肿瘤标志物CA125研究

张昊岳

（芮城县人民医院，山西 运城 044600）

在正常情形之下，CA125在胎儿时期是由胚腔上皮与羊膜表现出来，在成人体内只要是由胚腔上皮发展出来的组织皆可发现微量的CA125，如肋膜，心包膜，腹膜，输卵管上皮，子宫内膜与子宫颈等。正常卵巢组织并无CA125。用于肿瘤的侦测时，这种CA125抗原另可由妇科癌症，乳癌，肺癌，大肠癌中发现[2]。

CA125的化学成分迄今仍未完全确定，目前认为是一种高分子量的醣蛋白，其中能与OC125反应的最小次单位之分子量为200kD。最近也发展出另一种类似的单株抗体，称之为M11，可以提供第二代的免疫分析，所侦测出的抗原称之为CA125-II。

1 CA125的检测方式

目前CA125的检测方式主要为ELISA的三明治法，但是此法存在着缺点，其一为使用之两种CA125抗体需要辨别CA125抗原上之不同表位，避免两种抗体互相竞争抗原上的表位而使得量测失准，其二为在实验流程中若使用一些化学修饰可能会影响CA125抗体抗原之结合[2]。而其他类型之检测法也相继被提出，如表面电浆波检测之方式，微流道检测，以及各种电化学检测法均被运用于CA125抗原之检测上。

而血液中CA125抗原检测正常值定在小于35U/ml，只有1%的健康成人血液中的CA125浓度会大于35U/ml。停经后的妇女如果CA125指数上升，就必须要赶快接受进一步检查，因为停经后的妇女如果CA125上升又合并发现有卵巢肿瘤，其罹患卵巢癌的机率可高达90%[2]。

2 CA125检测

2.1 CA125抗体抗原复合体之光学纹理比较

本实验比较单纯抗体、抗原以及抗体抗原复合体之光学纹理，为了以同一个重量体积浓度来比较，将浓度0.0001、0.001、0.002、0.005、0.01、0.05、0.1、0.2、0.5、1与2µg/ml之CA125抗体与CA125抗原，在相同浓度下以体积比1：1的比例混合。在此混合的溶液中，CA125抗体的浓度与CA125抗原的浓度皆为原本的一半，但是试管中的蛋白质总浓度不变。取2µl相同浓度之CA125抗体、抗原及抗体抗原免疫复合体各别滴在玻璃基板上，制作成含有不同蛋白质之液晶盒，灌入HDN液晶后，在偏光显微镜下观察，其在6个不同浓度之下的光学纹理，由Qt所计算之11种不同浓度的光学强度。CA125抗体与CA125抗原混合的溶液在浓度范围0.1ng/ml～0.5µg/ml其亮度平均值皆较单纯只有CA125抗体或是CA125抗原来的强，由于浓度在0.1µg/ml以下其强度差异较小，难以肉眼观察，因此使用TTEST统计分析所得之p-value来判定实验组别之间的差异程度，并定义p-value小于0.001为显着差异。

2.2 CA125抗体反应的光学纹理比较

本实验中取浓度0.1µg/ml的CA125抗原与SSAT抗体各100µl在试管中进行混合，反应6个小时之后取每滴2µl滴在玻璃基板上，等其自然阴干后制成液晶盒，于偏光显微镜下观察，并与浓度0.1µg/ml的CA125抗原、SSAT抗体与CA125抗体抗原复合体的光学纹理做比较，其结果中SSAT抗体与CA125抗原的混合溶液其光学纹理的亮度平均为7.6±1.3（arbitraryunits），而CA125抗体抗原复合体其光学纹理的亮度平均为57±6.7，代表专一结合的CA125抗体抗原复合体可产生较无法结合的SSAT抗体与CA125抗原更高的光学讯号。此外，SSAT抗体的光学纹理平均强度为28.0±6.9，与CA125抗原作用后光学纹理亮度下降为7.6±1.3，代表此结果并不是因为SSAT抗体原本的光学纹理亮度较弱所导致，而是因为SSAT抗体无法与CA125抗原产生复合体，所以蛋白质彼此之间无法克服水化层的静电斥力而均匀分散于玻璃基板表面，且因为CA125抗原的光学纹理强度较SSAT抗体弱，导致等体积混合时反而光学纹理强度较SSAT抗体来的弱。

3 总 结

研究中，同一浓度与种类的蛋白质光学纹理亮度的标准偏差偏高，显示检测结果的再现性与稳定性仍有待提升，且期待后人能持续改进液晶免疫侦测技术，例如：借着抗体与抗原混合后会生成抗体抗原复合体而使的光学纹理增加的现象，再由其增加的速度曲线来判定溶液中含有的欲测抗原的浓度，进而达到量化且多重检测的目标，并应用于人体血清的检测。

[1] 磁珠法在抗酸杆菌快速检测中可行性的研究[J].唐淼龙.中国实验诊断学.2013(10).

[2] 卵巢癌血清CA125临界值探讨[J].李秋红,黄 卉.重庆医学.2003(07).

[3] 肿瘤标志物的研究与临床应用评价[J].范振符,陈智周.标记免疫分析与临床.2002(02).