亲子鉴定中STR基因座可疑多步突变2例

2017-04-04张陈明

法医学杂志 2017年4期

关键词：亲子鉴定基因座胡某

张陈明，陶胜

（安徽百友司法鉴定中心，安徽合肥230031）

亲子鉴定中STR基因座可疑多步突变2例

张陈明，陶胜

（安徽百友司法鉴定中心，安徽合肥230031）

法医遗传学；亲子关系；短串联重复序列；DNA突变分析；多步突变

1 案例

两位母亲（胡某与杨某）均因为自己女儿（刘某与李某）办理出生医学证明所需，委托我中心进行亲子关系鉴定。本中心采集四位被鉴定人指尖血备检。用Chelex-100法提取基因组DNA，分别采用AGCU EX22、AGCU 21+1试剂盒（无锡中德美联生物技术有限公司）对常染色体上39个STR基因座进行复合扩增，并用PowerPlex®16 HS试剂盒（美国Promega公司）对常染色体上15个STR基因座进行复合扩增，对上述检验结果进行复核验证。同时，采用AGCU X12试剂盒（无锡中德美联生物技术有限公司）对X染色体上12个STR基因座进行复合扩增。以上扩增均在9700型PCR仪（美国AB公司）上完成，扩增体系和扩增条件均依照试剂盒使用说明书，PCR产物在3130xl基因分析仪（美国Thermo Fisher Scientific公司）上进行毛细管电泳，用GeneMapper®ID v3.2软件进行STR分型。

先用AGCU EX22试剂盒对常染色体21个STR基因座进行检验，发现两对母女（胡某-刘某、杨某-李某）均在FGA基因座存在多步突变的可能。在第一对母女的FGA基因座，母亲胡某的表型为“22”，女儿刘某的表型为“27”；在第二对母女的FGA基因座，母亲杨某的表型为“21”，女儿李某的表型为“24”。采用PowerPlex®16 HS试剂盒进行复核验证，发现FGA基因座的分型与上述结果一致，且这两种STR试剂盒检出的FGA基因座的等位基因峰（胡某女儿的“27”、杨某的“21”以及杨某女儿的“24”）在信号强度、峰高与峰面积等方面均比其他基因座的杂合子高。

采用AGCU 21+1试剂盒进一步检测18个多态性STR基因座，第一对母女又出现一个STR基因座不符合遗传规律：在D4S2408基因座，母亲胡某的表型为“9”，女儿刘某的表型为“10”；在第二对母女中，母亲杨某均能提供女儿李某必需的等位基因。对12个X-STR基因座进行分型检验，发现两对母女在每个X-STR基因座均有一个相同的等位基因。按照SF/Z JD0105001—2016《亲权鉴定技术规范》，在考虑第一对母女FGA和D4S2408基因座存在突变可能、第二对母女FGA基因座存在突变可能的前提下，累积亲权指数分别为1.020 1×104、1.525 1×105。

2 讨论

在亲子鉴定实践中，STR基因座发生突变的现象是普遍存在的，且其发生突变的主要机制是复制滑动突变，只涉及一个基序的加或减称为一步突变，约占STR基因座的90%，少数突变基因会涉及几个基序，称多步突变[1]。多步突变是通过逐步突变形成的，突变的步数越多，其发生的机会越小，最多突变步数为四步[2]。通常STR基因座核心序列重复次数越多，基因突变率越高，FGA基因座等位基因范围在12.2～51.2，目前观察到的等位基因数目多达80个，共有69种变异，在常见突变的基因座中，FGA基因座的突变率最高（0.29%）[3，4]。

在本文的两个案例中，FGA基因座的可疑突变分别达到了五步及三步，这在日常鉴定实践中极为罕见，甚至第一对母女还同时有另一个STR基因座（D4S2408）存在一步突变的可能。查阅文献发现，亲子鉴定中同时存在2个及以上STR基因座突变的现象已有报道[5-7]。

关于亲子鉴定实践中遇到这种突变的应对策略，笔者认为，若只有1个或2个STR基因座不符合孟德尔遗传规律，为了避免因STR基因座发生突变而错判，应增加突变率低、稳定性好的STR基因座进行复核验证，以便能更有效地排除近亲关系。在二联体亲子鉴定中，遇到突变时若能使双亲的另一方也参与检验，更有利于结果的准确判断。有文献[8]报道，FGA基因座存在等位基因丢失导致假突变现象，因此，若发生突变的基因座检测为纯合子，最好换用其他厂家生产、引物序列不同的试剂盒或重新设计引物进行验证，以防出现等位基因漏检，即杂合子扩增丢失现象。如出现类似突变，也可以考虑应用高通量二代测序仪分型检测判断，有条件的还可进一步增加红细胞血型、SNP等遗传标记系统、性染色体STR分型、mtDNA测序、插入缺失（InDel）位点检验等技术，以确保鉴定意见的准确性与严谨性。

[1]侯一平.法医物证司法鉴定实务[M].北京：法律出版社，2012：136-137.

[2]李海霞，马晓燕，张晋湘，等.24个常用STR基因座的突变观察与分析[J].中山大学学报（医学科学版），2010，31（1）：13-16.

[3]李成涛，郭宏，赵珍敏，等.亲权鉴定中常用STR基因座的基因组学和遗传学分析[J].法医学杂志，2008，24（3）：214-220.

[4]邓志辉，吴国光，程良红，等.13个STR基因座在亲子鉴定案例中的基因突变观察[J].中国法医学杂志，2013，18（3）：150-153.

[5]常云峰，蔡继峰，杨立，等.2个STR基因座变异亲子鉴定1例[J].法医学杂志，2011，27（3）：192.

[6]任贺，郭剑章，陈星，等.3个STR基因座变异亲子鉴定1例[J].法医学杂志，2010，26（6）：479-480.

[7]李海霞，孙宏钰，张何，等.3个STR基因座同时突变的亲子鉴定案1例[J].法医学杂志，2009，25（4）：319-320.

[8]蔡金洪，汤美云，黄健.亲子鉴定中常用10个STR基因座突变的观察和分析[J].湖南中医药大学学报，2013，33（4）：8-9.

DF795.2

10.3969/j.issn.1004-5619.2017.04.035

1004-5619（2017）04-0451-02

2016-04-05）