妊娠期糖尿病患者循环血液中β细胞营养因子水平变化的研究

牟秦巍

(宝鸡市妇幼保健院 产科,陕西 宝鸡721000)

妊娠期糖尿病患者循环血液中β细胞营养因子水平变化的研究

牟秦巍

(宝鸡市妇幼保健院 产科,陕西 宝鸡721000)

目的 研究妊娠期糖尿病患者循环血液中β细胞营养因子(Betatrophin)水平的变化。方法 选取2013年1年至2014年12月收治的38例妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus，GDM)患者为研究对象，同期选择葡萄糖耐受正常(normal glucose tolerance，NGT)的孕妇38例及健康正常妇女(control)38例作为对照研究对象。酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆中betatrophin浓度，放射免疫法(RIA)进一步验证血浆中betatrophin浓度。结果 经RIA验证的ELISA结果显示，GDM组血浆中betatrophin浓度(29.24±7.41 ng/ml)显著高于NGT组(18.12±4.73 ng/ml)和control组(0.47±0.15 ng/ml)，差异具有显著的统计学意义(P<0.001)。betatrophin与BMI和胰岛素抵抗无显著相关性。此外，Betatrophin浓度与孕期脂质参数包括TG和TC以及雌激素和孕激素呈显著相关。结论 妊娠期糖尿病患者循环血液中betatrophin浓度显著高于NGT和正常孕妇，其可能作为妊娠期糖尿病患者血脂和血糖代谢异常的一个重要指标。

妊娠期糖尿病；β细胞营养因子；胰岛素抵抗

(ChinJLabDiagn,2017,21:0444)

妊娠期糖尿病(GDM)是一种常见的妊娠期并发症，其发病率约为8%[1]。GDM能够增加孕妇罹患2型糖尿病、代谢综合征以及心血管疾病的风险[2]。β细胞营养因子(Betatrophin)又称lipasin，是最近发现的一种激素，主要由肝脏和脂肪组织合成，其在胰岛素抵抗的小鼠体内表达量明显升高，而且在过表达时明显的促进胰岛β细胞的增殖和改善糖耐量[3]。Betatrophin对于调节肥胖和糖尿病的作用在最近的一些研究结果存在一定的矛盾[4,5]。本研究初步探讨了GDM患者循环血液中Betatrophin水平的改变。

1 资料与方法

1.1 资料来源 选取2013年1年至2014年12月我院收治的38例GDM患者为研究对象(GDM组)，同期选择NGT的孕妇38例(NGT组)及健康正常妇女38例作为对照研究对象(control组)。GDM组患者平均年龄30.95±5.15岁，平均孕期29.95±3.32周；NGT组患者平均年龄31.53±4.23岁，平均孕期29.31±3.16周；control组平均年龄24.4±7.4岁。GDM组和NGT组孕妇在年龄及孕期上无显著性差异，具有可比性。

1.2 纳入及排除标准 纳入研究的GDM孕妇均为孕期诊断为GDM的患者，诊断标准：空腹12 h后口服75 g葡萄糖耐量实验，空腹>5.6 mmol/L，1 h>10.3 mmol/L，2 h>8.6 mmol/L，出现以上三项中的两项即诊断为GDM。相应的NGT组孕妇则三项均为正常。Control组则为血糖正常健康妇女，且无GDM病史。排除糖耐量实验三项指标中一项高于正常值的孕妇，排除并发全身实质器官疾病的孕妇，排除自身免疫性疾病孕妇。所有纳入研究的对象均在研究开始前告知其研究方法和目的，并在家属同意下签署知情同意书。本研究获得本院伦理委员会批准。

1.3 研究方法与检测指标 每个受试对象采集次日空腹外周血液7 ml，分离血浆后置冰箱中备用。采用Betatrophin ELISA试剂盒(北京康肽生物科技有限公司，EK-051-60)对所有样本血浆中Betatrophin浓度进行检测，方法参照文献[6]和试剂盒说明书进行。同时采用betatrophin RIA试剂盒(Phoenix Pharmaceuticals,Inc,RK-051-60)对所有样品血浆中betatrophin浓度进行检测，方法参照文献[6]和试剂盒说明书进行，以验证ELISA结果。

1.4 统计学分析 所有数据均采用SPSS20.0进行分析，计量资料以均数±标准差表示，组间变量比较采用单因素分析后行t检验，连续变量之间的相关性分析采用Pearson’s分析。P<0.05为具有统计学意义。

2 结果

2.1 GDM组孕妇及NGT组孕妇和control组健康妇女临床资料的比较 三组研究对象的临床资料比较见表1。

表1 三组研究对象的临床资料比较

注：HOMA-IR：胰岛素抵抗指数； HOMA-β：胰岛素分泌指数。NA：not available

2.2 循环血液中ELSIA和RIA检测Betatrophin浓度数据的相关性分析 ELSIA和RIA检测三组妇女循环血液中Betatrophin的浓度后对数据进行相关性分析结果见图1。尽管RIA结果显著低于ELSIA结果，但两种检测的相对差异性仍然相似，两组数据的相关分析显示r=0.76，P<0.001，这表明二者变化彼此显著相关。

2.3 GDM组孕妇及NGT组孕妇和control组健康妇女循环血液中Betatrophin的浓度比较 ELSIA检测GDM组孕妇及NGT组孕妇和control组健康妇女循环血液中Betatrophin浓度的结果见表2。结果显示，GDM组和NGT组循环血液中Betatrophin浓度均显著高于control组，差异具有显著统计学意义(P<0.001)，而GDM组则显著高于NGT组，差异显著(P<0.001)。

图1 Betatrophin ELISA和Betatrophin RIA数据之间相关性分析，Pearsons r=0.760,P<0.001

表2 GDM组孕妇及NGT组孕妇和control组健康妇女循环血液中Betatrophin的浓度比较

nBetatrophin(pg/ml)control380.47±0.15NGT3818.12±4.73*GDM3829.24±7.41*#

注：*：与control组比P<0.001；#：与NGT组比P<0.001

2.4 循环血液中betatrophin与血糖稳态参数之间的相关性分析 见表3。研究结果显示，Betatrophin既与胰岛素和C-肽浓度无关，也与HOMA-IR，HOMA-β 和 BMI无关。在NGT组中，Betatrophin与空腹血糖呈弱负相关关系，而与HbA1c呈弱正相关关系。Betatrophin浓度在GDM组和NGT组与甘油三酯(TC)和总胆固醇(TG)显著正相关，而与LDL-c、HDL-c则无明显相关性。

表3 循环血液中betatrophin与血糖稳态参数之间的相关性分析

注：*P<0.05,**P<0.01

3 讨论

在本研究中，孕妇循环血液中betatrophin浓度明显较正常妇女升高，而且值得注意的是，循环血液中betatrophin浓度在GDM的女性进一步升高。然而，除了NGT组孕妇的空腹血糖与betatrophin的浓度有一定关系外，没有发现其另外两组研究对象的血糖稳态参数与betatrophin浓度之间存在关联性[5,7]。而我们的数据使得我们推测，孕期betatrophin浓度的升高可能与胰腺β细胞变化有关。这与最近的一项横向比较研究结果形成对比，该研究显示，在GDM孕妇患者，其betatrophin浓度与空腹血糖和HOMA-IR呈正相关，而与HOMA-β呈负相关[8]。在相关分析中发现，C-peptide的水平与betatrophin浓度时呈负相关，这与Tokumoto等在非受孕妇女的研究中的结果一致[8,9]。然而，我们的研究数据显示，HOMA-β与betatrophin浓度无显著的相关性。

瘦素在GDM组呈现出较高的水平，表明在GDM的孕妇存在瘦素抵抗状态，这与前面的研究是一致[10]。最近的一项前瞻性荟萃分析研究显示，高浓度的瘦素是孕妇后期发展成为GDM的危险因素之一[11]。GDM孕妇患者瘦素的升高也反映出机体脂肪存储量的增加，然而我们的研究却发现，betatrophin浓度与BIM之间没有明显的相关性，虽然我们的相关分析也显示瘦素与betatrophin之间没有直接的关联性，但是我们观察到的瘦素在GDM组的高浓度可能与betatrophin之间存在另外一个变量将两者关联起来，从而能够解释GDM组高betatrophin浓度和高瘦素水平。孕期脂质代谢发生重大改变的主要原因是由于脂肪组织的积累后导致脂解增加和高脂血症造成的，这种生理性的高脂高胆固醇血症被归因于孕激素和雌激素的作用[12]，而孕激素在怀孕期间是较正常增加了三十倍，雌激素则是增加了十倍。研究表明，孕激素能提高LDL-c和TG的水平，降低HDL-c的水平，而雌激素则具有相反的作用[13]。我们分析GDM组和NGT组betatrophin与脂质之间的关系显示，betatrophin与循环血液中TC、TG明显相关，而与LDL-c、HDL-c则无显著的关系。值得注意的是，雌激素和孕激素的水平与betatrophin也明显相关，这提示怀孕期间雌激素和孕激素水平的升高可能对betatrophin的产生具有正调节作用，但是其具体作用机制尚需进一步深入的研究。

尽管我们发现在孕妇循环血液中betatrophin的浓度明显升高，且可能与孕期的血脂和血糖代谢有关，但是本研究还存在一定的局限性，即本研究的样本量比较小。另一方面，研究面对的患者是特殊的群体，存在个体差异，这也导致部分临床数据可能存在较大的差异，要进一步深入的分析GDM孕妇患者循环血液中betatrophin与血脂血糖代谢之间的关联，需要更大的研究样本量。

[1]Metzger BE,Buchanan TA,Coustan DR,et al.Summary and recommendations of the Fifth International Workshop-Conference on Gestational[J].Diabetes Mellitus，2007，30(Suppl 2):251.

[2]Harreiter J,Dovjak G,Kautzky-Willer A.Gestational diabetes mellitus and cardiovascular risk after pregnancy[J].Women's health，2014，10(1):91.

[3]Zhang R.Lipasin,a novel nutritionally-regulated liver-enriched factor that regulates serum triglyceride levels[J].Biochemical and biophysical research communications，2012，424(4):786.

[4]Gomez-Ambrosi J,Pascual E,Catalan V,et al.Circulating betatrophin concentrations are decreased in human obesity and type 2 diabetes[J].The Journal of clinical endocrinology and metabolism,2014,99(10):2004.

[5]Fenzl A,Itariu BK,Kosi L,et al.Circulating betatrophin correlates with atherogenic lipid profiles but not with glucose and insulin levels in insulin-resistant individuals[J].Diabetologia,2014,57(6):1204.

[6]Wang Y,Quagliarini F,Gusarova V,et al.Mice lacking ANGPTL8 (Betatrophin) manifest disrupted triglyceride metabolism without impaired glucose homeostasis[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2013，110(40):16109.

[7]Ebert T,Kralisch S,Wurst U,et al.Betatrophin levels are increased in women with gestational diabetes mellitus compared to healthy pregnant controls[J].European journal of endocrinology，2015，173(1):1.

[8]Yilmaz H,Cakmak M,Darcin T,et al.Elevated Plasma Levels of Betatrophin in Women with Gestational Diabetes Mellitus[J].Experimental and clinical endocrinology & diabetes,2015,123(6):376.

[9]Tokumoto S,Hamamoto Y,Fujimoto K,et al.Correlation of circulating betatrophin concentrations with insulin secretion capacity,evaluated by glucagon stimulation tests[J].Diabetic medicine,2015,32(5):653.

[10]Zhang Y,Scarpace PJ.The role of leptin in leptin resistance and obesity[J].Physiology & behavior,2006,88(3):249.

[11]Bao W,Baecker A,Song Y,et al.Adipokine levels during the first or early second trimester of pregnancy and subsequent risk of gestational diabetes mellitus:A systematic review[J].Metabolism:clinical and experimental,2015,64(6):756.

[12]Mankuta D,Elami-Suzin M,Elhayani A,et al.Lipid profile in consecutive pregnancies[J].Lipids in health and disease,2010,9:58.

[13]Harville EW,Viikari JS,Raitakari OT.Preconception cardiovascular risk factors and pregnancy outcome[J].Epidemiology,2011,22(5):724.

Altering of circulating betatrophin in Pregnancy and Gestational Diabetes Mellitus

MOUQin-wei.

(DepartmentofObstetrics,MaternityandChildHealthCareHospitalofBaojiCity,Baoji721000,China)

Objective To investigate the altering of circulating betatrophin in Pregnancy and Gestational Diabetes Mellitus.Methods Circulating betatrophin was quantified in 38 women with GDM and 38 pregnant body mass index-matched women with normal glucose tolerance (NGT) as well as 38 healthy agematched non-pregnant women by enzyme-linked immunosorbent assay during January 2013 to December 2014.Additionally we performed radioimmunassay (RIA) to confirm the results.Results Betatrophin concentrations measured by ELISA were significantly higher in GDM than in NGT and control (29.24±7.41ng/ml vs 18.12±4.73 ng/ml,P<0.001,29.24±7.41 ng/ml vs 0.47±0.15 ng/ml,P<0.001),and also higher in NGT than control (18.12±4.73 ng/ml vs0.47±0.15 ng/ml,P<0.001)which was confirmed by RIA.Betatrophin did not correlate with BMI or insulin resistance in all women.Moreover it correlated significantly with lipid parameters including triglycerides and total cholesterol in pregnancy,as well as estrogen,progesterone.Conclusion Circulating betatrophin concentrations are dramatically increased in pregnancy and are significantly higher in GDM versus pregnant NGT,and betatrophin may represent a novel endocrine regulator of lipid alterations in pregnancy.

Gestational diabetes mellitus;betatrophin;insulin resistance

1007-4287(2017)03-0444-04

R714.2

A

2016-03-22)