单、经济而有效的方法。

相比整个埃博拉疫苗的研究，埃博拉病毒包膜糖蛋白CTL表位的发现仅仅是很小的一部分工作。系统而严谨的研究使我们有了这一个小发现，虽然是很小的一步，却也为之后炭疽杆菌PA、马尔堡病毒GP、寨卡病毒E蛋白等CTL表位的成功鉴定打下了基础。我们自始至终保持着扎实而深入的科研精神，贯串埃博拉疫苗的整个研究过程。