固相表面荧光光谱法在药物分析中的应用

张松瑶

（白城医学高等专科学校，吉林 白城 137000）

固相表面荧光光谱法，是将待测的组分吸附在固体基质表面，进行定性定量的表面的分析方法。运用在药物分析中，能够快速准确地监测出药物的成分，对固体样品的测定灵敏度高。对于固相表面荧光分析技术，以对三硝基甲苯进行定量分析为例，借助固相载体，使得分离技术能够应用在组分目标以及复杂样品基体之中，满足对痕量组分以及微量组分进行分析和监测的需要，提高测定的选择性和灵敏度。随着顺序注射和流动注射分析广泛应用在样品预处理上，采用固相表面荧光技术能够提出痕量药物的定量信息。

1 直接固相表面荧光法

将药物样品溶液点加在固体的基质上，基本操作包括，在荧光仪上直接测定残留在固相基质表面的荧光光谱，设定为目标组分，进行定量和定性的分析[1]。常用的固相载体，包含滤纸、纤维素、聚氯乙烯等颗粒。采用直接固相表面荧光进行样品的测定，操作简单，分析的费用较低，样品的消耗量小，适用于大批量的样品监测。对于生物样品四环素的含量，采用固相表面荧光分析的方法，将微量的药物样品1-UL放入加样器中，经过NAOH处理后，将样品点加在硅胶G板上。能够准确地定量分析四环素的样品的含量再10.2～1.0 ng之间。经过研究发现，常规固体的基质，包括纤维素、硅胶等，表面的卡巴咪嗪是不发射荧光的，但是相同氨基基团的尼龙膜的表面却能够发射强烈的荧光。因此，采用固相表面荧光分析的方法可以用于药物试剂以及血清样品的分析。也可以应用在薄层色谱分离之后的荧光斑点检测之中。例如将丝帕沙星和氟罗沙星在硅胶板上进行荧光密度扫描，分离之后得到的检测结果在0.5～85 ng以及0.5～100 ng之间。

2 固相表面荧光法与固相萃取分离富集联用

固相表面荧光法与固相萃取分离富集联用是进行痕量药物组分分析的方法，传统的固相萃取操作是对于目标药物进行定量和定性的检测，但是固相基质表面洗脱不完全的话，可能出产生结果的误差，而且大量的洗脱剂会降解药物的祖坟，使得药物分子结构发生了转变，导致了分析结果出现了失真[2]。采用固相表面荧光法与固相萃取分离富集联用的使用方法，可以避免溶剂效应，减少分析过程中样品的损失，而且有利于待测过程中，提高分析结果的准确性。

选择合适的固相材料是这一方法的关键。在进行药物组分的富集过程中，对于固体基质表面进行室温的荧光检测，例如对诺氟沙星进行样品富集分离后，对固相表面荧光强度进行测定，可以精确测定血样和尿样中的诺氟沙星含量。此测定方法，检出的数量级比HPLC-FD法要有所降低。而采用针筒注射器将样品溶液率进行荧光基质的检测，也能保证灵敏度。

采用固相萃取分离富集与固相表面荧光联用的技术，是在无法采用常规荧光方法的前提下进行检测的方法。利用该方法对速尿灵进行检测，使用尼龙膜将药物祖坟的样品溶液进行检测，阿米洛利被尼龙膜进行富集，速尿灵被保留在滤液中。直接检测的结果显示荧光发射强度增强，同浓度的阿米洛利阿米洛利在溶液中检测不到荧光反射峰。最终的结果，阿米洛利的富集倍率可以达到1500倍，对于痕量阿米洛利的分析测定非常适用。

3 在线固相表面荧光分析法

采用在线固相表面分析的方法，具有常规固相表面荧光分析法不具备的优势。由于常规的方法操作中具有不连续性。分析的结果往往会出现重现性，因此，在线化和自动化能够让流动注射和顺序注射更加方便地进行。显著提高分析过程的速度和可靠性。经过监测，对于氨和尿素的分析监测，能够保证粒径均一的固相基质能够填入流通池中，具体操作的装置被成为在线固相表面荧光检测装置，步骤为：目标组分使用原位固相光谱进行检测，采用自动化程度较高的分析方法，分离基体和目标组分。缩短分析时间，降低样品消耗，实现固相基质材料在流动分析系统中的再生和循环利用，提高分析过程的自动化程度[3]。

4 结 语

固相基质材料的合理选择，为固相表面荧光分析以及联用技术提供了支持[4]。当前，采用的材料包括硅胶、尼龙膜等，对于药物组分的分析较为有限。因此，未来应多多开发新型的固相基质材料，能够更好地合成光学透明度，对药物进行选择性吸附。同时，提高基质材料的化学改性以及进行表面的修饰，降低其荧光背景，也是拓展药物分析领域中固相表面荧光分析方法功能的途径。采用这种方法运用到的检测装置要求能够完成检测、富集和分离，应对复杂的样品基体。同时，发展在线分析模式，增强增敏分析和现场快速检测技术也是当务之急。相信随着在线液流操控技术以及可更新表面技术的拓展，更多药物样品以及试剂的检测，将通过固相表面荧光分析的方法获得更为精确的结果。

[1] 陈 剑.尼龙6纳米纤维膜的制备及在水体多环芳烃快速检测中的应用[D].扬州大学,2016.

[2] 陈 瑶.新型光谱定量分析模型及其在复杂多相体系中的应用研究[D].湖南大学,2015.

[3] 杨 静.纳米材料用于有机污染物的磁固相萃取和光催化降解[D].南京大学,2014.

[4] 张 普.银、金纳米团簇的合成及其在生化分析中的应用研究[D].西南大学,2014.