4种药物对乌斑杂交鳢的急性毒性作用

2017-03-01于振海朱永安孟庆磊朱树人王锡荣

江苏农业科学 2017年2期

关键词：敌百虫硫酸铜高锰酸钾

于振海，朱永安，孟庆磊，朱树人，王锡荣

(山东省淡水渔业研究院/山东省淡水水产遗传育种重点实验室，山东济南 250013)

4种药物对乌斑杂交鳢的急性毒性作用

于振海，朱永安，孟庆磊，朱树人，王锡荣

(山东省淡水渔业研究院/山东省淡水水产遗传育种重点实验室，山东济南 250013)

采用半静水式试验方法，在水温(27.1±1.1)℃、pH值8.01±0.12、溶氧(4.9±0.8)mg/L条件下进行敌百虫、高锰酸钾、硫酸铜、甲醛4种渔药对乌斑杂交鳢鱼苗的急性毒性试验。结果显示：4种药物中硫酸铜的96 h半致死质量浓度最低，为1.831 mg/L；甲醛的96 h半致死质量浓度最高，为58.052 mg/L；4种药物的毒性大小依次为硫酸铜>敌百虫>高锰酸钾>甲醛；4种药物的安全质量浓度大小依次为甲醛(27.615 mg/L)>高锰酸钾(1.898 mg/L)>敌百虫(1.012 mg/L)>硫酸铜(0.530 mg/L)。结果表明：4种药物中，敌百虫和甲醛的安全质量浓度高于常规用量，按照常规用量进行病害防治是安全的；高锰酸钾和硫酸铜的安全质量浓度在常规用量范围内，生产中可按照乌斑杂交鳢对药物的安全质量浓度进行病害防治。

乌斑杂交鳢；急性毒性；半致死质量浓度；安全质量浓度

乌斑杂交鳢是以乌鳢(Channaargus)为母本、斑鳢(C.maculata)为父本杂交获得的子一代，具有生长速度快、成活率高、易驯食膨化颗粒饲料等优点[1]。杂交鳢的养殖可改善传统乌鳢养殖造成的环境污染，减少对自然资源的过度利用，稳定养殖成本，提高产量和效益，实现低碳养殖[2]。杂交鳢正在逐渐取代乌鳢成为鳢科鱼类的主要养殖品种[3]。

1 材料与方法

1.1 材料

选取健康、游泳活泼、无病、无伤、无畸形的乌斑杂交鳢鱼苗进行试验，鱼苗体长为(8.5±1.1) cm，体质量为(5.2±0.9) g。试验前，在试验条件下暂养3 d，每天投食1次，于试验开始前24 h停止投食。

1.2 试验条件

试验在规格为60 cm×40 cm×40 cm的白色塑料箱内进行。试验时间为2015年8月2—28日，每个周期为4 d。试验用水为养殖场用深井水，水质符合渔业水质标准(GB 11607—1989)，水温(27.1±1.1)℃、pH值8.01±0.12、溶氧(4.9±0.8)mg/L。每箱盛水30 L，放入8尾鱼苗，每天测量1次水温、pH值、溶解氧。

1.3 试验操作

采用半静态试验，参照卢玲等的方法[6]在室内进行。试验期间不投饵。甲醛具有挥发性，为保证试验药液的质量浓度，每隔24 h更换1次试验药液。于试验开始和结束时分别测定试验容器中受试物的质量浓度。

表1 试验药物的规格与成分

1.3.1 预试验进行预试验以确定正式试验所需的质量浓度范围。每个质量浓度组放入5尾鱼，采用静态方式进行，不设平行组，试验持续48～96 h。每天至少2次记录各容器内的死鱼数，及时取出死鱼。

伴随着广西农业取得较大成就的同时，农业环境如土地、水过度利用和农业污染等问题日益突出，直接影响到农业供给质量，也为乡村振兴战略的实施埋下隐患。

1.3.2 正式试验根据预试验结果，在使鱼全部死亡的最低质量浓度、96 h鱼类全部存活的最高质量浓度之间至少设置5个质量浓度组，以几何级数排布，质量浓度间隔系数 ≤2.2[7]。由预试验得到的4种药物质量浓度见表2。每个质量浓度组设2个平行，每个系列设1个空白对照。将试验溶液调节至相应温度后，从驯养鱼群中随机取鱼并随机迅速放入各试验容器中。同一试验的试验用鱼在30 min内完成分组。

表2 试验药物的质量浓度

分别于24、48、72、96 h检查受试鱼的状况，以试验对象失去活力、对外界刺激无反应为死亡标准[8]。于试验开始后3 h或6 h观察各试验组鱼苗的状况，并记录异常行为。

1.4 数据处理

半致死质量浓度(LC50)、安全质量浓度(SC)采用寇氏法[9]计算，公式为：

logLC50=xm-d(∑p-0.5)；

(1)

SC=B×0.3/(C/B)2。

(2)式(1)中：xm为死亡组最大剂量的对数，LC50为半致死质量浓度(mg/L)，d为相邻质量浓度的对数差，p为各组的死亡率(%)，∑p为各组死亡率之和(%)。式(2)中：SC为安全质量浓度(mg/L)，B为48 hLC50(mg/L)，C为24 hLC50(mg/L)。

2 结果与分析

2.1 试验观察结果

整个试验过程中，空白对照组没有出现死鱼现象，即死亡率为0。敌百虫、高锰酸钾、硫酸铜、甲醛4种药物对乌斑杂交鳢的毒性试验结果见表3。

硫酸铜、高锰酸钾、敌百虫、甲醛最低质量浓度组的96 h死亡率分别为0、6.25%、12.50%、12.50%。4种药物最高质量浓度组的24 h死亡率均为100.00%；高锰酸钾试验组中，7.905、14.057 mg/L质量浓度组的24 h死亡率均达到100.00%(表3)。

表3 各药物对乌斑杂交鳢鱼苗的致死率

乌斑杂交鳢在敌百虫药液中的中毒症状表现为：对外界刺激反应迟缓，上下游窜，逐渐失去平衡，最后死亡并沉于箱底。死亡的乌斑杂交鳢体色发白，体表黏液增多。当质量浓度为10.000 mg/L时，乌斑杂交鳢约于1 h出现中毒症状，约于2 h开始死亡，24 h死亡率达100.00%。质量浓度为 1.000 mg/L 时，乌斑杂交鳢无明显中毒症状，24、48、96 h死亡率分别为0、0、12.50%(表3)。

乌斑杂交鳢在高锰酸钾药液中的中毒症状表现为：不安，反应较剧烈，不停游窜，时而跃出水面，后趋于安静，逐渐失去平衡，直至最后死亡。死亡后的鱼体表皮破损，呈絮状，颜色为紫黑色。高锰酸钾质量浓度为25 mg/L时，鱼苗约于0.5 h出现中毒症状，约于1 h开始死亡，24 h死亡率为100.00%。7.905、14.057、25.000 mg/L质量浓度组的24、48、96 h死亡率均达到100.00%。2.500 mg/L质量浓度组的24、48 h死亡率为0，约于90 h出现死亡，96 h死亡率为6.25%(表3)。

乌斑杂交鳢在低质量浓度硫酸铜药液中最初无明显反应，随着时间的延长逐渐表现出中毒症状，初期失去平衡后能够自行恢复正常姿态，后期彻底失去平衡并沉于箱底。放入高质量浓度组时，反应较为激烈，窜游不安，很快对外界刺激失去反应，最后失去平衡并沉于箱底。当硫酸铜质量浓度为5.000 mg/L时，约于0.5 h出现中毒症状，约于2 h开始死亡，24 h死亡率为100.00%。0.500、0.889 mg/L质量浓度组的24、48 h死亡率均为0，96 h死亡率分别为0、6.25%(表3)。

乌斑杂交鳢在高质量浓度甲醛药液中表现为：焦躁不安，来回游窜，出现浮头现象，初期能对外界刺激作出反应，后期逐渐失去平衡并沉于箱底。死亡后鱼体僵硬，鳃盖扩张，口张开。试验箱中甲醛质量浓度为300.000 mg/L时，鱼苗约于0.2 h开始出现中毒症状，约于0.5 h开始死亡，24 h死亡率达100.00%。122.475、191.683 mg/L质量浓度组的48、96 h死亡率均为100.00%(表3)。

2.2 半致死质量浓度(LD50)和安全质量浓度

由式(1)和式(2)得到4种药物的半致死质量浓度和安全质量浓度(表4)。4种药物的24、48、96 h半致死质量浓度均为24 h>48 h>96 h，4种药物的半致死质量浓度大小依次为甲醛>高锰酸钾>敌百虫>硫酸铜。4种药物的安全质量浓度大小依次为甲醛(27.615 mg/L)>高锰酸钾(1.898 mg/L)>敌百虫(1.012 mg/L)>硫酸铜(0.530 mg/L)。

表4 各药物的半致死质量浓度(LC50)及其95%置信区间、安全质量浓度

3 结论与讨论

3.1 4种药物对乌斑杂交鳢的毒性评价

半致死质量浓度(LC50)用来衡量药物对试验鱼毒性的大小，其值越小则药物毒性越高，其值越大则药物毒性越低[10-11]。以96 h为鱼类急性毒性分级标准，分为极高毒(<1 mg/L)、高毒(1～10 mg/L)、中毒(>10～100 mg/L)、低毒(>100 mg/L)4个等级[7]。本试验中4种药物对乌鳢的 96 h 半致死质量浓度依次为甲醛>高锰酸钾>敌百虫>硫酸铜，药物对乌斑杂交鳢的毒性大小依次为硫酸铜>敌百虫>高锰酸钾>甲醛。试验结果表明，硫酸铜、敌百虫、高锰酸钾是高毒药物，甲醛是中毒药物。

由表3可知，4种药物的24、48、96 h死亡率与质量浓度梯度均呈正相关，表明随着药物质量浓度的增加，药物对试验鱼的毒性效应也相应增加。由表4可知，随着试验的进行，鱼苗24、48、96 h死亡率依次递增，4种药物对乌斑杂交鳢的半致死质量浓度均呈24 h>48 h>96 h的规律，表明随着时间的延长，4种药物对试验鱼的毒性效应相应提高。

3.2 4种药物对乌斑杂交鳢的用药安全

敌百虫为胆碱酯酶抑制剂，能将胆碱酯酶的活性点磷酸化而抑制其活性，因其在鱼体内残留量少、残留时间短而被广泛用于体外寄生甲壳类、单殖吸虫、部分肠内寄生蠕虫的防治，常用剂量为0.2～0.5 mg/L[12]。本试验中，敌百虫对乌斑杂交鳢的安全质量浓度为1.012 mg/L，高于常用剂量，且其在毒性分级标准中属于高毒，因此在乌斑杂交鳢鱼苗养殖过程中可采用该药物进行病害防治。

甲醛具有广谱性杀灭细菌、寄生虫、真菌、芽孢、病毒的作用，已被广泛应用于水生动物疾病防治，且使用剂量较大，常规用量为10～30 mg/L[13]。本试验中甲醛的安全质量浓度为27.615 mg/L，在常规用量范围内，其毒性分级属于中毒，因此可作为乌斑杂交鳢养殖过程中的病害防治药物。甲醛使用成本较高，生产中一般采用浸泡方式防治病害。

高锰酸钾是一种常用的外用消毒药物，具有很强的氧化性，一般作为消毒剂用于细菌、真菌、寄生虫类等疾病的治疗和设施、工具的消毒，生产中的常用遍洒质量浓度为1～2 mg/L[10]。本试验中高锰酸钾对乌斑杂交鳢的安全质量浓度为1.898 mg/L，处于常规用量范围内，因此高锰酸钾可作为乌斑杂交鳢养殖过程中的病害防治药物。

硫酸铜在生产中主要用于杀灭鞭毛虫、车轮虫、斜管虫等寄生虫，对杀灭寄生于鱼体体表及鱼鳃的车轮虫具有独特作用[14]。硫酸铜的常用泼洒质量浓度为0.5～0.7 mg/L[15]。本试验中硫酸铜的安全质量浓度为0.530 mg/L，在常规用量范围内，因此硫酸铜可作为乌斑杂交鳢养殖过程中的病害防治药物。

4种药物中，敌百虫、甲醛的安全质量浓度均高于常规用量，按照常规用量进行病害防治是安全的；高锰酸钾、硫酸铜在常规用量范围内，生产中可按照乌斑杂交鳢对药物的安全质量浓度进行病害防治。在生产中选用药物，不仅要考虑药物的半致死质量浓度和安全质量浓度，还需综合考虑药物的常用质量浓度及用药时间。

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