白酒糟酵母培养物对产蛋鸡生产性能、免疫机能和肠黏膜结构的影响

马友彪 周建民 张海军* 王 晶 武书庚* 齐广海 刘建忠 吕 亮

(1.中国农业科学院饲料研究所，农业部饲料生物技术重点开放实验室，北京100081；2.路德生物环保技术(古蔺)有限公司，泸州646509)

白酒糟酵母培养物对产蛋鸡生产性能、免疫机能和肠黏膜结构的影响

马友彪1周建民1张海军1*王 晶1武书庚1*齐广海1刘建忠2吕 亮2

(1.中国农业科学院饲料研究所，农业部饲料生物技术重点开放实验室，北京100081；2.路德生物环保技术(古蔺)有限公司，泸州646509)

本试验旨在探讨饲粮中添加白酒糟酵母培养物对产蛋鸡生产性能、免疫机能及肠黏膜结构的影响。选取324只27周龄、产蛋率和体重相近的健康海兰褐蛋鸡，随机分成3个组，每组6个重复，每个重复18只鸡。3组产蛋鸡分别饲喂添加0(对照)、1%和2%白酒糟酵母培养物的玉米-豆粕型饲粮，试验分为预试期1周和正试期8周。结果表明：1)各时间段内各组间产蛋率差异不显著(P>0.05)，但1%白酒糟酵母培养物组产蛋率在1～4周、5～8周和1～8周比对照组分别提高了1.79%、2.07%和1.93%；1%白酒糟酵母培养物组5～8周和1～8周的平均日采食量有高于对照组的趋势(P<0.10)。2)在第4周末，2%白酒糟酵母培养物组血清球蛋白含量较对照组和1%白酒糟酵母培养物组分别提高了19.0%(P<0.10)和27.2%(P<0.05)，1%和2%白酒糟酵母培养物组血清磷含量均显著高于对照组(P<0.05)。3)在第4周末，与对照组和1%白酒糟酵母培养物组相比，2%白酒糟酵母培养物组血清免疫球蛋白G和免疫球蛋白M含量均显著提高(P<0.05)；在第8周末，与对照组相比，2%白酒糟酵母培养物组血清免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量显著提高(P<0.05)，1%白酒糟酵母培养物组血清溶菌酶活性显著提高(P<0.05)。4)与对照组和2%白酒糟酵母培养物组相比，饲粮中添加1%白酒糟酵母培养物显著提高了产蛋鸡空肠绒毛高度和隐窝深度(P<0.05)，有提高绒毛高度/隐窝深度的趋势(P<0.10)。综上可知，产蛋鸡饲粮中添加适量(1%～2%)白酒糟酵母培养物可增强免疫机能，改善肠黏膜结构。

白酒糟酵母培养物；产蛋鸡；生产性能；免疫机能；肠道黏膜

我国饲料资源匮乏，尤其是蛋白质资源短缺，充分开发利用我国现有的饲料资源，提高工业废弃物的饲用价值，可有效缓解我国饲料资源短缺。目前，饲养动物健康状况较差、抗生素使用普遍，迫切需要提高饲料原料的健康特性，对保障我国畜牧业可持续健康发展具有重要意义。白酒糟酵母培养物系在酱香型白酒糟上接种酵母菌，经过固体高密度培养、可控自溶、小肽富集和低温干燥等工艺，生产的一种新型的具有保健作用的蛋白质饲料。白酒糟酵母培养物作为酵母培养物，含有蛋白质、小肽、寡糖、维生素和消化酶等营养素，还含有酵母细胞代谢产物等。酵母培养物已在牛[1]、羊[2]、猪[3]、肉鸡[4]、产蛋鸡[5]等动物中得到广泛应用，可提高饲用动物的健康状况，增强抗应激能力，改善生产性能。作为新型酵母培养物，白酒糟酵母培养物在蛋鸡上的应用尚未有报道。本试验通过研究饲粮添加不同水平白酒糟酵母培养物对产蛋鸡生产性能、血液生化指标、免疫机能及肠黏膜结构的影响，旨在确定适宜添加量，为白酒糟酵母培养物在蛋鸡生产中的应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用白酒糟酵母培养物由路德生物环保技术(古蔺)有限公司提供，相关指标测定如下：粗蛋白质26.8%，粗脂肪7.85%，粗纤维13.91%，粗灰分9.15%，水分10.6%，葡聚糖0.8%，甘露聚糖5.2%，禽表观代谢能10.82 MJ/kg。

1.2 试验设计与试验饲粮

采用单因子试验设计，选取324只27周龄、产蛋率和体重相近的健康海兰褐蛋鸡，随机分成3个组，每组6个重复，每个重复18只鸡，采用阶梯式笼养，每笼(40 cm×37 cm×40 cm)3只鸡。对照组饲喂不含白酒糟酵母培养物的饲粮，2个试验组分别饲喂含1%和2%白酒糟酵母培养物的饲粮。试验分为预试期1周和正试期8周。参照《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)和《海兰褐产蛋鸡饲养手册》，并结合试验设计配制玉米-豆粕型饲粮(表1)。

表1 饲粮组成及营养水平(风干基础)

1)矿物质和维生素预混料为每千克饲粮提供The mineral and vitamin premixes provided the following per kilogram of diets: VA 12 500 IU，VD34 125 IU，VK 2 mg，VE 15 IU，VB11 mg，VB28.5 mg，VB68 mg，VB125 mg，泛酸钙 calcium pantothenate 50 mg，烟酸 nicotinic acid 32.5 mg，生物素 biotin 2 mg，胆碱 choline 0.92 mg，Zn 66 mg，Fe 60 mg，Mn 65 mg，Cu 8 mg，I 1 mg，Se 0.15 mg。

2)营养水平均为计算值。Nutrient levels were calculated values.

1.3 饲养管理

试验采用半开放式鸡舍3层立体笼养，18个重复均匀分布。早晚补光，保证光照时间16 h/d，光照强度20 lx，室内相对湿度50%～80%，自然通风和横向负压通风相结合。自由采食和饮水；专人管理，每日捡蛋2次，每周带鸡消毒和清理鸡粪1次；常规免疫。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 生产性能

正试期，每天以重复为单位记录产蛋数、产蛋量、耗料量，计算1～4周、5～8周和1～8周的产蛋率、平均日采食量、平均蛋重、料蛋比、产蛋量。

1.4.2 血清生化和免疫指标

正试期第4周和第8周末，每个重复随机选取1只鸡翅静脉采血3 mL，静置分层，吸取血清于离心管中，2 500 r/min离心10 min，上清液分装于1.5 mL Eppendorf管，-20 ℃保存待用。血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、钙(Ca)、磷(P)含量在CHEM-5型半自动生化分析仪上测定。血清溶菌酶(LZM)活性按照Kreukniet等[6]的方法测定，采用双抗夹心酶联免疫吸附法，以市售试剂盒测定血清免疫球蛋白(Ig)G、IgM和IgA含量。

1.4.3 肠黏膜结构

正试期第8周末，每个重复随机选取1只鸡屠宰，剖开腹腔，轻轻挤出空肠内容物，用生理盐水冲洗净残余物，滤纸吸干残余水分，剪取空肠前段(前1/4处)约2 cm，用生理盐水冲洗净内容物，10%甲醛固定，制作石蜡切片，苏木精-伊红(HE)染色，光学显微镜下测定空肠绒毛高度和隐窝深度，并计算绒毛高度/隐窝深度(V/C)。每个切片随机抽取5个非连续性视野，每个视野统计3组数据。绒毛长度是指绒毛顶端到绒毛基部的长度，隐窝深度是指肠腺底部到两绒毛之间基部开口处的距离。

1.5 数据统计分析

试验数据采用SPSS 16.0软件中的one-way ANOVA先进行方差检验，再进行F检验和LSD多重比较。以P<0.05为差异显著，P<0.01为差异极显著，数据以“平均值±标准差”表示。

2 结 果

2.1 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡生产性能的影响

由表2可知，各时间段内各组间产蛋率差异不显著(P>0.05)，但1%白酒糟酵母培养物组产蛋率在1～4周、5～8周和1～8周比对照组分别提高了1.79%、2.07%和1.93%；在5～8周和1～8周，1%白酒糟酵母培养物组平均日采食量有高于对照组的趋势(P<0.10)；各时间段内各组间料蛋比无显著差异(P>0.05)，与其他2组比，1%白酒糟酵母培养物组料蛋比有所降低；各时间段内平均蛋重以及1～8周产蛋量各组间差异不显著(P>0.05)。

表2 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡生产性能的影响

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，肩标相同字母或者无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡血清生化指标的影响

由表3可知,在试验第4周和第8周末，2%白酒糟酵母培养物组产蛋鸡血清GLO含量高于其他2组，其中在试验第4周末2%白酒糟酵母培养物组血清GLO含量较对照组和1%白酒糟酵母培养物组分别提高了19.0%(P<0.10)和27.2%(P<0.05)；在试验第4周和第8周末，各组间血清TP、ALB和Ca含量无显著差异(P>0.05)；在试验第4周末1%和2%白酒糟酵母培养物组血清P含量均显著高于对照组(P<0.05)，而在试验第8周末血清P含量各组间差异不显著(P>0.05)。

表3 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡血清生化指标的影响

2.3 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡血清Ig含量和LZM活性的影响

由图1可知，在试验第4周末，与对照组和1%白酒糟酵母培养物组相比，饲粮中添加2%白酒糟酵母培养物显著提高了血清IgG和IgM含量(P<0.05)；各组间血清IgA含量和LZM活性无显著差异(P>0.05)。

如图2所示，在试验第8周末，与对照组和1%白酒糟酵母培养物组相比，饲粮中添加2%白酒糟酵母培养物显著提高了血清IgA含量(P<0.05)；各组间血清IgG含量无显著差异(P>0.05)；2%白酒糟酵母培养物组血清IgM含量显著高于对照组(P<0.05)；1%白酒糟酵母培养物组血清LZM活性显著高于对照组(P<0.05)，但与2%白酒糟酵母培养物组无显著差异(P>0.05)。

2.4 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡肠黏膜结构的影响

由表4和图3可知，饲粮中添加1%白酒糟酵母培养物显著提高了蛋鸡空肠绒毛高度(P<0.01)和隐窝深度(P<0.05)；2%白酒糟酵母培养物组的空肠绒毛高度和隐窝深度与对照组相比无显著差异(P>0.05)；与对照组相比，饲粮中添加1%白酒糟酵母培养物有提高空肠V/C的趋势，但未达到统计学显著水平(P>0.05)。

3 讨 论

3.1 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡生产性能的影响

酵母培养物是一种集常规和功能性营养素于一体的新型生物发酵饲料，含有消化酶、维生素、有机酸、小肽和辅助生长因子等多种生物活性物质，其对动物生产性能的改善作用受到越来越多的关注。近几年国内外关于酵母培养物在蛋鸡生产中添加效果的报道并不多，早期研究显示，酵母培养物能提高产蛋率并在在应激状态下维持产蛋率[7]；酵母培养物能改善料蛋比和降低死淘率[8]。本试验中，饲粮中添加白酒糟酵母培养物增加了产蛋鸡产蛋率的同时也提高了采食量，说明白酒糟酵母培养物会刺激动物采食，这可能是由于白酒糟酵母培养物中富含多种芳香物质(脂类、醇类、有机酸)和增味物质(鸟苷酸、肌苷酸、谷氨酸、多肽)。早期研究表明，与未添加和添加0.2%相比，添加0.1%酵母培养物对产蛋鸡生产性能的改善效果最佳[9]。本研究中1%白酒糟酵母培养物组产蛋鸡的生产性能最佳，白酒糟酵母培养物的有效添加量与前人的研究结果有差异，可能与酵母培养物来源、加工工艺以及饲养条件不同有关；一致的是，添加量过大都会影响家禽的生产性能，原因可能是酵母培养物中富含甘露寡糖，当动物摄入过多时，消化道内微生物发酵过度，可能引起动物消化不良性腹泻，使畜禽生长发育受阻。

数据柱形标注不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，标注相同字母或者无字母表示差异不显著(P>0.05)。图2同。

图2 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡第8周末血清Ig含量和LZM活性的影响

表4 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡肠黏膜结构的影响

图3 空肠形态切片图

3.2 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡血清生化指标的影响

血清中TP和ALB含量可以反映机体营养状态及蛋白质的吸收和代谢水平。研究表明，酵母培养物可显著提高肉仔鸡血清TP含量[10]，因酵母培养物可提高肉仔鸡对蛋白质的吸收和利用，使快速生长的肉仔鸡血清TP含量相应升高。与在肉鸡上的研究结果不同，本试验中各组间血清TP和ALB含量无显著差异，而2%白酒糟酵母培养物组产蛋鸡血清GLO含量较对照组显著提高。GLO是机体内参与免疫反应的蛋白质，反映机体免疫水平，2%白酒糟酵母培养物组血清GLO含量较对照组增加，表明饲粮中添加2%白酒糟酵母培养物增强了产蛋鸡的免疫机能。血清Ca和P含量能在一定程度上反映机体钙和磷的营养状况。本试验中，各试验组钙含量较对照组无显著差异，白酒糟酵母培养物提高了血清磷含量且差异显著。与本研究一致，酵母培养物可增加蛋雏鸡血清磷含量，但未增加血清钙[11]。关于白酒糟酵母培养物影响机体钙磷代谢确切的作用机制尚不清楚，可能与其中含有较高的植酸酶有关，有待进一步研究。

3.3 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡血清Ig含量和LZM活性的影响

本试验结果表明，饲粮中添加白酒糟酵母培养物有提高蛋鸡免疫机能的潜力，2%白酒糟酵母培养物组效果更佳。研究表明，酵母培养物可提高蛋雏鸡增重、免疫器官指数和血清新城疫抗体滴度[11]；肉仔鸡饲粮中添加适量的酵母培养物可强化免疫机能，提高应激条件下鸡的抗感染能力，改善生产性能[12]；酵母培养物能显著提高血液中IgG、IgA、IgM含量和免疫器官指数，明显改善肉仔鸡的生长性能和免疫功能[4]。酵母培养物增强免疫机能可能与其中含有酵母细胞壁多糖(葡聚糖、甘露寡糖等)有关，酵母细胞壁多糖可刺激动物免疫器官生长发育和成熟，并增强机体体液免疫应答[13]。本试验中添加2%白酒糟酵母培养物时提高了产蛋鸡血清Ig含量，但2%白酒糟酵母培养物组产蛋鸡的生产性能略低于1%白酒糟酵母培养物组，推测可能是由于添加2%白酒糟酵母培养物使机体产生过多免疫应答反应，减少了用于产蛋的能量或营养素的吸收利用。酵母培养物对家禽血清LZM活性影响的报道较少，本研究发现，饲粮中添加1%白酒糟酵母培养物可增加血清LZM活性。与本结果相符，Gao等[14]研究得出酵母培养物可以提高肉仔鸡血液中LZM活性。LZM主要由巨噬细胞分泌，是构成非特异性免疫功能因素之一，LZM活性增加表明酵母培养物能活化巨噬细胞，增强抗菌免疫功能，保护机体免受感染。

3.4 白酒糟酵母培养物对产蛋鸡肠黏膜结构的影响

小肠黏膜结构反映动物肠道的健康状况，绒毛高度和隐窝深度是衡量动物消化吸收功能的重要指标。绒毛高度增加，肠上皮细胞与营养物质的接触和吸收面积变大，对养分的吸收能力增强；消化道发育成熟时，隐窝上皮细胞作用减弱，隐窝深度变浅[15]；黏膜结构改善，V/C变大，绒毛对营养物质的消化吸收功能增强。研究发现，酵母培养物能够促进幼龄畜禽肠道发育，添加0.2%酵母培养物显著提高肉仔鸡十二指肠、空肠和回肠绒毛高度和V/C，并显著降低隐窝深度[7]；饲粮中添加0.25%酵母培养物能显著提高肉仔鸡肠绒毛高度并显著降低隐窝深度[15]。与以上结果类似，本研究结果显示，饲粮中添加1%白酒糟酵母培养物后蛋鸡空肠绒毛高度和V/C提高，表明1%的白酒糟酵母培养物对蛋鸡肠黏膜结构具有改善作用，且这一趋势与改善蛋鸡生产性能一致，1%白酒糟酵母培养物组产蛋鸡生产性能的提高可能与改善肠黏膜结构有关。关于白酒糟酵母培养物改善肠道黏膜结构的确切机制目前尚不清楚，可能与其中含葡聚糖和甘露聚糖有关，其具有吸附病原菌的功能，可减少肠道黏膜与抗原的结合，保护黏膜免受损伤。

4 结 论

① 饲粮中添加1%白酒糟酵母培养物有提高产蛋鸡的产蛋率和降低料蛋比的趋势，还可改善肠黏膜结构，提高绒毛高度，并有升高V/C的潜力。

② 饲粮中添加2%白酒糟酵母培养物可提高产蛋鸡血清中Ig含量，进而增强机体免疫力。

③ 基于本试验结果，白酒糟酵母培养物在产蛋鸡饲粮中的适宜添加量为1%～2%。

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Luzhou646509,China)

*Corresponding authors: ZHANG Haijun, associate professor, E-mail: fowlfeed@163.com; WU Shugeng, professor, E-mail: wushugeng@caas.cn

(责任编辑 菅景颖)

Effects of Yeast Culture for White Distiller’s Grains on Performance, Immune Function and Intestinal Mucosal Structure of Laying Hens

MA Youbiao1ZHOU Jianmin1ZHANG Haijun1*WANG Jing1WU Shugeng1*QI Guanghai1LIU Jianzhong2LYU Liang2

(1.FeedResearchInstitute,TheChineseAcademyofAgriculturalSciences,KeyLaboratoryofFeedBiotechnologyofMinistryofAgriculture,Beijing100081,China; 2.LoadBiologicalEnvironmentalTechnology(Gulin)Co.,Ltd.,

The objective of this study was to investigate the effects of yeast culture for white distiller’s grains on performance, immune function and intestinal mucosal structure of laying hens. Three hundred and twenty-four healthy 27-week-old Hyline laying hens with the similar body weight and egg production rate were randomly divided into three groups containing 6 replicates of 18 birds each. Laying hens in 3 groups were fed a corn-soybean meal type diet supplemented with 0 (control), 1% and 2% yeast culture for white distiller’s grains, respectively. The trial contained one-week adaptation period and eight-week formal trial period. The results showed as follows: 1) egg producing rate did not differ significantly among experimental groups of each period of time (P>0.05), but the egg producing rate at 1 to 4 weeks, 5 to 8 weeks and 1 to 8 weeks in 1% yeast culture for white distiller’s grains group was increased by 1.79%, 2.07% and 1.93% compared with control group, respectively. Average daily feed intake at 5 to 8 weeks and 1 to 8 weeks in 1% yeast culture for white distiller’s grains group had a higher trend than that in the control group (P<0.10). 2) At the end of week 4, serum globulin content in 2% yeast culture for white distiller’s grains group was increased by 19.0% (P>0.05) and 27.2% (P<0.05) compared with control group and 1% yeast culture for white distiller’s grains group, respectively, and serum phosphorus content in 1% and 2% yeast culture for white distiller’s grains groups was significantly higher than that in control group (P<0.05). 3) At the end of week 4, serum immunoglobulin (Ig) G and IgM contents in 2% yeast culture for white distiller’s grains group were significantly increased compared with control group and 1% yeast culture for white distiller’s grains group (P<0.05); at the end of week 8, serum IgA and IgM contents in 2% yeast culture for white distiller’s grains group and serum lysozyme (LZM) activity in 1% yeast culture for white distiller’s grains group were significantly increased compared with control group (P<0.05). 4) Compared with control group and 2% yeast culture for white distiller’s grains group, supplementation of 1% yeast culture for white distiller’s grains significantly increased the villus height and crypt depth (P<0.05), and had a trend to increase the villus height to villus crypt ratio (V/C) in jejunum of laying hens (P<0.10). The overall results indicate that appropriate dosage (1% to 2%) yeast culture for white distiller’s grains in the diet of laying hens can enhance the immune function and improve the intestinal mucosal structure.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(3)：890-897]

yeast culture for white distiller’s grains; laying hens; performance; immune function; intestinal mucosal

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.03.020

2016-08-29

现代农业产业技术体系(CARS-41-K13)；家禽产业技术体系北京市创新团队项目(CARS-PSTP)

马友彪(1989—)，男，山东济宁人，硕士研究生，动物营养与饲料科学专业。E-mail: myb0514@126.com

*通信作者:张海军，副研究员，硕士生导师，E-mail: fowlfeed@163.com；武书庚，研究员，硕士生导师，E-mail: wushugeng@caas.cn

S816

A

1006-267X(2017)03-0890-08