温针治疗佐剂性关节炎大鼠经穴特异性及与肥大细胞的功能关系

荆翼,张迪



温针治疗佐剂性关节炎大鼠经穴特异性及与肥大细胞的功能关系

荆翼1,张迪2

(1.复旦大学,上海 200433;2.上海市针灸机制与穴位功能重点实验室,上海 201203)

目的 观察温针的镇痛效应并探讨其与穴区肥大细胞的功能关系、穴位特异性。方法 SD大鼠60只,随机分为空白组(C)、模型组(M)、足三里温针组(Z)、对侧温针组(O)、手针组(A)、伏兔温针组(F)、阳陵泉温针组(Y)、委中温针组(W)、色甘酸钠(Disodium cromoglycate)＋温针组(DSCG＋Z)、生理盐水＋温针组(Saline＋Z)。以佐剂型关节炎大鼠为炎性反应痛模型(AA模型),在体观察温针足三里、阳陵泉、伏兔、委中过程中大鼠的缩爪反射潜伏期;并通过穴位组织切片染色,离体对照治疗前后穴位处局部肥大细胞脱颗粒率的变化,以及穴区注射色甘酸钠对其的影响。结果 温针后穴区肥大细胞脱颗粒现象明显(＜0.05),温针镇痛的效果要优于手针治疗(＜0.05),足三里温针组经治疗后的痛阈均显著高于伏兔温针组、阳陵泉温针组和委中温针组(＜0.05),针刺引起的肥大细胞脱颗粒现象能被色甘酸钠显著阻断(＜0.05)。结论 温针佐剂性关节炎大鼠足三里穴可产生镇痛效应,其镇痛效果优于手针组,且穴区处的肥大细胞脱颗粒率高于手针组,使用肥大细胞膜稳定剂色甘酸钠预处理后,温针的镇痛效应减弱。对于AA模型,温针足三里穴的镇痛效果优于阳陵泉、伏兔、委中穴。

针灸疗法;温针疗法;生物效应;肥大细胞;镇痛效应;脱颗粒;大鼠

针刺疗法是一种有效的镇痛手段,从上世纪70年代开始被国内外广泛接受,并应用于临床[1-2]。温针灸是治疗腰腿疼痛的常用疗法,在毫针针刺后,于针尾加置艾炷,点燃后使其热力通过针身传至体内,始见于东汉时张仲景的《伤寒论》。临床研究发现,温针灸能有效治疗类风湿关节炎等痹证[3-4],对膝骨关节炎引起的活动痛和关节压痛都有显著改善作用,并能有效降低复发率[5]。近年来,可控温度的温针仪常被临床研究所采用,哈斯高娃[6]发现温针仪治疗风湿寒性膝关节痛要优于传统疗法,并具有温度可调、副反应少等优点,王善言[7]发现温针仪治疗背肌筋膜炎能有效降低背肌筋膜炎患者的疼痛。

温针治疗的效果与针体的温度有着密切关系,在躯体及皮肤组织中分布有感受不同温度范围的蛋白受体(瞬时感受器电位家族,TRP),其中TRPV1与温度感受相关[8],可被热刺激(＞43℃)激活[9],为阐明不同灸法产生不同的温度热刺激,从而产生不同的体表调节机体功能提供了生物学基础。

为了阐明针刺作用的机制,近年来的研究已经深入到细胞分子层面,有研究表明,穴区的肥大细胞的数量明显多于非穴区,并且有循经分布的特点[10],而针刺可引起穴区皮肤和肌肉的肥大细胞增多并使肥大细胞产生脱颗粒的变化[11-13]。颗粒中的主要物质包括P物质、组胺、5-HT、中性蛋白酶、白三烯、前列腺素、肿瘤生长因子等40多种介质,这些化学物质是穴位局部产生炎性反应的基础,而这种炎性反应被看作针刺效应产生的始动环节之一[14]。经过近年来的临床及实验研究,阐释了部分组织、细胞在针刺镇痛中的作用,但并未完全阐明针刺镇痛的机制。

足阳明胃经的足三里穴(ST36)常被作为类风湿关节炎的治疗穴位,临床研究显示,电针足三里穴能降低类风湿关节炎患者外周血中致炎因子IL-1、IL-6、TNF-a水平[15-16]。足少阳胆经上的阳陵泉穴(GB34)常被作为镇痛效应的实验穴位,而同在足阳明胃经的伏兔穴(ST32)和足太阳膀胱经的委中穴(BL40)常被治疗腰腿痛,本文从治疗佐剂性关节炎的模型入手,来观察这4个穴位的特异性。

本实验使用温针仪器刺激大鼠足三里、伏兔、阳陵泉、委中穴,选取温度为TRPV1的激活温度43℃,并用肥大细胞膜稳定剂色甘酸钠预处理足三里穴位,通过治疗急性佐剂性关节炎模型大鼠,观察不同穴位温针的镇痛效应并探讨其与穴区肥大细胞的功能关系。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

清洁级SD成年雄性大鼠,共60只,体重(250±20)g,由中国科学院上海市实验动物中心提供,许可证号为SCXK(沪)2007-0005。所有大鼠在同等标准环境(GB14925-2001)内饲育和使用,给予自然照明、饮水和饮食,适应实验环境约1星期。随机分为10组,每组6只,分别为空白组(C)、模型组(M)、足三里温针组(Z)、对侧温针组(O)、手针组(A)、伏兔温针组(F)、阳陵泉温针组(Y)、委中温针组(W)、色甘酸钠＋温针组(DSCG＋Z)、生理盐水＋温针组(Saline＋Z)。所有实验方法经上海市针灸经络研究中心实验动物伦理委员会通过。其中,足三里温针组、伏兔温针组、阳陵泉温针组、委中温针组选取大鼠左侧足三里穴,对侧温针组选取大鼠右侧足三里穴,两侧痛阈均做检测。

1.2 主要试剂与仪器

完全弗氏佐剂(CFA,美国Sigma);色甘酸钠(DSCG,美国Sigma);IIT C 336 GT爪/尾痛觉测试仪(美国);中蒙蒙医YY-1型温针治疗仪;台湾YCT TC-117高精度K型热电偶温度表;美孚含银导热硅脂。

1.3 急性佐剂性关节炎大鼠模型制备

对模型组、足三里温针组、对侧温针组、手针组、伏兔温针组、阳陵泉温针组、委中温针组、色甘酸钠＋温针组、生理盐水＋温针组大鼠以10%水合氯醛按40 mg/kg剂量腹腔注射麻醉。夹尾无体动反应后,左踝关节腔内注射浓度为1 mg/mL的完全弗氏佐剂0.05 mL[17]。造模后24 h,大鼠左后肢踝关节出现红肿,左后肢抬高,大鼠行动迟缓,足底痛阈相较造模前降低,且其差异有统计学意义,说明关节炎模型制备成功。

1.4 治疗方法

1.4.1 温针仪治疗方法

将温针头端均匀涂抹美孚含银导热硅脂,采用台湾YCT TC-117高精度K型热电偶温度表测量不同档位下的温针头端温度。测量得出25 mA档位输出温度为43℃,选取该档位为温针治疗档位。根据分组,分别选取足三里穴、伏兔穴、阳陵泉穴、委中穴为温针穴位,参照《实验针灸学》[18]中常用实验动物针灸穴位附图定位,将温针直刺入大鼠穴位,深度约为7 mm,留针20 min。对侧温针组是将左后肢造模的大鼠进行右后肢的温针治疗,选取足三里穴,治疗后检测两侧的痛阈变化。

1.4.2 手针治疗方法

根据足三里穴具有较强的镇痛效应,选取足三里穴为手针用穴。参照《实验针灸学》[18]中常用实验动物针灸穴位附图定位(位于腓骨小头下方5 mm处),手针方法为选择0.35 mm×25 mm毫针直刺,深度约7 mm,按照1次/s的频率进行刺激。采用提插1 min,留针1 min,捻转1 min,留针1 min的手法,反复交替,持续20 min。

1.4.3 穴位药物注射

色甘酸钠(DSCG)是肥大细胞膜稳定剂,具有抑制肥大细胞脱颗粒的作用。剃除大鼠左侧后肢膝关节外下方被毛后,使用标准微升注射器在大鼠后左肢足三里穴区注射浓度为0.02 g/mL的色甘酸钠20mL。注射时于穴位处直刺7 mm,边注射边回抽针体。

1.5 指标检测

1.5.1 痛阈

各组分别于造模前、造模后24 h、治疗前(造模后48 h)及治疗后进行痛阈测定,痛阈单位为秒(s)。将大鼠放入辐射热测痛仪静置30 min后,用辐射热测痛仪照射大鼠右后足垫部,以引起动物热痛缩腿反应的潜伏期来判定。每隔5 min测痛1次,共测3次,取其平均值作为痛阈值。为防止烫伤,将潜伏期上限定为20 s。

1.5.2 穴区局部肥大细胞脱颗粒率

各组足三里穴区组织切片采用0.5%甲苯胺蓝(toluidine blue,TB)染色,常规脱水、透明后封片。在10×40倍光镜下对皮肤中肥大细胞进行计数。脱颗粒率=脱颗粒肥大细胞数/肥大细胞总数×100%。每只动物组织块(体积约5 mm×5 mm×5 mm)取近针刺部位的3张切片进行肥大细胞脱颗粒率平均值计算,在此基础上统计每组肥大细胞脱颗粒率。

1.6 统计学方法

本实验数据用均数±标准差表示,使用SPSS16.0软件,组间比较采用-检验,以＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 温针对AA大鼠痛阈的影响

从图1和表1进行组内比较可以看出,各组造模后24 h与造模前痛阈比较,均有显著性差异(＜0.05),提示造模成功。足三里温针组、对侧温针组左侧(O L)、手针组、伏兔温针组在治疗后,痛阈相比治疗前均有显著性上升(＜0.05),而对侧温针组右侧(O R)则无显著性差异(＞0.05),说明足三里穴、伏兔穴温针治疗对AA大鼠模型有效,并且,对侧温针治疗在不提高对侧后肢痛阈的前提下,依旧能提高造模侧痛阈,说明温针镇痛的效应是由穴位引导产生,并不是简单的温度传导。

进行组间比较可以发现足三里温针组与手针组比较,温针治疗的效果要远好于手针治疗(＜0.05),而足三里温针组经治疗后痛阈均显著高于伏兔温针组、阳陵泉温针组和委中温针组(＜0.05),说明对于大鼠佐剂性关节炎,温针足三里穴的镇痛效果要优于其他三穴,足三里穴具有特异性,与肥大细胞脱颗粒的结果相联系,提示肥大细胞参与到了温针镇痛的效应中。

除此之外,生理盐水＋温针组治疗前后有显著性差异(＜0.05),而色甘酸钠＋温针组无显著性差异。足三里温针组与色甘酸钠＋温针组相比,治疗后的痛阈有显著性差异(＜0.05),而与生理盐水＋温针组则无差异(＞0.05)。且色甘酸钠＋温针组相比生理盐水＋温针组,治疗后痛阈有显著性差异(＜0.05),结合肥大细胞脱颗粒率可看出,经过色甘酸钠的固定后,肥大细胞脱颗粒率减少,温针对于痛阈的升高效应也有所减弱,说明肥大细胞在参与温针镇痛中发挥了重要的效应,肥大细胞脱颗粒的物质可提高佐剂性关节炎大鼠的痛阈。

2.2 温针对AA大鼠肥大细胞脱颗粒的影响

从图2、图3、表2可以看出,模型组与空白组比较,肥大细胞脱颗粒率无统计学意义(＞0.05),足三里温针组的肥大细胞脱颗粒率高于模型组(＜0.05),且足三里温针组的肥大细胞脱颗粒率明显高于手针组(＜0.05),说明温针治疗对于AA大鼠的镇痛效果显著优于手针治疗。

色甘酸钠＋温针组与生理盐水＋温针组相比较,肥大细胞脱颗粒率有显著差异性(＜0.05),说明温针治疗引起的肥大细胞脱颗粒现象能被色甘酸钠显著阻断。

足三里温针组与伏兔温针组、阳陵泉温针组、委中温针组相比均有显著性差异(＜0.05),提示足三里穴区处肥大细胞对温针刺激的感受不同于其他三穴。

注:组内比较,与造模前比较1)P＜0.05;与治疗前比较2)P＜0.05;组间比较,与足三里温针组组比较3)P＜0.05;与色甘酸钠＋温针组比较4)P＜0.05

表1 各组大鼠的痛阈及痛阈变化率 (±s)

表1 各组大鼠的痛阈及痛阈变化率 (±s)

组别n造模前造模后治疗后治疗前后痛阈变化率/% 空白组614.32±0.7814.15±0.5314.15±0.53- 模型组615.06±1.079.65±0.501)9.65±0.50- 足三里温针组614.43±0.899.15±0.481)16.09±0.812)77.39±10.95 对侧温针组左侧614.69±1.018.98±0.331)15.39±1.532)73.79±20.84 对侧温针组右侧614.20±0.8314.42±1.0014.70±0.923.16±6.98 手针组615.12±0.878.83±0.631)11.64±0.932)3)32.42±8.52 色甘酸钠＋温针组615.39±0.469.56±0.401)10.49±0.603)9.51±2.27 生理盐水＋温针组614.92±0.319.17±0.461)15.78±0.552)4)75.22±13.73 伏兔温针组616.50±0.868.94±0.431)12.48±0.972)3)40.04±9.99 阳陵泉温针组616.98±0.819.11±0.451)11.75±1.303)29.86±15.09 委中温针组615.58±0.5310.93±0.361)13.14±1.003)21.76±9.46

注:与造模前比较1)＜0.05;与治疗前比较2)＜0.05;与足三里温针组比较3)＜0.05;与色甘酸钠＋温针组比较4)＜0.05

注:与模型组比较1)P＜0.05;与足三里温针组比较2)P＜0.05;与色甘酸钠＋温针组比较3)P＜0.05

注:标尺表50 mm,箭头所指为肥大细胞,在图A、图B、图F中可以观察到细胞膜光滑完整、处于稳定状态下的肥大细胞;图C、图D、图G、图H中可见经温针治疗后,肥大细胞的细胞膜破裂,在细胞周围还有被染色的颗粒

表2 大鼠皮肤中穴位处肥大细胞脱颗粒率 (±s)

表2 大鼠皮肤中穴位处肥大细胞脱颗粒率 (±s)

组别n肥大细胞脱颗粒率/% 空白组645.66±2.80 模型组651.82±1.70 足三里温针组677.95±1.751) 对侧温针组669.65±0.98 手针组653.28±3.252) 色甘酸钠＋温针组648.36±1.93 生理盐水＋温针组667.05±2.893) 伏兔温针组668.85±2.772) 阳陵泉温针组661.68±2.412) 委中温针组660.33±1.482)

注:与模型组比较1)＜0.05;与足三里温针组比较2)＜0.05;与色甘酸钠＋温针组比较3)＜0.05

3 讨论

由于足三里穴位具有较强的镇痛效应,所以本实验选取该穴位作为实验穴位[19]。气血喜温恶寒,遇寒则滞,遇温则行,因而当血脉瘀滞,则需以温促通。本文结果显示温针足三里穴效果优于手针效果,进一步提示了温度的提升提高了针灸对痹证镇痛效果的影响。近年来经穴特异性的研究表明,经穴下不同的组织结构特征是决定经穴效应特异性的关键因素之一,本文实验结果显示,足三里穴对AA大鼠的镇痛效果显著优于同处于足阳明胃经的伏兔穴,而伏兔穴的效果又优于足少阳胆经的阳陵泉穴和足太阳膀胱经的委中穴。即同一经脉的不同腧穴、不同经脉上的不同腧穴之间在对AA大鼠镇痛效应方面,虽均可提升大鼠的痛阈,但存在效应量上的差异,足三里穴对AA大鼠的镇痛效应明显优于其他三穴。提示足三里穴对AA大鼠有着独特的镇痛作用,与在临床上足三里穴主治下肢痿痹的“经穴-病症特异性”相符合。

经穴形态结构特异性是经穴特异性的基础。严振国等[20]研究足三里、合谷、内关、神门等穴位的显微结构发现,神经、血管和淋巴在不同穴位的分布不尽相同,而这些不同的结构在不同穴位中所起的作用亦各有侧重。王秀云等[21]发现腧穴处的K﹢浓度相比非经穴处具有一定的特异性,腧穴处可能存在着K﹢的富集。本文中,温针足三里穴产生的肥大细胞脱颗粒率高于伏兔穴、阳陵泉穴、委中穴,与痛阈变化的结果相结合,可提示不同穴位由于结构功能的不同、对热刺激及热能量的传导不同,导致肥大细胞脱颗粒率有差异,进而在温针镇痛中发挥的功能存在差异性。

足三里穴位肥大细胞脱颗粒与针刺镇痛效应关系密切,作为机体疏松结缔组织内的一种常见细胞,肥大细胞和周围的血管、神经丛、淋巴管等交织形成一个复杂体系,从而构成穴位的物质基础[22]。肥大细胞虽然在机体中随机分布,但他们更倾向于聚集在血管和神经周围,它们与周围神经末梢的广泛部位有密切接触,有时呈膜对膜接触,但不形成类似突触的关系。电镜下测量肥大细胞与神经细胞之间的距离,约8%肥大细胞与大鼠肠黏膜上的神经细胞以膜-膜方式接触,31%肥大细胞与神经细胞之间的包膜间隙约250 nm[23-24]。一般认为,生物体内解剖结构上的密切联系往往提示功能上的相互作用。神经-免疫-内分泌调节网络理论认为,免疫系统、神经系统以及内分泌系统相互之间都存在着双向联系,这种联系通过化学信息分子和受体实现,肥大细胞与神经之间的联络是免疫系统与神经系统相互作用的基本内容之一[25]。根据这一理论,肥大细胞与神经纤维间存在的密切解剖关系是两者之间功能联系的结构基础。肥大细胞合成释放的生物活性物质可以改变神经元的活动,如类胰蛋白酶可直接激活神经元上的蛋白酶活化受体[26],肿瘤坏死因子和神经生长因子可降低神经兴奋电位的阈值[27]。而神经细胞的活动也可影响肥大细胞的活动,神经系统经典递质如肽类递质、嘌呤类递质、一氧化氮以及许多神经来源的细胞因子都对肥大细胞的功能有调节作用[28]。肽能神经末梢有大量念珠状的膨体,一定条件下,贮存于膨体内的神经肽可被释放,以调节周围靶细胞或靶组织。神经肽SP和NPY(neuropeptide Y)可以通过受体非依赖机制促进肥大细胞脱颗粒而释放生物活性物质[29-30]。

本研究中,足三里穴位使用肥大细胞膜稳定剂色甘酸钠预处理后,温针治疗产生的镇痛效应也被抑制,提示该镇痛效应可能与温针引起的肥大细胞脱颗粒有密切联系。针刺引起穴位处肥大细胞脱颗粒释放出众多炎性递质和细胞因子,作用于其附近的周围神经末梢使神经系统产生痛觉调制效应。同针刺类似,一定强度的温针亦存在镇痛效应,同时还使肥大细胞产生脱颗粒的变化。这种镇痛效应可能与肥大细胞的功能关系密切,但需注意的是温针不但影响到穴区的肥大细胞,还会对穴区的其他组织细胞产生生物效应,如温针能够使局部组织温度升高,血液流动加速,局部组织代谢增强;使局部组织内细胞胞膜通透性增加等。这些生物效应与肥大细胞脱颗粒释放的生物活性物质,共同作用于周围神经末梢而使神经系统产生痛觉调制。

对针灸疗效机制的探讨,本文提出温针的镇痛效应可能与穴区肥大细胞脱颗粒有密切关系,而对于温针镇痛效应的更确切机制,还有待进一步的研究。

[1] Leung A, Khadivi B, Duann JR,. The effect of Ting point (tendinomuscular meridians) electroacupuncture on thermal pain: a model for studying the neuronal mechan- ism of acupuncture analgesia[J]., 2005,11(11):653-661.

[2] 冯斌.针刺临床作用及机制浅析[J].中医药学刊,2003,21(9):1565-1566.

[3] 张磊.温针与电针治疗膝骨关节炎的疗效对比观察[D].山东中医药大学,2006.

[4] 张秀荣.温针灸治疗风湿寒性关节痛的临床研究[D].黑龙江中医药大学,2007.

[5] 林国华,李万瑶,苏国龙,等.温针治疗膝骨关节炎40例疗效观察[J].新中医,2004,36(10):48-49.

[6] 哈斯高娃.蒙医传统温针与蒙医温针仪治疗风湿寒性膝关节痛的对比研究[J].中国民族医药杂志,2010, 16(12):17-18.

[7] 王善言.温针仪治疗背肌筋膜炎临床随机对照研究[D].北京中医药大学,2014.

[8] Nelson PL, Beck A, Cheng H. Transient receptor pro- teints illuminated: current views on TRPs and disease[J]., 2011,187(2):153-164.

[9] Caterina MJ, Leffler A, Malmberg AB,. Impaired nociception and pain sensation in mice lacking the capsaicin receptor[J]., 2000,288(5464):306- 313.

[10] 潘萍,郭义.肥大细胞是针刺效应信号放大的关键因素之一[J].辽宁中医杂志,2009,36(12):2066-2068.

[11] 张迪,丁光宏,沈雪勇,等.经络穴位与肥大细胞相关性研究进展[J].针刺研究,2005,30(2):115-119.

[12] 张迪,丁光宏,沈雪勇,等.肥大细胞在针灸效应机制中的作用:回顾性研究[C].全国针法灸法临床与科研学术研讨会暨脊柱病研究新进展论文汇编,2005:12.

[13] Zhang D, Spielmann A, Wang, L,. Mast-cell degranulation induced by physical stimuli involves the activation of transient-receptor-potential channel TRPV2[J]., 2011,61(1):113-124.

[14] 周丹,潘萍,郭义,等.针刺引起的炎性反应是针效产生始动环节之一[J].中国针灸,2009,29(1):32-34.

[15] 陈白露,武平,彭麒,等.肾俞、足三里、阳陵泉在类风湿关节炎治疗中的作用探讨[J].辽宁中医杂志,2015, 42(6):1314-1316.

[16] 胡天燕.电针治疗类风湿关节炎临床疗效及其对外周血中细胞因子影响的研究[D].南京中医药大学,2009.

[17] Chang Y, Wu Y, Wang D,. Therapeutic effects of TACI-Ig on rats with adjuvant-induced arthritis via attenuating inflammatory responses[J].(), 2011,50(5):862-870.

[18]李忠仁.实验针灸学[M].北京:中国中医药出版社,2003:327.

[19] 张迪,丁光宏,沈雪勇,等.肥大细胞功能对针刺大鼠“足三里”镇痛效应的影响[J].针刺研究,2007,32 (3):147-152.

[20] 严振国,余安胜,赵英侠.神门穴位显微结构的研究[J].针灸临床杂志,1997,13(1):29.

[21] 王秀云,郭义,苗文方,等.经穴钾离子特异性的实验研究[J].天津中医学院学报,1998,17(1):50.

[22] Xia Y, Ding GH, Wu GC.[M]. New York: Springer, 2013:65.

[23] Stead RH, Dixon MF, Bramwell NH,. Mast cells are closely apposed to nerves in the human gastrointes- tinal mucosa[J]., 1989,97(3):575-585.

[24]Stead RH, Tomioka M, Quinonez G,. Intes- tinal mucosal mast cells in normal and nematode-infected rat intestines are in intimate contact with peptidergic nerves[J]., 1987,84 (9):2975-2979.

[25] Suzuki R, Furuno T, Teshima R,. Bi-directional relationship of in vitro mast cell-nerve communication observed by confocal laser scanning microscopy[J]., 2001,24(3):291-294.

[26]Carlos UC, Olivier D, Karen M,. Thrombin and mast cell tryptase regulate guinea-pig myenteric neurons through proteinase-activated receptors-1 and -2[J]., 1999,517(Pt 3):741-756.

[27] van Houwelingen AH, Kool M, de Jager SC,. Mast cell-derived TNF-alpha primes sensory nerve endings in a pulmonary hypersensitivity reaction[J]., 2002,168(10):5297-5302.

[28] 常晓兰,冯广友.肥大细胞与神经系统的相互作用[J].中国临床康复,2003,7(22):3110-3112.

[29] Cross LJ, Beck-Sickinger AG, Bienert M,. Structure activity studies of mast cell activation and hypotension induced by neuropeptide Y (NPY), centrally truncated and C-terminal NPY analogues[J].,1996, 117(2):325-332.

[30] Lau AHY, Chow SSM, Ng YS. Immunologically induced histamine release from rat peritoneal mast cells is enhanced by low levels of substance P[J]., 2001,414(2-3):295-303.

Warm Needling-based Specificity of Acupoints and Its Relationship with Mast Cell Function in Adjuvant Arthritis Rats

1,2.

1.,,200433,; 2.,201203,

Objective To investigate the analgesic effect of warm needling and explore its relationship with the function of mast cells in the acupoint area and the specificity of acupoints. Method Sixty SD rats were randomized into blank (C), model (M), warm needling Zusanli (Z), contralateral warm needling (O), manual acupuncture (A), warm needling Futu (F), warm needling Yanglingquan (Y), warm needling Weizhong (W), disodium cromoglycate + warm needling (DSCG＋Z) and saline + warm needling (Saline＋Z) groups. A rat with adjuvant arthritis was used as a model of inflammatory pain (AA model). Hindpaw withdrawal latency was measured in the rats during warm needling at Zusanli (ST36), Yanglingquan (SP9), Futu (ST32) and Weizhong (BL40). Pre-treatment and post-treatment rates of mast cell degranulation in the acupoint area were compared and the effect of acupoint area injection of disodium cromoglycate on the degranulation was observed by acupoint tissue section staining. Result Obvious degranulation of mast cells in the acupoint area appeared after warm needling (＞0.05). The analgesic effect of warm needling was better than that of manual acupuncture (＞0.05). After treatment, pain threshold was significantly higher in the warm needling Zusanli group than in the warm needling Futu, warm needling Yanglingquan and warm needling Weizhong groups (＞0.05). Acupuncture-induced mast cell degranulation could be prevented by disodium cromoglycate (＞0.05). Conclusion Warm needling at point Zusanli can produce an analgesic effect in adjuvant arthritis rats. Its analgesic effect is better than that of manual acupuncture. The rate of mast cell degranulation in the acupoint area is higher in the warm needling Zusanli group than in the manual acupuncture group. The analgesic effect of warm needling is reduced after pretreatment with disodium cromoglycate, a mast cell stabilizer. In an AA model, the analgesic effect of warm needling at point Zusanli is better than those of warm needling at points Yanglingquan, Futu and Weizhong.

Acupuncture-moxibustion therapy; Warm needling therapy; Biological effect; Mast cell; Analgesic effect; Degranulation; Rats

1005-0957(2017)02-0229-07

R2-03

A

10.13460/j.issn.1005-0957.2017.02.0229

2016-06-20

国家自然科学基金项目(81102630,81590950,81574053,81303027,81590953);国家重点基础研究发展计划(2012CB518502);上海市针灸机制与穴位功能重点实验室(14DZ2260500)

荆翼(1990—),男,2013级硕士生,Email:13210290015@fudan.edu.cn

张迪(1980—),女,副教授,研究方向为生物物理及针灸机制研究,Email:dizhang@fudan.edu.cn