复方芍红颗粒的稳定性研究

陈金凤+杨东亮+朱青梅+滕亮

[摘要] 目的 为复方芍红颗粒的贮存条件及有效期的制订提供参考。 方法 采用影响因素试验，高温（60、40℃），高湿[RH（90±5）%、（75±5）%]，光照[照度（4500±500）lx]等条件探测影响该制剂的因素，加速试验[温度（40±2）℃、湿度（75±5）%；温度（30±2）℃，湿度（60±5）%]加速其有效成分的降解，经典恒温试验（在50～80℃4个不同温度恒温水浴锅条件下，定时取样，测定溶液中芍药苷的残余浓度）初步预测其有效期。结果 影响因素试验结果表明复方芍红颗粒对光线较为稳定，但高温高湿条件下芍药苷含量均有明显下降，提示在贮存过程中应注意控制环境的湿度与温度，应于阴凉干燥处存放，通过经典恒温法预测该颗粒剂有效期为1.48年。 结论 本文建立了可用于控制复方芍红颗粒质量稳定的储存条件，采用复合膜密闭包装且低温干燥处存放，可以提高该制剂的稳定性。本实验精密度高、重复性好、可信度高，所得數据可为复方芍红颗粒最终的贮存条件及有效期的制订提供参考。

[关键词] 复方芍红颗粒；影响因素试验；加速试验；经典恒温试验

[中图分类号] R917 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）02（c）-0151-04

复方芍红颗粒是根据临床验方研发而成的中药新药，原方主要是由赤芍、红花、川芎、红景天四味药材组成，赤芍，方中君药，性微寒、微苦，具有清热凉血，散瘀止痛之功效。用于跌扑损伤，热入营血，吐血衄血，温毒发斑，目赤肿痛，肝郁胁痛，临床用于降血糖、肝保护、防治老年性痴呆、耐缺氧、扩张血管、抗血栓、抗炎等作用[1-2]；红花，辛、温。归心、肝经。具有活血通经、散瘀止痛之功效，临床主要用于经闭、痛经、恶露不行、胸痹心痛、滞腹痛、胸胁刺痛、跌扑损伤、疮疡肿痛[3-4]；川穹，具有活血行气、祛风止痛的功效，临床用于胸痹心痛、胸胁刺痛、跌扑肿痛、头痛、风湿痹痛。味苦、辛，是活血祛瘀、行气开郁、祛风止痛、治疗头痛之首选药物[5-6]；红景天，性寒，味苦、涩。能补气清肺，益智养心，收涩止血，散瘀消肿，临床用于降低血压、减慢心率，抗疲劳、抗缺氧、预防心衰等作用[7-8]；经药理学实验验证，抗冠心病功效良好，因此，该处方主要用于冠心病的治疗。冠心病是一种常见的心血管疾病，在心血管疾病中3/4死于冠状动脉疾病，尤其是心肌梗死发病率明显增高，且预后较差[9]。早在20世纪50年代，其发病率在西方一些国家就不断增高，并成为人类死亡之首。在我国随着人民生活水平的不断提高，人口日益老龄化和预防保健工作的相对滞后，冠心病的患病率、发病率和死亡率也都持续上升，近年来，发病率又进一步明显升高，防治任务十分沉重，应该引起人们的关注。随着现代医疗技术的发展，诊断准确率的提高，多元治疗方法的进步（药物治疗、介入治疗以及手术治疗[10]等），可以更好地改善患者的临床症状，降低病死率，提高生活质量。人们普遍希望采用天然无公害植物药进行疾病的防治，从而给中医药防治冠心病提供了良好的契机。

本课题组前期已经完成了芍红颗粒剂的制备工艺研究，将该处方药材经适宜溶剂提取浓缩后制备成颗粒剂，使其便于服用，稳定性强，易贮存保管。为有效控制芍红颗粒的质量，本课题在中医药学理论和相关法规的指导下，对复方芍红颗粒剂的质量控制进行系统、深入的研究，制订出科学、合理、可行的质量标准，为确保该制剂的临床安全性和有效性提供实验基础，也为进一步对其进行研究与开发提供依据。

本课题在完成其质量标准草案[11-12]的基础上，为了确定芍红颗粒储存控制条件并初步预测出其有效期，对复方芍红颗粒剂进行了初步的稳定性研究[13-20]，为此保证该药在生产、运输、贮存、使用的过程中更加安全有效。

1 仪器与试药

1.1 仪器

LC20-AB高效液相色谱仪（日本岛津，SPD-20A检测器）；DK-S26恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）；101-E电热恒温鼓风干燥箱（上海森信实验仪器有限公司）；KQ3200超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；BS110S电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；DHG-9070A电热鼓风干燥箱（上海一恒科技有限公司）；色谱柱（Kromasil C18，5 μm，4.6 mm×250 mm）。

1.2 试剂与试药

甲醇（色谱级，Fisher公司），水为超纯水，复方芍红颗粒（批号20140618、20140620、20140622），新疆医科大学药物分析教研室研制。

2 方法与结果

2.1 影响因素试验

2.1.1 高温试验 称取三份复方芍红颗粒2.0 g（批号为20140618、20140620、20140622）置称量瓶中，打开瓶盖，放在60℃恒温箱中，放置10 d，于第5天和第10天取样，制备供试品，按质量标准草案中芍药苷含量测定方法测定芍药苷含量。如供试品含量低于90%，则在40℃下同法进行试验。如60℃无显著变化，则不必进行40℃试验[21]。在60℃恒温箱中放置10 d，供试品含量低于90%，含量有显著变化，因此在40℃下同法进行试验，数据结果显示，供试品含量高于90%，说明温度对供试品有一定影响的。见表1。

2.1.2 高湿试验 称取三份复方芍红颗粒2.0 g（批号为20140618、20140620、20140622）置称量瓶中，打开瓶盖置恒湿密闭容器中，于25℃、RH（90±5）%条件下放置10 d，在第5天和第10天取样，制备供试品，按质量标准草案中芍药苷含量测定方法测定芍药苷含量及吸湿增重。若吸湿增重5%以上，则应在25℃、RH（75±5）%下同法进行检验；若吸湿增重在5%以下，且样品含量测定不低于90%，则不再进行此项检验。由表中数据可见，湿度对供试品中芍药苷的含量及吸湿增重影响显著，（90±5）%湿度条件下，第10天含量下降近一半，吸湿增重达44%。结果见表2～3。

2.1.3 光照试验 称取三份复方芍红颗粒2.0 g（批号为20140618、20140620、20140622）置称量瓶中，打开瓶盖置光照箱或其他适宜的光照容器内，于照度（4500±500）lx条件下放置10 d，在第5天和第10天取样，制备供试品，按质量标准草案中芍药苷含量测定方法测定芍药苷含量。光照条件在（4500±500）lx下，第10天含量几乎没有变化。结果见表4。

2.2 加速实验

复方芍红颗粒采用市售复合膜包装袋，密闭包装，在温度（40±2）℃，相对湿度（75±5）%的条件下放置6个月[21-22]。在试验期间第1、2、3、6个月取样一次，制备供试品，按质量标准草案中芍药苷含量测定方法测定芍药苷含量，将结果与第0个月比较，如6个月内供试品经检测不符合复方芍红颗粒的质量标准草案，则应在中间条件下即在温度（30±2）℃，相对湿度（60±5）%的情况下進行加速试验，时间仍为6个月，供试品在温度（40±2）℃，相对湿度（75±5）%的条件下放置6个月，芍药苷含量下降了4.58%。在温度（30±2）℃，相对湿度（60±5）%的条件下，芍药苷含量下降了3.05%，在此条件下，供试品6个月内稳定。结果见表5。

2.3经典恒温试验[23]

精密称取样品颗粒1.0 g，置具塞安瓿瓶中，密封，在50～80℃ 4个不同温度恒温水浴锅条件下，间隔一定的时间取样，测定溶液中芍药苷的残余浓度。按照上述方法重复一次，以芍药苷剩余浓度的对数对时间作图。见表6，图1。通过芍药苷在不同温度下降解得到的拟合曲线方程可知其反应速率常数K，并根据阿伦尼乌斯方程LnK=LA-Ea/RT，可以计算其活化能，结果表明，芍药苷在水溶液中的降解反应速率随温度的升高而加快，该反应呈现一级动力学规律。

根据不同温度下芍药苷反应速度常数-温度表（表7），以各指标浓度对数对时间回归，求出不同浓度段反应速率常数K。根据Arrhenius指数定律K=e-E/RT，以LnK对1/T作图（图2），Arrhenius 方程LnK= -（11321/T）+26.386，r=-0.9848，求出室温时的速度常数K298=8.125×10-6，根据半衰期公式t1/2=0. 693/K，有效期公式t0.9=0.1054/K，可以预算出复方芍红颗粒的有效期。即室温（25℃）有效期为t0.9=0.1054/K=1.48年。

3 讨论

新药制剂的稳定性研究是关系到其能否投产上市的重要因素，考察新药及其制剂在不同环境因素影响下，经一定时间后检测有效成分的含量是否改变，找出影响其稳定性的因素，采取相应的措施，以阻止或延缓其变化，是使疗效好、毒副作用小的药品被推广应用的必不可少的条件[24]。

3.1 影响因素实验

样品暴露在空气中，接受强光照射、高温、高湿环境的考验，考察各项指标的变化，可研究该药品的固有性质及各指标的影响因素，为贮臧、处方和加工工艺提供资料。复方芍红颗粒的稳定性实验结果表明，湿度是影响本品稳定性的主要因素，其次是温度，高温有一定的影响，光照几乎没有影响，为了该制剂的稳定性，本品的包装材料应该密闭保存，存储条件应该低温干燥。

3.2 加速实验

加速实验是在未取得室温留样稳定性结果之前，考察药品在临床研究或试生产期间的稳定性，确保药品质量。在极端条件下，通过加速药物化学或物理变化，探讨药物的稳定性，为药物的评审﹑包装﹑运输及贮藏条件提供参考依据[25-26]。本实验结果表明6个月后与第0个月比较，其有效成分芍药苷含量在6个月内较稳定，符合复方芍红颗粒的质量标准草案。

3.3 经典恒温实验

本实验通过不同温度，不同时间取样对芍药苷进行含量测定，通过对每个温度下进行回归，得出K值，以LnK对温度的倒数1/T作图，得方程LnK=-（11321/T）+26.386 R=-0.9848，将T=298代入方程，得K298=8.125×10-6，室温（25℃）预测出有效期为t0.9=0.1054/K=1.48年。

通过复方芍红颗粒的稳定性研究，确定温度与湿度为该制剂不稳定因素，因此包装材料应密闭，且干燥贮存。加速试验结果显示6个月内该制剂较为稳定。经典恒温法预测出复方芍红颗粒的有效期为1.48年，约18个月，该数据为复方芍红颗粒的有效期的制订提供参考。

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（收稿日期：2016-05-20 本文编辑：王 丽）