中老年翼状胬肉患者癌胚抗原相关细胞黏附分子6和血管内皮生长因子表达与微血管密度的关系

2017-04-08朴天华王云枫

中国老年学杂志 2017年6期

关键词：癌胚抗原翼状胬肉

李娟朴天华王睿王云枫

(牡丹江医学院附属红旗医院眼科，黑龙江牡丹江 157000)

中老年翼状胬肉患者癌胚抗原相关细胞黏附分子6和血管内皮生长因子表达与微血管密度的关系

李娟朴天华王睿王云枫1

(牡丹江医学院附属红旗医院眼科，黑龙江牡丹江 157000)

目的检测翼状胬肉中癌胚抗原相关细胞黏附分子(CEACAM)6、血管内皮生长因子(VEGF)和CD105标记的微血管密度(MVD)的关系，探讨其临床价值。方法 64例翼状胬肉患者临床资料及术后标本作为观察组，15例正常结膜组织标本作为对照组。应用免疫组化方法检测两组CEACAM6、VEGF和CD105的表达。结果两组CEACAM6、VEGF表达的阳性率及MVD值差异有统计学意义(P<0.05)。观察组CEACAM6、VEGF和MVD在不同病变的表达差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析显示观察组CEACAM6与MVD值、VEGF与MVD值均呈正相关性。结论翼状胬肉中CEACAM6、VEGF高表达预示病变处于进展状态，间质中有较高的血管密度。

翼状胬肉；癌胚抗原相关细胞黏附分子(CEACAM)6；血管内皮生长因子(VEGF)；微血管密度(MVD)

翼状胬肉是一种纤维血管组织从结膜向角膜增生的常见外眼疾病，中医称“胬肉攀睛”，俗称“鱼肉”，不仅影响局部结构，还可以损害视功能〔1,2〕，目前其发病因素不清楚。近来研究认为翼状胬肉的发生需要新生的血管化〔3〕。癌胚抗原相关细胞黏附分子(CEACAM)6是在细胞表面和细胞膜中形成的跨膜糖蛋白，是癌胚抗原亚型，近来的研究发现其与血管生成有一定关系〔4,5〕。血管内皮生长因子(VEGF)是经典的血管生成促进因子，可以引起血管内皮的繁殖和新生，并促进间质的血管化〔6,7〕。本实验观察翼状胬肉中CEACAM6、VEGF的表达特征，关注二者与CD105标记的微血管密度(MVD)的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2013～2015年行翼状胬肉切除的患者64例作为观察组，其中静止期31例，进行期33例，男34例，女30例，年龄40～69例，平均59岁，病程11个月～10年。均无其他角膜及结膜的病变。15例正常结膜组织标本作为对照组，来源于无眼病的供体眼或活体手术眼，男10例，女5例，年龄35～65例，平均53岁。患者与家属签署知情同意书，并经医院伦理委员会批准。两组一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 CEACAM6、VEGF和CD105的检测均应用免疫组化SP法、二氨基联苯胺(DAB)显色。操作严格按实验步骤进行，做好质控工作。

1.3 CEACAM6、VEGF和MVD结果的判定方法 CEACAM6、VEGF：定位于细胞质，以细胞质内出现棕黄色颗粒物质为阳性。随机计数5个高倍视野区域(400倍)，取其平均值，以阳性细胞≥10%为阳性表达，<10%为阴性表达。CD105结果的判定方法：以微血管内皮细胞的细胞质呈棕黄色为阳性细胞，MVD计数参照Weindner等〔8〕方法，先确定棕色染色的内皮细胞或细胞丛作为一个计数的血管，首先在低倍镜下确定肿瘤内血管密度的热点区，再在高倍镜下观察肿瘤细胞与结缔组织成分明显区别的任何一个染色的内皮细胞或细胞丛计为一个血管，如果不连续，其分支结构也作为一个血管计数。记录5 个视野内的微血管数，取其平均值。

1.4 统计学方法采用SAS6.12统计软件进行χ2检验、t检验、Pearson相关分析。

2 结果

2.1 两组CEACAM6、VEGF和MVD比较两组CEACAM6、VEGF阳性率、MVD值差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2 观察组CEACAM6、VEGF和MVD在不同病变中的表达观察组CEACAM6、VEGF和MVD在不同病变中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3 观察组CEACAM6、VEGF和MVD的相关性 CEACAM6与MVD值(r=0.48，P=0.045 1)、VEGF与MVD值(r=0.54，P=0.012 2)均呈正相关性。

表1 两组CEACAM6、VEGF阳性表达和MVD比较〔n(%)〕

表2 观察组CEACAM6、VEGF阳性表达和MVD在不同病变中的表达〔n(%)〕

3 讨论

翼状胬肉一般认为是由外界刺激而形成的局部球结膜纤维血管组织的炎性病变，睑裂部球结膜及结膜下组织变性、肥厚、增生，向角膜内发展，形成三角形赘生组织，单眼或双眼受犯，侵犯角膜后逐渐增大，甚至可覆盖至瞳孔区而严重影响视力〔9〕。近来认为外界刺激、慢性炎症引起的局部组织的细胞增殖和血管形成可能对病变有明显的促进作用〔10〕。而新生的血管是翼状胬肉的主要病理表现〔11〕。VEGF定位在染色体的6p21.3，全长14 kb，由8个外显子，7个内含子组成，这是被研究最多的与血管生成相关的因子〔12,13〕，其高表达时可以通过受体参与间质的血管生成〔14〕。CD105被认为是与细胞增生有关的内皮细胞膜抗原〔15〕，也有学者认为CD105是转化生长因子-β受体的复合物之一，正常情况下CD105表达的间质血管内皮中，因此CD105阳性的部位提示为血管〔16,17〕。CEACAM6作为免疫球蛋白超家族的成员，也是细胞表面的糖蛋白，主要在炎性反应和免疫反应部位活化淋巴细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞及各种上皮细胞和成纤维细胞表面表达；研究显示其在肿瘤中的表达异常，并对肿瘤进展有一定作用〔18〕；其与细胞的血管生成相关，尤其是在高增殖状态的肿瘤中〔19〕。张哲等〔20〕通过研究CEACAM6在骨肉瘤中的表达，发现CEACAM6参与细胞恶性转变的增殖过程，同时对间质的血管生成有重要的促进作用。本实验提示翼状胬肉中CEACAM6、VEGF的表达升高可以促进病变的形成；CEACAM6、VEGF可以在一定程度上促进间质中CD105阳性的血管新生，此时实质细胞和间质细胞生长活跃，血液供应充足。此结果也提示翼状胬肉是以血管生成为中心环节的病变，积极研究病变的血管生成，对阐明其生长机制有重要价值，而阻断血管生成可能对治疗提供一种可行的手段〔21,22〕。

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〔2015-03-17修回〕

(编辑苑云杰)

牡丹江市科学技术计划项目(No.Z2015s0030)

王云枫(1981-)，男，主治医师，硕士，主要从事内分泌学研究。

李娟(1980-)，女，主治医师，硕士，主要从事眼科学研究。

R777.33

1005-9202(2017)06-1497-03；