可溶性髓样细胞触发受体-1与自发性腹膜炎肠黏膜通透性的关系

张晓苹，赵宏军，马阿火，秦月花，孙爱静，王晓丽，王兴木

论著

可溶性髓样细胞触发受体-1与自发性腹膜炎肠黏膜通透性的关系

张晓苹1，赵宏军2，马阿火1，秦月花1，孙爱静3，王晓丽1，王兴木3

目的：探讨可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)表达和肝硬化自发性细菌性腹膜炎(SBP)患者肠黏膜通透性的关系。方法：将23例肝硬化腹水并发SBP患者作为SBP组，33例肝硬化腹水患者作为非SBP组，20例健康体检者作为健康对照组，检测血清和腹水sTREM-1的表达水平，并计算尿乳果糖排泄率与甘露醇排泄率比值(LAC/MAN)，探讨sTREM-1及LAC/ MAN在上述患者(人群)中有无差别及其相关性。结果：SBP组血清及腹水sTREM-1的表达分别为（217.28±87.65）pg/mL和（218.76±69.38）pg/mL，均高于非SBP组（55.51±14.28）pg/mL和（75.98±21.57）pg/mL(P＜0.05)；SBP组血清及腹水sTREM-1值与LAC/MAN比值呈正相关(r血清=0.518，r腹水=0.527，P＜0.05)，血清及腹水sTREM-1值与Child-Pugh评分呈正相关(r血清= 0.791，r腹水=851，P＜0.05)。结论：sTREM-1可增加自发性腹膜炎患者的肠黏膜通透性，而且与肠黏膜通透性损伤程度及肝功能损害相关。

可溶性髓样细胞触发受体-1；自发性细菌性腹膜炎；肠黏膜通透性

自发性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis，SBP)是肝硬化常见的并发症，肠黏膜屏障功能受损、通透性增加导致肠细菌移位，是肝硬化门静脉高压患者并发自发性腹膜炎的主要致病机制[1]，检测肝硬化患者肠黏膜屏障的损伤有无及其程度，对于SBP的早期诊断具有重要意义。可溶性髓样细胞触发受体-1(soluble triggering receptors expressed by myeloid cell-1,sTREM-1)是近来发现的表达于髓样细胞表面的免疫球蛋白超家族活化受体，其活化能促进炎性介质如TNF-ɑ、IL-6、IL-8等的大量产生[2]，是炎症性疾病的重要标志物，与C-反应蛋白、降钙素原等炎症指标相比，sTREM-1与炎症的严重程度有更好的相关性，可用于评价疗效和预后[3-4]。有研究表明，sTREM-1促进胰腺炎相关的肠黏膜屏障功能的损害[5-6]。本研究选取2013年6月—2014年12月我院消化内科收治的肝硬化腹水患者，23例并发SBP者作为SBP组，同期住院的肝硬化腹水未并发SBP的33例作为非SBP组，检测其血清及腹水sTREM-1在肝硬化自发性腹膜炎患者中的变化及与肠黏膜通透性改变的相关性。

1 资料与方法

1.1 病例选择 56例患者入选，SBP组23例，非SBP组33例，两组性别、年龄、肝硬化病因及Child-Pugh评分等方面无显著性差异。健康体检者20例。3组一般情况如表1。肝硬化符合2000年西安会议《病毒性肝炎防治方案》的诊断标准[7]，SBP参照2000年国际腹水俱乐部制定的诊断标准[8]。排除标准：（1)年龄＜18岁。（2)结核性、肿瘤性腹腔积液或继发性腹膜炎。（3)合并恶性肿瘤。（4)2周内使用过抗生素。均签署知情同意书，经医院伦理委员会批准。

表1 3组一般临床特征比较(n，)

表1 3组一般临床特征比较(n，)

组别SBP组非SBP组对照组n 23 33 20性别(男/女) 14/9 23/10 12/8年龄(岁) 47.5±12.2 45.3±11.6 52.1±10.4病因(乙肝/丙肝/酒精/其他) 11/5/4/3 17/3/8/5 Child-Pugh评分(A/B/C) 2/13/8 2/17/14

1.2 标本留取 入院24 h内及治疗后1周留取标本(SBP患者经过护肝、利尿、抗生素等治疗1周，非SBP患者经过一般护肝、利尿等治疗1周)。禁食8 h。次日清晨空腹采静脉血，离心取血清，于-80℃低温冰箱保存，用于sTREM-1的检测。采血同日行腹腔穿刺，留取腹水进行腹水多形核细胞计数、细菌培养及sTREM-1检测。对照组于清晨空腹采静脉血留取标本。

1.3 检测方法 (1)sTREM-1检测采用酶联免疫吸附法。sTREM-1 ELISA试剂盒购自南京森贝伽生物科技有限公司。显色基质偶氮法试剂盒购自上海市医学化验所。所有操作严格按说明书进行。(2)尿乳果糖/甘露醇排泄率比值测定（LAC/MAN）。患者禁食8 h，于次日清晨空腹口服乳果糖(LAC)、甘露醇(MAN)及生理盐水混合液50 mL(含5 g甘露醇、10 g乳果糖)。收集随后6 h尿液，混匀计总量，采用高压液相色谱仪检测尿中LAC、MAN浓度。计算相应尿LAC排泄率与MAN排泄率比值(LAC/MAN),此比值代表肠黏膜通透性水平。（3）血清、腹水hsCRP检测采用酶联免疫吸附法；TNFα采用放射免疫法测定；IL-8采用免疫透射比浊法进行测定。测定方法严格按试剂盒操作流程说明进行。

1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0统计学软件进行数据处理，计量资料用均数±标准差表示，两组间比较采用两独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，sTREM与LAC/MAN的关系采用Pearson相关分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清sTREM-1水平 SBP组为(217.28± 87.65)pg/mL，显著高于非SBP组(55.51±14.28)pg/ mL和正常对照组(43.99±12.89)pg/mL(P＜0.001)。非SBP组血清sTREM-1浓度与正常对照组无差异(P＞0.05)。

2.2 腹水sTREM-1水平 SBP组为(218.76± 69.38)pg/mL，显著高于非SBP组(75.98±21.57)pg/mL (P＜0.001)。

2.3 治疗前后sTREM-1水平 SBP组治疗1周后，血清sTREM-1从治疗前的(217.28±87.65)pg/mL下降至(52.02±16.36)pg/mL(P＜0.05)，腹水sTREM-1从治疗前的(218.76±69.38)pg/mL下降至(74.07± 25.81)pg/mL(P＜0.001)。非SBP组血清sTREM-1、腹水sTREM-1在治疗前后无明显变化(P＞0.05)，见表2。

2.4 尿LAC/MAN比值 SBP组尿LAC%、LAC/MAN比值显著高于非SBP组及对照组(P＜0.001)，非SBP组尿LAC%、LAC/MAN比值显著高于对照组(P＜0.05)。SBP组及非SBP组尿MAN%较对照组均降低(P＜0.05)。治疗1周后，SBP组尿LAC%、LAC/ MAN比值较治疗前明显下降(P＜0.001)，尿MAN%无明显变化(P＞0.05)；非SBP组尿LAC%、MAN%、LAC/MAN比值在治疗前后的变化无统计学意义 (P均＞0.05)。见表3。

表2 两组患者sTREM-1水平表达在治疗前后的变化(，pg/mL)

表2 两组患者sTREM-1水平表达在治疗前后的变化(，pg/mL)

注：与非SBP组同时间点比较，aP＜0.05；与同组治疗前比较，bP＜0.05;与对照组比较，cP＜0.05

标本血清腹水对照组12.11±2.26 SBP组治疗前217.28±87.65a、c218.76±69.38a治疗后52.02±16.36b、c74.07±25.81b非SBP组治疗前55.51±14.28c75.98±21.57治疗后49.82±17.51c78.35±21.04

表3 3组尿LAC%、MAN%、LAC/MAN比值在治疗前后的变化()

表3 3组尿LAC%、MAN%、LAC/MAN比值在治疗前后的变化()

注：与非SBP组同时间点比较，aP＜0.05；与同组治疗前比较，bP＜0.05；与对照组比较，cP＜0.05

LAC（%）MAN（%）LAC/MAN SBP组治疗前0.726±0.02a、c7.420±0.01c0.100±0.013a、c治疗后0.502±0.02b、c7.680±0.60c0.06±0.004b、c非SBP组治疗前0.466±0.05c7.310±0.07c0.072±0.006c治疗后0.43±0.02c7.300±0.50c0.05±0.006c对照组0.180±0.02 8.310±0.60 0.022±0.004

2.5 sTREM-1与hsCRP,TNFα，IL-8平行检测的关系 SBP组血清和腹水中sTREM-1、hsCRP、TNF α和IL-8浓度见表4。SBP患者腹水和血清中hsCRP和TNFα水平存在显著差异（P＜0.05）；而腹水和血清中sTREM-1和IL-8无统计学差异(P＞0.05)。

表4 SBP组患者血清与腹水中TREM-1、hsCRP、TNFα和IL-8平行检测的关系()

表4 SBP组患者血清与腹水中TREM-1、hsCRP、TNFα和IL-8平行检测的关系()

注：与血清检测值比较，aP＜0.05

标本血清腹水sTREM-1(pg/mL) 217.28±87.65 218.76±69.38 hsCRP(mg/L) 13.21±4.41 18.56±5.17aTNFα(ng/mL) 106.36±15.45 156.87±18.65aIL-8(pg/dL) 50.33±15.48 53.67±12.65

2.6 sTERM-1与尿LAC/MAN相关性 Pearson相关分析显示，SBP组血清sTREM-1与尿LAC/MAN比值呈正相关(r=0.518,P＜0.05)，腹水sTREM-1与尿LAC/MAN比值呈正相关(r=0.527，P＜0.05)。见图1。相关分析发现，血清sTREM-1与Child-Pugh评分呈正相关(r=0.791,P＜0.05)，腹水sTREM-1与Child-Pugh评分呈正相关(r=0.851, P＜0.05)。

图1 sTERM-1与LAC/MAN相关性散点图

3 讨论

肝硬化失代偿期患者多处于门静脉高阻力、高动力循环状态。由于其独特的血流动力学改变,使得肠微循环发生改变，肠黏膜过度充血、淤血发生缺血、缺氧、水肿、糜烂，导致肝硬化患者肠黏膜屏障破坏、肠通透性增加[9]。目前多项实验及临床研究表明,肝硬化门脉高压患者肠黏膜通透性会增加，肠黏膜通透性的改变可能参与了肝硬化SBP等严重并发症的病理生理过程[10-11]。

LAC和MAN均不在体内代谢，以原型的方式从尿中排出，通过尿LAC/MAN比值的测定可反应肠黏膜通透性的变化，已被广泛应用于肝硬化、急性胰腺炎、肠梗阻、烫伤、烧伤等疾病所致肠黏膜通透性的研究中[12-13]。但因其标本的留取及检测均较复杂，目前主要运用于科研，在肝硬化患者的临床治疗中难以常规应用[14]。本研究发现，肝硬化SBP组、非SBP组病人尿LAC/MAN明显增高，且SBP组又高于非SBP组，提示肠黏膜通透性的改变与肝硬化SBP的发生相关。TREM-1是一种细胞膜受体，属于免疫球蛋白超家族[15]，选择性地表达于成熟单核-巨噬细胞、中心粒细胞等髓样细胞表面，能提高促炎介质的产生，并抑制抗炎介质的表达[16-17]。sTREM-1为TREM-1的可溶性形式，在机体感染过程中能够释放于体液或血液，能够反映感染的严重程度，并与患者的预后相关[18-19]。有研究发现，sTREM-1在脓毒血症的诊断及严重程度的判断上优于CRP和PCT[20]。有文献提及，sTREM-1在继发性腹膜炎中升高，用于判断腹腔手术后感染引起的继发性腹膜炎[21]。本研究中，肝硬化SBP患者血清及腹水中的sTREM-1浓度均显著高于非SBP组、对照组，而非SBP组的血清sTREM-1浓度与健康对照组无明显差异。经过抗感染治疗1周后，SBP组血清及腹水sTREM-1均明显下降。提示血清及腹水sTREM-1水平的升高是反映肝硬化腹水合并SBP的灵敏指标。另外本研究发现，血清及腹水中的sTREM-1浓度均与尿LAC/MAN比值呈正相关，其机制可能是促进炎性介质TNFα、IL-6的分泌增多，增加肠黏膜的通透性，导致肠源性内毒素血症，或刺激腹腔局部巨噬细胞直接分泌有关。因此，血清及腹水中sTREM-1水平有助于肝硬化SBP的诊断及治疗效果的监测，可能与其增加肝硬化患者肠黏膜通透性有关。

经相关分析发现，血清及腹水中的sTREM-水平与肝硬化患者的Child-Pugh评分呈正相关。提示随着sTREM-1水平的升高，肝功能损害加重，肠黏膜通透性也增加。因此，如患者肠黏膜通透性升高，提示患者肝功能损害加重，预后不佳，通过检测血清及腹水的sTREM-1水平可以及早发现及干预。依据欧洲肝病年会SBP共识文件制定的标准,患者腹水感染经抗生素治疗控制后,其肠黏膜通透性仅能下降至相当于非SBP组水平,这可能是部分SBP患者感染控制后预后仍差的原因所在。在治疗上,通过改善肠黏膜通透性是否可以改善肝硬化SBP患者的预后,是否可以成为治疗SBP的重要手段之一,有待进一步深入研究。

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（收稿：2016-06-06 修回：2016-10-20）

（责任编辑 刘洪斌 屈振亮）

Association of Soluble Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cell-1 with Intestinal Mucosal Perme-ability in Patients with Spontaneous Bacterial Peritonitis

ZHANG Xiao-ping，ZHAO Hong-jun，MAA-huo,et al. Department of Gastroenterology,Shaoxing People's Hospital of Zhejiang Province,Shaoxing (312000),China

ObjectiveTo investigate association of soluble triggering receptors expressed by myeloid cell-1 (sTREM-1)on intestinal mucosal permeability in cirrhotic patients with spontaneous bacterial peritonitis(SBP).MethodsTwenty-three patients with SBP were taken as SBP group,the concurrent 33 cirrhotic ascites patients without SBP were taken as non-SBP group,and 20 healthy cases as healthy control group.The serum and ascitic fluid levels of sTREM-1 were measured,the levels of urinary excretion of LAC/MAN ratios were calculated.ResultsThe sTREM-1 concentration of(217.28±87.65)pg/mL in serum and(218.76±69.38)pg/mL in ascites in SBP group were both higher than those in non-SBP group[(55.51±14.28)pg/mL,(75.98±21.57)pg/mL, respectively]with statistical differences between the two groups(P＜0.05).The levels of the serum and ascitic fluid sTREM-1 had significantly correlated with the levels of urinary excretion of LAC/MAN ratios(rserum=0.518，rascites=0.527，P＜0.05)，and the levels of the serum and ascitic fluid sTREM-1 had significantly correlated with Child-Pugh classification(rserum=0.791，rascites=851).ConclusionsTREM-1 may promote intestinal mucosal permeability in patients with SBP,and is also associated with the degree of intestinal permeability damage and impaired liver function.

Soluble triggering receptor expressed on myeloid cell-1;spontaneous bacterial peritonitis;intestinal mucosal permeability

R656.7

A

1007-6948(2017)01-0003-04

10.3969/j.issn.1007-6948.2017.01.001

浙江省绍兴市科技局基金项目资助（2013B70078）

浙江省绍兴市人民医院1.消化内科;2.神经内科;3.中心实验室（绍兴 312000）

张晓苹，E-mail：xpzhang_sx@126.com