嗜沫聚生杆菌致颅内感染1例

张 薇，梁 慧，王玉飞，刘 佳，胡红焱

嗜沫聚生杆菌致颅内感染1例

张 薇，梁 慧，王玉飞，刘 佳，胡红焱

嗜沫聚生杆菌；颅内感染；鉴定

嗜血杆菌属细菌主要在人和动物的咽喉和口腔黏膜寄居，少数寄居于生殖道，引起原发性化脓性感染及严重的继发感染[1-3]。嗜沫聚生杆菌(Aggregatibacter aphrophilus)是最近从嗜血杆菌属中分出的一个新种，引起的颅内感染在国内外鲜有报道[4,5]；分离时需要特殊培养基，生化反应不典型，鉴定比较困难。本院2014-08检出1例嗜沫聚生杆菌颅内感染病例，微生物特征及耐药谱值得重视。

1 病例报告

1.1 一般资料 患者，男，50岁，突发左侧头痛10 d、右侧肢体活动不利进行性加重7 d入院。无眩晕、呕吐、视物模糊、抽搐等伴随症状。体检神志清醒、回答切题，不能自立。双侧瞳孔等大等圆、对光反射灵敏，计算力、理解力、定向力、记忆力正常。MRI检查提示左侧顶叶长圆形占位(考虑脓肿)，4.1 cm×3.1 cm×3.6 cm，左侧侧脑室受压。脑脊液检查潘氏实验阳性，白细胞数1245 M/L，多核细胞占85%。将无菌抽取的脓性脑脊液进行细菌分离与鉴定。

1.2 细菌分离与鉴定

1.2.1 主要试剂 巧克力平板、羊血琼脂平板平板购自英国Oxoid 公司，药敏纸片、Ⅴ因子、Ⅹ因子、Ⅴ+Ⅹ因子、 β- 内酰胺酶检测试剂等均为英国Oxoid 公司产品。

1.2.2 鉴定 无菌抽取的脓性脑脊液分别进行肉汤培养基增菌培养和直接划线接种血平板、哥伦比亚巧克力平板，放入5%～10% CO2培养箱，37 ℃培养18～24 h后挑取可疑菌落进行分离鉴定; 将分纯后的菌株使用生物梅里埃Vitek 2-Compact全自动细菌鉴定仪和嗜血杆菌配套鉴定卡进行鉴定; 采用药物纸片扩散法(K-B法) 进行抗生素敏感试验，质控菌株为流感嗜血杆菌ATCC 49247。菌株β-内酰胺酶的测定采用头孢硝噻吩纸片法，将菌落涂布于浸湿头孢硝噻吩的纸片上，10 min 内观察结果，纸片变为红色，即判断为β-内酰胺酶阳性菌株，否则为阴性。之后进行16 s rRNA 序列测定。

1.3 实验结果

1.3.1 菌落形态 35 ℃培养24 h后观察菌落，血平板出现针尖样菌落，继续培养48 h，菌落增至0.5 mm左右，灰白色、无溶血。置于5% CO2孵育箱的巧克力平板培养24 h 后，菌落呈现为黄色不透明、表面出现粗大凸起。肉汤培养基中形成颗粒沉淀，管壁形成的黏性菌膜不易剥落。生理盐水涂片，染色镜检可见短小规则的杆菌。

1.3.2 药敏试验 纸片法测定β- 内酰胺酶为阴性，对四环素、复方新诺明耐药, β- 内酰胺类如氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟、头孢呋辛、氨曲南、美罗培南、亚胺培南均为敏感，对阿奇霉素、左氧氟沙星、氯霉素也敏感。

1.3.3 16 s RNA序列测定 经过GenBank和核糖体工程数据库的16 s RNA序列的比对，与嗜沫聚生杆菌同源性为99.8%，最终确定为嗜沫聚生杆菌完善检查、预防性抗感染治疗后全麻下行左顶叶开颅脓肿清除术+去骨襻减压术，手术顺利，术后美罗培南抗感染治疗。手术后1周复查脑脊液常规正常，3周后复查CT、磁共振见脓肿消失，痊愈出院。

2 讨 论

聚生杆菌属(Aggregatibacter)细菌为革兰阴性杆菌短小杆菌，因培养时容易聚集生长而得名。2006年Norskov 根据16s RNA序列和全基因组测序的结果，重新规划了聚生杆菌属[6]，包括伴放线聚生杆菌，嗜沫嗜血杆菌, 副嗜沫嗜血杆菌, 惰性嗜血菌；后来发现副嗜泡沫嗜血杆菌其实是嗜泡沫嗜血杆菌的一个变种，现在统称嗜沫聚生杆菌。

嗜沫聚生杆菌最早是1940年引起感染性心内膜炎报道[7]，1962年就发现伴放线聚生杆菌和嗜沫聚生杆菌的相似性，后来发现副嗜沫嗜血杆菌与嗜沫嗜血杆菌的区别是生长需要V因子，其原因是副嗜沫嗜血杆菌尼克酰胺-核糖转移酶的基因的缺失。嗜沫聚生杆菌与伴放线聚生杆菌的区别是触酶实验和ONPG水解实验。

嗜沫聚生杆菌广泛寄居于人类口腔和上呼吸道，引起呼吸道的急性感染、心内膜炎、脑脓肿等[8]，近年国外偶有尿液、生殖道分泌物等标本中检出嗜沫嗜血杆菌，有重要的临床意义。笔者认为，国内临床与实验室对这类需要在培养基中添加特殊营养成分的致病菌，未引起足够重视。临床工作中需要注意，嗜沫聚生杆菌需要富含Ⅴ因子和Ⅹ因子的嗜血杆菌专用巧克力平板和5%CO2环境下才能生长，这类细菌的非呼吸道感染应引起微生物工作者和临床医师的高度重视。

治疗嗜沫聚生杆菌感染通常首选青霉素类，对其耐药监测通常只需检测β-内酰胺酶，以及进行氯霉素的耐药性检测，而不需要检测对其他抗生素敏感性。在绝大多数情况下，β-内酰胺酶试验可以成为检测细菌对氨苄西林与阿莫西林耐药性的快速方法。β-内酰胺酶阳性提示对青霉素、氨苄西林和阿莫西林均耐药。

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[2] Melo Oliveira MG, Abels S, Zbinden R,etal. Accurate identification of fastidious Gram-negative rods: integration of both conventional phenotypic methods and 16S rRNA gene analysis[J]. BMC Microbiol, 2013，13:162.

[3] Di Bonaventura M P, DeSalle R, Pop M,etal. Complete genome sequence of Aggregatibacter (Haemophilus) aphrophilus NJ8700[J]. J Bacteriol，2009，191(14):4693-4694. See comment in PubMed Commons below

[4] Maraki S, Papadakis IS, Chronakis E,etal. Aggregatibacter aphrophilus brain abscess secondary to primary tooth extraction: Case report and literature review[J]. J Microbiol Immunol Infect, 2014，13：1-4.

[5] Ahamed S P, Lath S, DeGabriele G J,etal. Cerebral abscess caused by Aggregatibacter aphrophilus[J]. Neurosciences (Riyadh)，2010，15(1):40-42.

[6] Norskov LN, Kilian M. Reclassification of Actinobacillus actinomycetemcomitans, Haemophilus aphrophilus, Haemophilus paraphrophilus and Haemophilus segnis as Aggregatibacter actinomycetemcomitans gen. nov., comb. nov, Aggregatibacter aphrophilus comb nov. and Aggregatibacter segnis comb. nov, and emended description of Aggregatibacter aphrophilus to include V factor-dependent and V factor-independent isolates[J]. Int J Syst Evol Microbiol，2016，56(12):2135-2146.

[7] Khairat O. Endocarditis due to a new species of Haemophilus[J]. J Pathol Bacteriol，1940，50(3):497-505.

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(2016-11-08收稿 2017-02-10修回)

(责任编辑 尤伟杰)

张 薇，本科学历，主管技师。

100039 北京，武警总医院检验科

胡红焱，E-mail：huhongyanwj@163.com

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