体检人群中蛋白芯片法多肿瘤标志物筛查的临床意义

韩伟平，马 荣

(大连医科大学附属第二医院 检验科，辽宁 大连 116027)

论 著

体检人群中蛋白芯片法多肿瘤标志物筛查的临床意义

韩伟平，马 荣

(大连医科大学附属第二医院 检验科，辽宁 大连 116027)

目的 探讨体检人群中芯片法多肿瘤标志物筛查的临床意义。方法 2015年3月至2015年9月大连医科大学附属第二医院体检中心健康体检者11156名。采集受检者静脉血清进行蛋白芯片法多肿瘤标志物的检测，检测项目为AFP，CEA，CA12-5，CA15-3，CA19-9，CA24-2，NSE，PSA，Free-PSA，β-HCG，GH，Ferritin 12项常见肿瘤标志物。选用CobasE411电化学发光仪作为金标准对于阳性检测结果进行单个项目肿瘤标志物检测复查，比较两种检测方法的结果。对于阳性检测结果患者召回做病理学和影像学等进一步检查以明确诊断。结果 11156名体检者中蛋白芯片法检测出肿瘤标志物阳性者有246名，阳性率为2.20%。单个肿瘤标志物CobasE411电化学发光仪复查结果阳性233例，真阳性率为94.72%。其中33例经病理学、影像学等检查确定为早期或中期肿瘤，肿瘤总检出率为0.29%。结论 体检人群中蛋白芯片法多肿瘤标志物筛查有一定的阳性率，肿瘤标志物阳性的高危人群应定期体检监测相关指标并咨询专业临床医师，做到早发现早治疗。

蛋白芯片技术;多肿瘤标志物;体格检查;肿瘤

肿瘤性疾病因其极高的死亡率成为威胁人类生命健康安全的重要原因。由于其发病的隐蔽性和症状的不易察觉性，肿瘤常常难于早期发现，而一经发现已经是晚期，往往已错过最佳治疗时间，因此，肿瘤的早期诊断和治疗对于肿瘤的预后至关重要。肿瘤标志物(tumor maker,TM)是由肿瘤细胞的基因表达或由机体对肿瘤的免疫反应而异常产生或升高的一类物质。这类物质不存在于正常成人组织(或含量很低)，而是在分化异常的肿瘤组织中的含量明显增高，因而可以作为肿瘤早期诊断的重要参考指标。近年来多位学者研究表明多肿瘤标志物联合检测在一定程度上提高了对肿瘤早期诊断的灵敏度和特异度[1]。目前，多肿瘤标志物联合检测结合具有高通量、微型化、自动化的蛋白芯片技术被应用于肿瘤早期诊断中，本实验拟针对多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统(上海数康生物科技有限公司研制)在我院健康体检人群筛查结果进行分析，并对阳性个体进行追踪随访，探讨健康体检人群中蛋白芯片法多肿瘤标志物筛查对恶性肿瘤早期诊断的临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象

2015年3月至2015年9月大连医科大学附属第二医院体检中心健康体检者11156名，年龄25～80岁，平均45.2岁。

1.2 试剂和仪器

上海数康生物科技有限公司研制生产的HD-2001A型系列生物芯片检测仪和多肿瘤标志物蛋白芯片检测试剂盒；瑞士罗氏公司生产的CobasE411电化学发光仪及其配套试剂盒。

1.3 方 法

多肿瘤标志物蛋白芯片法以化学发光酶联免疫方法为基础，采集受检者静脉血离心后留取血清进行蛋白芯片法多肿瘤标志物的检测，检测项目为AFP,CEA,CA12-5,CA15-3，CA19-9，CA24-2，NSE, PSA,Free-PSA, β-HCG,HGH, Ferrition 12项常见肿瘤标志物。 对于检测结果阳性者采用CobasE411电化学发光仪进行单个项目肿瘤标志物检测复查，并与芯片法结果进行比对分析。对于高度疑似病例进行随访，做病理学和影像学等进一步检查以明确诊断。各项检测均严格按照说明书进行。

1.4 结果判断

上海数康蛋白芯片12项肿瘤标志物正常参考值范围,见表1。研究针对Ferritin单项指标升高无特殊意义不计入阳性，其升高临床意义需结合其他指标做出判断。其他肿瘤标志物指标检测超过正常参考值范围即诊断为阳性。对于经蛋白芯片法测得阳性标本进行CobasE411电化学发光仪单个项目肿瘤标志物检测复查结果超出其参考值范围者记为真阳性。在单个肿瘤标志物检测的正常参考值范围中，CEA、CA-125、CA19-9、CA24-2、Free-PSA、β-HCG、GH、Ferritin 8项正常参考值范围与蛋白芯片法相同， AFP<9 μg/L，CA15-3<25 KU/L，PSA<4 μg/L， NSE<16.3 μg/L，为正常参考值范围。

表1 12项肿瘤标志物蛋白芯片正常参考值范围

Tab 1 Normal reference range of the 12 tumor markers on the protein chip

肿瘤标志物 参考临界值 AFP(μg/L)20CEA(μg/L)5NSE(μg/L)13CA12-5(KU/L)35CA15-3(KU/L)35CA19-9(KU/L)35CA24-2(KU/L)20PSA(μg/L)5Free-PSA(μg/L)1β-HCG(IU/L)3GH(μg/L)7.5Ferritin**

**Ferritin<322 μg/L(男性)/ <219 μg/L(女性)

1.5 统计学方法

采用 SPSS 17.0 软件进行统计学分析。定性变量统计描述采用百分比和频数。

2 结 果

2.1 蛋白芯片法多肿瘤标志物检出阳性结果与CobasE411电化学发光仪单个肿瘤标志物检测结果比较

蛋白芯片法检测超出正常参考值范围选用CobasE411电化学发光仪进行单个项目肿瘤标志物检测复查者共246例。其中蛋白芯片法与单个肿瘤标志物检测结果13例存在显著差异，而两者结果一致即真阳性者233例(94.72%)。蛋白芯片法多肿瘤标志物检出阳性结果与单个肿瘤标志物检测结果比较不一致的具体情况见表2。

2.2 确诊患者蛋白芯片法多肿瘤标志物的检测结果

综合考虑体检者蛋白芯片法肿瘤标志物测定结果和CobasE411电化学发光仪测定结果，筛选出的233例阳性检出者进行临床随访，利用影像学、病理学等检测手段对于高度疑似病例进一步确诊，其中确诊为中早期肿瘤的有33例，占全部体检人群的0.29%，其中男性18例，女性15例。

表2 13例蛋白芯片法多肿瘤标志物检出阳性结果与化学发光法单个肿瘤标志物检测结果比较

Tab 2 Comparison of positive results of 13 tumor markers detected by protein chip method and the results of single tumor marker detected by chemiluminescence

3 讨 论

随着临床医学对恶性肿瘤认识的提高以及人类生存环境的不断恶化，临床发生并确诊的恶性肿瘤患者越来越多。恶性肿瘤的早发现早诊断对于肿瘤患者有着越来越重大的意义。现在临床生物医学研究提出的肿瘤标志物检测为恶性肿瘤的早期筛查、诊断、治疗及预后观察提供了更好的方法和手段。与酶联免疫分析、放射免疫分析等传统的肿瘤标志物检测方法相比较，由上海数康公司研发生产的多肿瘤标志物(tumor maker,TM)蛋白芯片以微阵列原理为基础,而化学发光免疫膜技术结合计算机图像分析方法被应用于多肿瘤标志物蛋白芯片能够达到并行性联合检测和高通量综合分析,使肿瘤诊断的敏感性和特异性显著提高[3]。早期无症状肿瘤患者血清中的多肿瘤标志物可被蛋白芯片集成在模块上预设的12项TM的单克隆抗体捕获，然后利用生物芯片技术并行检测能力和化学发光法进行定量分析，一次检测获得12项指标的检测值，从而达到在健康体检人群中对早期肿瘤患者进行筛查诊断的目的。该检测系统将12项指标联合检测，所需的样本量少，检查创伤小，并且在一定程度上弥补了单项指标检测TM存在的灵敏度低、特异性差、漏检率高等问题[4]，提高了辅助诊断的准确率，对体检人群中无症状患者的早期筛查有重要意义。

本文对大连医科大学附属第二医院体检中心11156例健康体检者静脉血清中肿瘤标志物含量的检测结果进行分析。结果表明，11156名体检者中蛋白芯片法检测出肿瘤标志物阳性者有246名，阳性率为2.20%。对于蛋白芯片法检测结果阳性者246例选用CobasE411电化学发光仪进行单个项目肿瘤标志物检测复查。其中蛋白芯片法检测结果与单个肿瘤标志物检测结果仅13例存在显著差异，而两者结果一致即真阳性的有233例，真阳性在全部阳性结果中所占比例为94.72%。蛋白芯片法肿瘤标志物检测结果有很高的真阳性率即有较高的临床参考价值。但是由于蛋白芯片法主要针对的是健康体检人群，因此部分肿瘤标志物的检测浓度范围相对于单项肿瘤标志物检测低，因此，对于蛋白芯片法测得的某种肿瘤标志物高出参考范围较多者，若想获得其较准确的检测值需进一步做单项肿瘤标志物检测。而蛋白芯片法也由于这一原因，不宜用于已确诊的肿瘤患者肿瘤标志物的检测。综合考虑体检者蛋白芯片法肿瘤标志物测定结果和CobasE411电化学发光仪测定结果，筛选出的233例以上真阳性检出者进行临床随访，利用影像学、病理学等检测手段对于高度疑似病例进一步确诊，其中确诊为中早期肿瘤的有33例，占全部体检人群的0.29%，其中男性18例，女性15例。每一例肿瘤患者其异常肿瘤标志物均为多种，因而，多项肿瘤标志物联合检测对于健康体检人群恶性肿瘤筛查相对单项更有意义[5-6]。

本研究对蛋白芯片法测多肿瘤标志物在体检人群中的阳性检出率做了较为全面的研究，并且根据其结果和单个项目肿瘤标志物的复查结果对高危人群进行追踪、随访、确诊。结果表明，蛋白芯片法更适合多肿瘤标志物在体检人群中进行普查，对于早期无症状肿瘤患者有较好的筛查作用，一次可获取12项指标，实现同时对多种肿瘤标志物进行检测，且具有创伤小、经济实惠等优点。对于无症状早期癌症患者有十分高的早期诊断价值。对于体检人群中蛋白芯片法多肿瘤标志物筛查出的高危人群配合CT、B超、病理检查等进一步检测以确诊，同时配合专业医生为阳性检出者提供咨询、随访等帮助，从而更好的达到早期发现、早期治疗的目的。

[1] 陈红波. 肿瘤标志物检测在临床上的应用价值[J]. 中国实用医药, 2009, 4(18):128-129.

[2] Lund H, Snilsberg A H, Paus E, et al. Sports drug testing using immuno-MS: clinical study comprising administration of human chorionic gonadotropin to males[J]. Anal Bioanal Chem, 2013, 405(5):1569-1576.

[3] 张湘瑜, 王艳姣. C-12多肿瘤标志物蛋白芯片对老年肺癌的诊断价值[J]. 中国老年学杂志, 2009, 29(9):1108-1110.

[4] 梁茱, 王海枫, 吴爱祝,等. 多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在肺癌诊断中的临床意义[J]. 南方医科大学学报, 2010, 30(11):2516-2518.

[5] Lu W, Yuan H. Investigating waste reduction potential in the upstream processes of offshore prefabrication construction[J]. Cancer Res, 2005, 65(22):10613-10622.

[6] 齐军. 蛋白芯片技术及在肿瘤实验室诊断中的应用现状[J]. 中华检验医学杂志, 2003, 26(10):639-640.

Clinical significance of multi-tumor marker protein chip screening in healthy population

HAN Weiping, MA Rong

(DepartmentofClinicalLaboratory,theSecondAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116027,China)

Objective To discuss the clinical significance of multi-tumor markers protein chip screening during regular check-up in healthy population . Methods Totally, 11156 healthy volunteers were selected in the Medical center of Second Affiliated Hospital of Dalian Medical University from March,2015 to September 2015, including 5649 men and 5507 women. Venous serum samples of the volunteers were collected and centrifuged for multi-tumor markers Protein chip examination (including AFP, CEA, CA12-5, CA15-3, CA19-9, CA24-2, NSE, PSA, Free-PSA, β-HCG, GH, Ferritin). Positive results of protein chip would be rechecked by single tumor marker technology, which was used as the golden standard. The highly suspected cases were recalled for further pathological examination and imaging studies to confirm the diagnosis. Results Among 11156 blood samples, 246 cases were positive for tumor marker according to protein chip technology with a positive rate of 2.20%. Among the 246 positive cases, 233 cases were positive after single standard technology with a true positive rate of 94.72%. Among them, 33 cases were diagnosed with early cancer by further examination of pathology and imaging studies. Conclusion Multi-tumor markers protein chip screening in healthy population dose have certain positive rate. The tumor markers positive high-risk groups should receive regular medical monitoring for relevant indicators and consult a professional clinician to get early detection and early treatment.

protein chip technology; multi-tumor markers; health examination; tumor

韩伟平(1982-)，女，主管技师。E-mail:hanweiping2000@163.com

马 荣，主任技师。E-mail:772850415@qq.com

10.11724/jdmu.2017.01.17

R737.31

A

1671-7295(2017)01-0074-04

韩伟平，马荣.体检人群中蛋白芯片法多肿瘤标志物筛查的临床意义[J].大连医科大学学报，2017,39(1)：74-77.

2016-10-12；

2016-12-30)