血清结缔组织生长因子、25-羟维生素D、脂联素检测在2 型糖尿病视网膜病变诊断及病情评价中的价值

2017-03-31张冬艳马鸿雁苏军燕徐长妍

中国实验诊断学 2017年3期

关键词：脂联素生长因子视网膜

张冬艳,马鸿雁,苏军燕,徐长妍

(吉林大学第一医院 1.眼科；2.肾病内科；3.小儿肿瘤科；4.医务部，吉林长春130021)

*通讯作者

血清结缔组织生长因子、25-羟维生素D、脂联素检测在2 型糖尿病视网膜病变诊断及病情评价中的价值

张冬艳1,马鸿雁2,苏军燕3,徐长妍4*

(吉林大学第一医院 1.眼科；2.肾病内科；3.小儿肿瘤科；4.医务部，吉林长春130021)

糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病的重要致残性并发症之一，根据相关统计数据，DR已成为导致西方国家劳动年龄人群视力丧失和全球成人不可逆性盲的主要原因[1]。DR的主要病变为视网膜局部的微血管病变和神经元功能损害，其发病机制十分复杂，血管增生、炎症损害、神经损害等多种机制均在DR的发生和发展中扮演着重要的角色[2]。虽然近年来国内外学者针对DR的分子机制进行了大量研究，但迄今为止临床上仍然缺乏对进展性DR的有效治疗方案，因此，针对DR进行早期诊断和早期治疗是控制DR病情、改善患者预后的关键环节[3]。目前，临床对于DR主要诊断方法包括检眼镜检查法、视觉诱发电位检测法、眼底荧光血管造影等，但这些诊断方法均难以单独满足DR的高危人群筛查、早期诊断和病情评价需要[4]，检测和分析DR相关血清学标志物水平用于相关诊断和治疗已成为近年来的研究热点，本研究针对血清结缔组织生长因子(CTGF)、25-羟维生素D(25-OH-VitD)、脂联素(APN)检测在2 型糖尿病(T2DM)视网膜病变诊断及病情评价中的价值进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2015年7月至2016年7月在医院就诊且接受眼底摄片检查的316例T2DM患者作为研究对象，纳入患者均符合世界卫生组织(WHO)制订的T2DM诊断标准，年龄均小于70岁，排除合并有重要器官功能不全、恶性肿瘤、血液系统疾病、自身免疫病、眼外伤及感染的患者，排除入组前半年内发生过糖尿病急性并发症或应用维生素D制剂的患者。根据2000 年全国眼科学术大会制订的DR诊断和分期标准将纳入患者分为无视网膜病变组(NDR组)、轻度和中度非增殖期视网膜病变组(DR1组)、增殖期和重度非增殖期视网膜病变组(DR2组)，在NDR组中，共纳入175例患者，男性93例，女性82例，平均年龄(59.6±5.3)岁，在DR1组中，共纳入96例患者，男性51例，女性45例，平均年龄(59.9±6.4)岁，在DR2组中，共纳入45例患者，男性24例，女性21例，平均年龄(60.8±5.8)岁，3组患者在年龄、性别构成等方面的差异均无统计学意义(P>0.05)。所有纳入患者均对本研究知情并签署知情同意书，本研究方案经我院医学伦理委员会批准通过。

1.2 观察指标和检测方法

采集3组患者的清晨空腹外周静脉血样本，常温下以3000 r/min的速度离心分离血清，应用全血自动生化仪对血清样本中的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG)水平进行检测，应用高效液相色谱法对血清样本中的糖化血红蛋白(HbAlc)水平进行检测，应用电化学发光法对血清样本中的25-OH-VitD水平进行检测，应用酶联免疫吸附法(ELISA法)对血清样本中的CTGF、APN水平进行检测。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0统计软件进行统计学分析，计量资料采用(均数±标准差)的形式表示，多组之间比较应用单因素方差分析进行处理，两两比较应用最小显著差法(LSD法)进行处理，各观察指标与DR等级之间的相关性应用Spearman 等级相关分析进行处理，多因素分析采用非条件Logistic多元回归分析，以上统计学检验均以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组患者各项观察指标水平的比较

3组患者TG、TC、HDL-C、LDL-C水平的差异均无统计学意义(P>0.05)，而其它指标的差异均有统计学意义(P<0.05)，随着视网膜病变的加剧，患者的PBG、HbAlc、CTGF水平逐渐上升，25-OH-VitD、APN水平逐渐下降，各组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 3组患者各项观察指标水平的比较

注：a：与NDR组比较，P<0.05；b：与DR1组比较，P<0.05

2.2 各项观察指标与DR病变程度的相关性分析

Spearman等级相关分析结果显示，患者的HbAlc、CTGF水平与DR病变程度呈正相关关系(P<0.05)，而25-OH-VitD、APN水平与DR病变程度呈负相关关系(P<0.05)，见表2。

表2 各项观察指标与DR病变程度的相关性分析

2.3 影响DR病变程度的多相关因素分析

Logistic多元回归分析结果显示，患者的HbAlc、CTGF、25-OH-VitD、APN水平均与DR病变程度具有独立相关性(P<0.05)，其中，HbAlc、CTGF是危险因素，而25-OH-VitD、APN则是保护因素，见表3。

表3 影响DR病变程度的多相关因素分析

3 讨论

本研究结果显示，随着DR的发生和进展，患者的血清CTGF水平逐渐上升，25-OH-VitD、APN水平逐渐下降，这体现了这三种血清因子的异常表达可能参与了DR的发生和进展过程。学术界的普遍观点认为，DR的进展机制主要是视网膜新生血管形成和纤维组织增生，导致反复玻璃体积血和牵拉性视网膜脱离等并发症，最终引发视功能损害。在此过程中，有多种细胞因子参与调控，特别是CTGF具有特殊的四模块结构，拥有多种细胞因子特异结合位点，可调控多种重要细胞因子通路的表达，可发挥促进新生血管形成和纤维化的双重作用，并且参与增生膜的形成，其调控机制主要包括对下游细胞因子基因表达的调控和与其他细胞因子或受体结合[5-6]。在近年来的临床研究中，韩改玲[7]、王劲松[8]、衡欣等[9]的研究均证实了T2DM患者的血清CTGF水平与DR的发生和进展具有密切的相关性。在邢玉微等[10]的研究中，研究者针对DR大鼠模型的视网膜组织中CTGFmRNA表达水平进行了分析，结果显示，在实验的第6、12周DR大鼠模型视网膜组织中CTGFmRNA表达水平明显上升，而血栓通等药物治疗可下调CTGF mRNA的表达水平从而控制DR进展。肖津安等[11]的研究结果显示，针对早期DR大鼠模型给予玻璃体腔注射抑制血管生成药能够降低动物模型房水中的CTGF水平。在曾京等[12]的研究报道中，研究者针对双靶点干预对DR大鼠模型视网膜组织中CTGFmRNA表达水平的影响进行了研究，同样获得了积极的治疗效果[12]。总之，CTGF已经被作为与DR进展高度相关的重要标志物应用于临床研究，并取得了较多的研究成果。

本研究结果显示，与CTGF、HbAlc等危险因素不同，25-OH-VitD、APN两个血清指标是降低DR发病和进展风险的保护因素。维生素D(VitD)是一种脂溶性维生素，传统的观点认为VitD家族主要是参与机体的钙磷代谢并在骨质形成中发挥作用，但随着研究的不断深入，研究者发现维生素D还参与了炎性反应、免疫调节、糖脂代谢等多种生理活动，发挥着激素样物质的作用[13]。在近年来的研究中，程晨等[14]、韩改玲[15]、吴萍等[16]的研究均证实了随着DR的发生和进展，患者的血清25-OH-VitD会逐渐下降，其下降幅度与DR的病变程度具有相关性。在侯丽君等[17]的研究中，研究者还发现了中国汉族人群中存在维生素D受体基因Fok I多态性，而其中f等位基因频率的差异可能是中国汉族糖尿病患者易于发生DR的遗传性因素。李丹丹[18]的研究结果显示，T2DM患者的肾素血管紧张素水平与其25-OH-VitD水平呈负相关，补充活性VitD可降低并发DR的T2DM患者的肾素血管紧张素水平，从而降低其全身微血管并发症的风险，这一研究结果提示了VitD水平的变化可能通过肾素血管紧张素系统来对DR的发生和进展发挥作用。APN是一种机体内存在的脂肪细胞因子，近几年的研究提示了APN可能在DR的发生和发展中也发挥着重要的作用[19]。黎丹凤等[20]、王颖等[21]的研究均证实了外周血APN水平是T2DM患者并发DR的独立危险因子，而且APN水平减低的幅度与病情严重程度呈负相关。张媛等[22]针对血清高分子量APN、总APN及两者比值与T2D患者并发DR关系的研究结果显示，较低浓度的血清总APN和高分子量APN水平可能参与了非增殖性DR的发生，而总APN可能与DR病变的严重程度有关。蔺涛[23]的研究证实，APN及其受体在DR小鼠视网膜、脉络膜中均呈现阳性表达，DR小鼠模型视网膜组织中APN及其受体表达水平均出现了显著上升[23]。关于APN低表达在DR发生和进展中的机制研究并不多，李晓红等[24]的研究结果显示，DR患者的APN水平与其胰岛素抵抗指数具有负相关关系，李园等[25]的研究则证实了DR患者的APN低表达可能与转化生长因子-β1及细胞间粘附分子表达水平具有相关性。代艳等[26]针对DR大鼠模型的研究结果显示，APN可下调糖尿病大鼠视网膜中的一氧化氮合酶水平，通过减少一氧化氮在视网膜中的生成来减轻视网膜血管内皮细胞的损害。虽然相关研究取得了一定进展，但APN降低DR发生和进展风险的机制研究还有待于进一步深入。

综上所述，T2DM合并DR患者表现为血清CTGF水平的升高和25-OH-VitD、APN水平的降低，且这些血清因子的变化幅度与DR的病情严重程度具有相关性，可作为DR早期诊断和病情评价的辅助指标。

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