化学发光检测乙肝表面抗原剩余试剂再利用评价

2017-03-13于淼琛潘立阳

实验与检验医学 2017年1期

关键词：雅培化学发光精密度

于淼琛，潘立阳，朱鸿

(1、大连医科大学附属第一医院检验科，辽宁大连116011；2、大连市疾病预防控制中心传染病地方病防制所，辽宁大连116011)

化学发光检测乙肝表面抗原剩余试剂再利用评价

于淼琛1，潘立阳2，朱鸿1

(1、大连医科大学附属第一医院检验科，辽宁大连116011；2、大连市疾病预防控制中心传染病地方病防制所，辽宁大连116011)

目的对雅培i2000化学发光仪剩余试剂再利用进行评估。方法将HBsAg的混合剩余试剂，进行精密度、正确度、并与新试剂进行比对及相关性分析。结果批内精密度分别是4.77、5.48，批间精密度分别是8.86、5.78；正确度本室测定结果与室间质评回报结果均相符；相关系数r为0.9979；HBsAg两试剂盒的阳性符合率（%）、阴性符合率（%）均为100%。结论雅培i2000化学发光仪剩余试剂可以混合使用，稳定性良好，能保证检测质量。

雅培i2000；剩余试剂再利用；化学发光

雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪应用临床以来，重复性好，故障率低，结果可靠稳定[1-3]，逐步取代了传统的ELISA方法。但是由于配套试剂均为进口试剂，价格相对较高，试剂剩余量大，为了节约成本，本实验室将相同批号的剩余试剂混合，并对其性能进行验证评价。

1 材料与方法

1.1 标本来源标本来源于大连医科大学附属第一医院住院患者的无溶血、无乳糜血清。

1.2 仪器与试剂雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪。将试剂瓶剩余试剂轻轻充分混匀，倒入另一台仪器用完的试剂瓶内，轻轻混匀，注意不要产生气泡，成为一盒新的“混合”试剂。配套校准品及质控品。

1.3 方法

1.3.1 精密度验证依据EP15-A2[4]，选择两个水平的混合血清（弱阳性、阳性血清），连续检测20次，计算批内精密度，批内精密度≤1/4允许总误差（TEa）；使用2个水平的质控品（弱阳性、阳性），每天取出两个水平的样品各一支，在常规条件下各测定1次，连续测定20天，计算批间精密度，批间精密度≤1/3允许总误差（TEa）。

1.3.2 正确度验证用室间质评的质控物测定，判断测定结果与室间质评回报结果符合性。

1.3.3 比对试验

1.3.3.1 比对分析依据EP9-A2[5]，实验周期不少于5天，至少做20份病人样品（如每天至少做4份病人标本）。尽可能使50%的实验样品分析物的含量在参考区间外、可报告范围内。比对实验尽量在2个小时内检测完成，将样品按1、2、3、4的顺序排列先测一遍，然后将顺序倒过来做第二次测定。将新试剂盒的结果与混合试剂盒的结果作比较。计算回归方程：Y=ax+b，a值在1±0.03范围内，相关系数r≥0.975[6]。

1.3.3.2 符合率选择10份阴性标本（其它标志物阳性的4份以上）、10份阳性标本（至少弱阳性5份、强阳性1份），使用混合试剂盒和新试剂盒分别检测HBsAg，计算两试剂盒的符合率，评价比对结果的可接受性。

1.3.4 相关性分析HBsAg新试剂盒测定值的平均值为X，混合试剂盒测定值平均值为Y[6]，用相关系数(r)对相关性作评估，若r≥0.975或r2≥0.95，则认为X范围合适，两试剂的相关性好，直线回归统计的斜率和截距可靠。计算线性回归方程：Y=aX+b。

2 结果

2.1 精密度验证HBsAg检测批内精密度和批间精密度结果均合格，见表1。

表1 HBsAg精密度验证结果

2.2 正确度验证测定结果与室间质评回报结果均一致，判断结果符合，见表2。

2.3.1 相关性分析回归方程Y=0.1.0069X-0.9967，相关系数r=0.9979[7]，见图1。

2.3.2 定性项目HBsAg两试剂盒的符合率，阳性符合率（%）、阴性符合率（%）均可接受，见表3。

表2 正确度验证结果

图1 HBsAg相关性

表3 HBsAg的符合率

3 讨论

雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪检测试剂用完后，试剂瓶内虽有剩余试剂，但仪器不会再进行检测，但剩余试剂量却超过了50%[8]。化学发光仪器试剂价格昂贵，如将剩余试剂弃之不用，将造成极大的浪费[9]。为了使剩余试剂在仪器上的分析结果具有可比性，必须要对检测结果进行比对[10-12]。混合剩余试剂的混合试剂经本实验室验证，重复性及准确性均可靠。HBsAg新试剂盒和剩余试剂混合试剂盒的比对结果，回归方程良好，相关系数r=0.9979，说明两试剂盒高度正相关，且相关性都良好[13]。

由于检测标本量大，且2台雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪同时进行，在工作结束后，岗位人员负责将今日的剩余试剂混合且做好标注，放入另一台仪器明日备用。第二天检测质控合格后，才能进行正常标本检测。如当日质控失控，应查找原因，重新复测质控品，质控合格方能进行正常标本检测；如质控还是失控，不能用此混合试剂检测标本，要弃去此混合试剂。剩余混合试剂放入另一台仪器后，仪器扫描条码后，默认为新盒试剂，仪器库存为“500TEST”，根据经验2瓶剩余混合试剂检测标本量大概为80TEST。

对于HBsAg剩余混合试剂检测阳性标本，用金标法复查，如结果相符，则可正常审发报告，若不相符，则应使用新盒试剂重新检测；对于HBsAg剩余混合试剂检测弱阳性标本，则应使用新盒试剂重新检测，如结果相符，则可正常审发报告，若不相符，则应使用患者生化室检测血液使用新盒试剂重新检测，如有必要，直接检测患者血样HBV-DNA。

根据配套校准品说明书，同批号试剂可定标一次，稳定期为30d，所以剩余试剂可不需再定标[14]。经本实验室验证，在日常工作中，可将雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪上使用的HBsAg试剂剩余混合用于检测，其与原装检测试剂的检测结果具有可比性，在严格按说明书保存及规定有效期内使用的前提下，既保证了检验质量，又能有效节约成本，值得推广[15]。

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R512.6+3，R446.62