江西省2011年-2015年呼吸道感染儿童人博卡病毒感染分析

李健雄，张艳妮，施 勇，徐 刚，龚 甜，熊 英

(江西省疾病预防控制中心，江西南昌330029)

江西省2011年-2015年呼吸道感染儿童人博卡病毒感染分析

李健雄，张艳妮，施 勇，徐 刚，龚 甜，熊 英

(江西省疾病预防控制中心，江西南昌330029)

目的了解近几年人博卡病毒在江西省呼吸道感染儿童中的流行情况。方法采集2011年8月至2015年12月1508例江西省呼吸道感染儿童的咽拭子或支气管灌洗液样本，利用RT-PCR对博卡病毒进行检测。结果1508例患儿呼吸道标本中86例患儿被检测出博卡病毒阳性，阳性率为5.70%。小于等于1岁的儿童的阳性率最高，且男性患儿的阳性率大于女性患儿。主要流行时间为5-8月。HBoV感染与其他呼吸道病毒混合感染率达到了60.47%。结论HBoV是引起江西省儿童呼吸道感染的主要病原体之一，多发于低龄，男性患儿，以夏季高发。且与其他呼吸道病毒有较高的混合感染率。

人博卡病毒；呼吸道感染；儿童

儿童呼吸道感染已成为当前儿科发病率最高的一种疾病，而病毒是小儿呼吸道感染的重要原因。引起呼吸道感染的病毒种类多，变异快，迄今为止，仍有很多呼吸道感染的病因不明。2005年，瑞典科学家Allandar T[1]等采用随机PCR扩增法，大规模测序和生物信息学方法，筛查儿童呼吸道感染标本，发现了一种新的细小病毒，该种病毒被命名为人博卡病毒（HBoV）。当前，人博卡病毒已成为常见的导致小儿呼吸道感染的病毒之一，是一种不能忽视的呼吸道病毒。本研究对江西省2011年-2015年采集的儿童标本进行HBoV检测，以了解HBoV在江西省的流行状况。

1 材料与方法

1.1 标本来源标本采集自江西省儿童医院呼吸内科，从2011年8月至2015年12月，采集不同发病时间的发热伴呼吸道感染症状的15岁以下的儿童咽拭子或支气管灌洗液。每份标本都登记有患儿的基本资料及临床信息。

1.2 主要仪器与试剂美国Bio-Rad PCR仪，法国VILBER LOURMAT凝胶成像系统、Qiagen DNA mini kit提取试剂盒，Qiagen PCR试剂盒，Promaga GoTaq Master Mix试剂盒。

1.3 方法

1.3.1 病毒核酸提取标本震荡离心处理后，取200μl标本，采用提取病毒总核酸，提取方法参考试剂盒说明书。

1.3.2 博卡病毒PCR检测利用Promaga GoTaqMaster Mix试剂盒对提取的核酸进行人博卡病毒RT－PCR检测，引物参考文献[2]。

上游：GACCTCTGTAAGTACTATTAC

下游：CTCTGTGTTGACTGAATACAG

反应体系为2×PCR Master Mix 12.5μl，上下游引物各0.5μl，ddH2O 6.5μl，RNA模板5μl。反应条件为94℃3min；95℃30s、55℃30s、72℃45s共35个循环；72℃10min。PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，判断是否为人博卡病毒阳性。

1.3.3 其他呼吸道病毒检测标本在进行人博卡病毒检测的同时，采用RT－PCR方法[2]对流感病毒（A型，B型），呼吸道合胞病毒（A型，B型），副流感病毒（1型，2型，3型，4型），鼻病毒，偏肺病毒，冠状病毒进行检测，采用PCR方法对腺病毒进行检测。判断标本是否存在混合感染。

1.3.4 统计分析采用SPSS 18.0软件对病人信息、临床信息以及检测结果进行卡方检验并分析结果P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HBoV检测结果本研究在2011年8月至2015年12月期间采集到1508例患儿呼吸道标本，共有86例患儿被检测出阳性，阳性率为5.70%。

2.2 不同年龄儿童HBoV检测结果不同年龄儿童HBoV检测结果见表1。经卡方检验P=0.028，不同年龄间儿童HBoV阳性率存在显著差异，其中以小于等于1岁的儿童阳性率最高。

表1 不同年龄儿童HBoV检测情况

2.3 不同性别儿童HBoV检测结果本研究对1014例男性患儿，494例女性患儿样本进行了检测。其中男性患儿阳性68例，女性患儿阳性18例，阳性率分别为6.70%和3.64%。经卡方检验P= 0.016，说明男性患儿和女性患儿之间的阳性率存在显著差异。

2.4 不同月份HBoV检测结果1－12月的HBoV检测结果见表2。不同月份HBoV阳性率经卡方检验P=8.73×10－8，存在显著差异，其中5－8月份阳性率最高。

表2 不同月份HBoV检测情况

2.5 混合感染情况共检出HBoV与其他呼吸道病原体混合感染病例52例，占比为60.47%。混合感染最多为鼻病毒，有22例，其中只感染博卡病毒和鼻病毒的病例有11例。其余为腺病毒15例，副流感病毒11例，呼吸道合胞病毒11例，流感病毒6例，冠状病毒6例，偏肺病毒2例。有18例（20.93%）病例存在三种及三种以上的病毒的混合感染。

3 讨论

人博卡病毒自2005年在瑞典发现以来，在澳大利亚、美国、加拿大、法国、日本、泰国等多家也相继应用PCR的方法，从临床小儿下呼吸道样本中检测到人博卡病毒[3]。2005年，我国温岭市检出7例HBoV，并通过克隆和基因测序的方法对该病毒进行全基因序列测定，该病毒被命名为WLL－1，温岭成为全球第5个发现HBoV感染的地区[4]。近年来我国各地相继从呼吸道样本中检出人博卡病毒。越来越多的研究证据表明人博卡病毒已成为导致呼吸道感染的一种重要的病原体。

据文献报到，美国[5]的HBoV检出率为5.2%，日本[6]的HBoV检出率为5.7%，而我国急性呼吸道感染的患儿中人博卡病毒的感染率上海为5.5%[7]，苏州为7.1%[8]，南京为8.3%[9]，长沙为11.4%[10]。本研究调查了2011至2015年这5年间江西省儿童人博卡病毒的感染情况，结果显示，我省儿童HBoV感染的阳性率为5.70%，和其他国家和地区的HBoV阳性率并无明显差别，说明我省并不是人博卡病毒重度流行区域。

研究显示2岁以下的婴幼儿时HBoV的易感人群[11]。有文献报道长沙地区HBoV在6－12月年龄段检出率最高[12]。苏州地区在6-18月龄组检出率最高[8]。

本研究中显示在江西地区4岁以下儿童的HBoV阳性率最高，尤其是1岁的儿童，说明低年龄的婴幼儿时HBoV感染的危险人群。在性别方面，本研究显示男性患儿的HBoV阳性率要高于女性患儿，这与四川[15]，长沙[10]地区的研究结果相一致。HBoV在性别方面感染率不同的原因仍需要进行深入的研究和探讨。

HBoV感染的高峰季节各研究结构并不一致。昆明[13]的研究显示HBoV检出高峰为秋冬季。长沙[10]的研究显示HBoV检出高峰为冬春季。而本研究显示我省HBoV感染的重要发生于5-9月份，这与天津[14]HBoV夏季流行的报道相一致。HBoV在不同地区流行时间的不同可能与研究时期和地理位置有关。

HBoV和其他呼吸道病毒混合感染非常常见，其中多以混合感染鼻病毒、RSV、ADV和PIV为主，有报道显示混合感染率最高可达到90%[16]。本研究中混合感染率为60.47%，混合感染率最高的病毒为鼻病毒，其次为腺病毒、副流感病毒和呼吸道合胞病毒，这和其他文献的报道相一致。三种及三种以上病毒混合感染率也达到了20.93%。HBoV为什么易发生混合感染以及混合感染与导致的疾病之间的关系值得继续深入研究。

综上所述，本研究初步掌握了江西地区呼吸道感染患儿HBoV感染的病原学及流行特征资料，对江西省儿童呼吸道感染病原谱研究的重要组成部分。研究结果提供了我省人博卡病毒的重要的实验室数据，对我省人博卡病毒的防控具有重要的意义。

[1]Allander T，Tammi MT，Eriksson M，et al.Cloning of a human parvovirus by molecular screening of respiratory tract samples[J].Proc Natl Acad Sci USA，2005，102(43)：12891-12896.

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Prevalence of human bocavirus among children with respiratory tract infection in Jiangxi province from2011 to 2015

LI Jianxiong，ZHANG Yanni，SHI Yong，XU Gang，GONG Tian，XIONG Ying.Jiangxi Center for Disease Control and Prevention，Nanchang 330029，China.

Objective To study the prevalence of human bocavirus(HBoV)among children with respiratory tract infection(RTI) in JiangXi province and analyze its epidemic characteristics.MethodsOne thousand five hundred and eight throat swabs or bronchial perfusate samples from children with RTI in JiangXi province were collected from August 2011 to December 2015. HBoV were detected using reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR).Results The positive ratio of HBoV was 5. 70%(86)from 1508 RIT cases.The majority of infected children were under 2 years old.The positive rate of male children was higher than female children.The prevalence of HBoV infection occurred mainly from May to August.The rate of co-infection of HBoV and other respiratory viruses was 60.47%in positive samples.Conclusion HBoV is one of the important pathogens in children with respiratory tract infection in JiangXi，which is more prevalent in the male children younger than two years old in summer and is of higher co-infection rates with other respiratory viruses.

Human bocavirus；Respiratory tract infection；Children

R373.1，R446.62

A

1674-1129(2017)01-0020-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.01.006

2016-09-19；

2016-12-02)

江西省卫生计生委科技计划（20156015）

李健雄，男，1986年生，硕士研究生，主管技师，卫生检验，病毒学检验