子宫内膜癌中P53、Ki-67和CA125的表达

周竞奇

(济源市人民医院，河南 济源 459000)

子宫内膜癌中P53、Ki-67和CA125的表达

周竞奇

(济源市人民医院，河南 济源 459000)

目的 探讨子宫内膜癌组织中P53、Ki-67和血清中CA125的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化染色检测35例子宫内膜癌(试验组)和30例子宫内膜增生(对照组)组织中P53和Ki-67蛋白表达情况，并采用放射免疫法测定2组患者血清中CA125水平。结果 P53蛋白在试验组有22例呈阳性表达，Ki-67蛋白有24例呈阳性表达，且两者在对照组均呈阴性表达(P<0.05)。血清CA125水平在试验组为(32.19±12.35) u·L-1，高于对照组的(8.23±2.58)u·L-1(P<0.05)。结论 P53、Ki-67和CA125在子宫内膜癌的发生、发展中起着重要的作用，三者联合检测不但可以指导临床治疗，同时也可用于观察疗效和判断预后。

子宫内膜癌；P53；CA125；Ki-67；免疫组化染色

子宫内膜癌发病率占女性恶性肿瘤的7%，是常见的妇科肿恶性肿瘤。近年来，全球子宫内膜癌发病率不断上升，已超过了宫颈癌的发病率，位居妇科恶性肿瘤的第2位，且呈现年轻化趋势[1]。临床上多数患者就诊时其病变尚局限于子宫内，所以预后尚可，5 a总体生存率较高，约84%，但疾病一旦进展进入晚期，则预后不良，特别是处于Ⅱ～Ⅲ期的患者，5 a生存率显著下降，约为50%[2]。因子宫内膜癌临床治愈率改善不明显，目前仍有约20%的患者复发且预后不良。如何高效选择典型病例，准确、全面判断预后，从而尽早制定出有价值的治疗方案一直是临床专家们的研究热点。肿瘤的发生、发展是多因素、多基因共同作用的复杂过程[3]。p53基因发生突变时，则会演变成为促癌基因，并与肿瘤的远处转移有关[4]。Ki-67是一种与细胞增殖密切相关的细胞核抗原，可以反映肿瘤细胞增殖活性的指标[5]。CA125被广泛应用于人类各种肿瘤的研究中，如子宫内膜癌、乳腺癌等。本研究采用免疫组化检测子宫内膜癌患者组织中P53、Ki-67的表达情况，用放射免疫法检测其血清CA125水平，探讨三者检测在子宫内膜癌中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2014年10月至2015年4月在我院接受治疗的子宫内膜癌患者35例为试验组，年龄48～62岁，根据分段诊刮病理检查已确诊为子宫内膜癌。另选同期住院的子宫内膜增生患者30例为对照组，年龄42～58岁，且已经分段诊刮病理检查确诊。2组患者间年龄、职业、学历、生活习惯比较差异无统计学意义(P>0.05)。所有患者肝、肾功能正常，无心脑血管疾病、无糖尿病、无烟酒史，且近4个月内未服用过激素类药物。

1.2 检测方法 采用免疫组化染色的方法检测子宫内膜癌组织和子宫内膜增生组织中P53、Ki-67的表达情况。选取2组患者的空腹肘静脉血3 mL，离心后置于-40 ℃冰箱保存备用，采用放射免疫法测定患者血清CA125水平。

1.3 结果判定 P53、Ki-67阳性染色为棕黄色颗粒，均定位于肿瘤细胞核。将染色强度分为5个等级，(-)：未见阳性染色细胞；(+)：阳性染色细胞<10%或有轻度核淡染；(++)：10%～<30%细胞染色阳性；(+++)：30%～<70%细胞染色阳性；(++++)：70%～100%细胞染色阳性。

2 结果

2.1 2组P53表达比较 试验组患者P53的阳性表达率为62.9%，共22例染色为阳性，其中5例为(+)、10例为(++)、3例为(+++)、4例为(++++)；对照组阳性表达率为0.0%，未见阳性表达病例，2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 2组P53表达比较 n(%)

2.2 2组Ki-67表达比较 试验组患者Ki-67的阳性表达率为68.6%，共24例染色为阳性，其中6例为(+)、12例为(++)、3例为(+++)、3例为(++++)；对照组阳性表达率为0.0%，未见阳性表达病例，2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 2组Ki-67表达比较 n(%)

2.3 2组CA125水平比较 血清CA125水平在试验组为(32.19±12.35)u·L-1，对照组为(8.23±2.58)u·L-1，比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 2组CA125水平比较 u·L-1

3 讨论

3.1 P53蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其意义 1979年Linzer等[6]在研究DNA病毒SV40转染的哺乳动物细胞时，发现了一种抑癌基因P53，其与SV40大T抗原结合。由于新发现的蛋白相对分子质量为53 000，因此命名为P53。在人体内P53基因全长20 kb，包含10个内含子和11个外显子，位于17p13，可转录2.2～2.5 kb的mRNA[7]。P53分为野生和突变型，正常生理情况下，P53以野生型存在，是细胞生长的“监控器”，可以防止细胞发生癌变，维持低水平状态，不发挥作用。多数情况下P53基因突变后会演变成为促癌基因，失去正常抑癌基因的生物学功能，丧失了抑癌活性，其突变发生部位为中央核心区域的突变热点处[8]。研究发现在多数Ⅱ型子宫内膜癌中，P53出现过量表达，因此，可以将P53作为Ⅱ型子宫内膜癌的标志物[9]。但在Ⅰ型子宫内膜癌中，也出现了P53的阳性表达。有研究显示，Ⅲ级Ⅰ型子宫内膜癌患者P53的阳性表达率25%～69%，而低级别Ⅰ型子宫内膜癌患P53的阳性表达率为14%～25%[10]。P53蛋白可以抑制恶性肿瘤的发生、发展，因此P53蛋白失活在恶性肿瘤的发生、发展过程中起着重要的作用。约50%的人类肿瘤中，存在有P53基因的突变，P53突变会造成严重的后果，引起细胞无限性增殖，当细胞暴露于不利环境条件下时，包括DNA损伤，P53能通过2条途径发挥肿瘤抑制作用：诱导细胞的衰老凋亡和导致细胞周期阻滞[11]。另外P53可调控细胞的黏着、细胞活动性、失巢凋亡等有关的基因的转录，发挥其抑制肿瘤转移的作用，因此，P53在肿瘤的转移中也发挥着关键性的作用[12]。在子宫内膜癌患者中，P53基因的过度表达和突变是患者预后不良的最重要因素，且与患者的生存期长短有直接关系[13]。本研究中，对照组中未检测到P53蛋白，说明良性增生组织中不存在P53基因突变，而试验组P53阳性表达率为62.9%，其中7例强阳性染色标本中有5例为子宫内膜癌Ⅲ期或以上，说明P53蛋白的阳性表达与肿瘤预后有密切关系。

3.2 Ki-67蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其意义 1983年Gerdes等[14]在研究霍奇金淋巴瘤细胞系L428细胞的粗核成分免疫鼠时，首次成功研制出该抗体，由并命名为Ki-67。Ki-67抗体属IgG家族，是一种单克隆抗体。体内Ki-67的过量表达与多种恶性肿瘤的生物学行为有着密切的相关性。目前关于子宫内膜癌病理特征与Ki-67的相关性的研究较多，但是缺乏统一性，多数研究显示Ki-67和子宫内膜癌的分期、组织类型、分级及浸润程度、预后有关[15]。但也有部分研究显示Ki-67与子宫内膜癌的分期、浸润深度、转移、组织分级及复发没有确切的相关性[16]。在细胞周期中，Ki-67的表达不断发生变化，因此，Ki-67的表达是一个复杂的调节过程。Ki-67只表达于增生细胞中，而在静止细胞中是不表达的[17]。在G0和G1早期细胞不表达Ki-67，最早表达于G1中晚期，发展至S期和G2期时，逐渐增高。由于半衰期短，因此有丝分裂结束后Ki-67开始降解[18]。据报道，由于Ki-67与人体多种恶性肿瘤的发生、发展、转移及预后有着很大的相关性，因此，Ki-67阳性表达率的高低不仅可以用来鉴别肿瘤的良恶性，还可以用来判断肿瘤的侵袭力强弱[19]。Ki-67因其半衰期短，且能够准确反映细胞的增殖活性，故目前被广泛用于肿瘤的生物学行为研究中。Ki-67在分泌期子宫内膜、子宫内膜单纯增生、非典型增生、子宫内膜癌组织中阳性表达率呈现逐渐增加的趋势，分别为2.6%、17%、42%和60%[20]。目前，WHO已经将Ki-67指数作为各种恶性肿瘤的辅助检查手段，但是由于免疫组化中没有统一标准计数Ki-67，因此，用免疫组化的方法检测Ki-67来诊断不同子宫内膜病变，虽然能够有效提高诊断准确率，但是，仍需后期的不断实验性研究和临床大样本试验证实。本研究中，对照组中未检测到Ki-67蛋白，说明良性增生组织中不存在Ki-67蛋白，而试验组Ki-67蛋白阳性表达率为68.6%，说明Ki-67蛋白的阳性表达与肿瘤预后有密切关系。

3.3 血清CA125水平在子宫内膜癌中的表达及其意义 CA125分布广泛，正常情况下，在子宫内膜、输卵管、腹膜及其良性病变和恶性肿瘤中均有微量表达，CA125含有N-乙酰氨基葡萄糖、半乳糖及N-乙酰氨基半乳糖链[21]。CA125是一组高分子糖蛋白，胚胎发育中主要存在于体腔上皮细胞中，成体其表达于体腔上皮分化而来的各种组织器官中，如子宫、腹膜及蜕膜组织等[22]。目前关于子宫内膜癌组织中CA125的表达及其临床意义研究报道甚少。曾有相关研究指出，子宫内膜癌患者的血清CA125水平与其临床分期、病理类型及其转移有关，如果血清CA125水平<32 IU·mL-1，90%的患者可判定为临床早期，此时可考虑手术治疗；但是如血清CA125水平>100 IU·mL-1，则表明89%的患者已经出现宫外转移[23]。本研究中，血清CA125水平在对照组为(8.23±2.58)u·L-1，而试验组则显著升高，为(32.19±12.35)u·L-1，比较差异有统计学意义(P<0.05)。因此，CA125与子宫内膜癌发生、发展、转移、临床分期等有密切相关性，对估计预后也有一定的临床借鉴价值。

在子宫内膜癌发生的早期，用免疫组化检测P53蛋白有利于鉴别子宫内膜癌类型，有助于判断子宫内膜的病变程度。Ki-67可以反映细胞的增殖能力及活性，其表达与子宫内膜组织分化程度等相关。血清CA125水平可以有效判断子宫内膜癌的预后，在子宫内膜癌病变早期，联合检测组织P53、Ki-67及其血清CA125水平能够判断肿瘤的分化程度和肿瘤的侵袭力等生物学行为，同时为估计预后提供一定的借鉴价值。

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Expressions of P53,Ki-67 in the Tissues and CA125 in the Serum of Patients with Endometrial Carcinoma

ZHOU Jingqi

(JiyuanCityPeople’sHospital,Jiyuan459000,China)

Objective To investigate the expressions of P53,Ki-67 in the tissues and CA125 in the serum of patients with endometrial carcinoma and the clinical significance.Methods Immumohistochemical staining was used to detect P53 and Ki-67 protein in the 35 patients with endometrial cancer (the experimental group) and 30 patients with endometrial hyperplasia (the control group),the serum CA125 levels were detected by radioimmunoassay in the two groups.Results In the experimental group,P53 protein was positive of 22 patients,Ki-67 protein was positive of 24 patients,and both showed negative in the control group (P<0.05).Serum CA125 levels in the experimental group was (32.19±12.35) u·L-1,and was (8.23±2.58) u·L-1in the control group (P<0.05).Conclusion P53,Ki-67 and CA125 play an important role in the development of endometrial carcinoma,their combination detection not only guides the clinical comprehensive treatment,but also becomes the effective efficacy and prognostic indicator.

endometrial carcinoma;P53;CA125; Ki-67;immumohistochemical staining

周竞奇(1975-)，女，副主任医师，主要从事病理诊断工作。E-mail:zjq8308@126.com

10.3969/j.issn.1673-5412.2017.01.006

R737.33；R730.23

A

1673-5412(2017)01-0023-04

2016-05-12)