保肾片中苍术挥发油最佳包合工艺研究

王颖

摘要：目的：保肾片中苍术挥发油的最佳包合工艺及其包合物的稳定性考察。方法：采用正交设计，以挥发油包合率为考察指标优选包合工艺。以苍术素为考察指标，对包合物进行强光照射、高温和高湿等稳定性考察。结果：苍术挥发油的最佳包合工艺为：研磨时间30 min，包合温度30℃，苍术挥发油：β-环糊精为1：8，β-环糊精：纯化水为1：2；在强光、高热、高湿等因素影响下，包合物中苍术素含量没有明显变化。结论：该包合工艺稳定，包合物质量可控。

Abstract： Objective：To optimize the inclusion technology of β-cyclodextrin （β-CD） with volatile oil from Atractylodes lancea in Baoshen Tablets. And to observe the stability of the inclusion compounds. Methods：The orthogonal design was used to optimize the inclusion technology and the inclusion ratio of volatile oil was used as the criteria. The stability test was observed under the condition of intense light， high temperature and humidity with atractylodin as the index. Results：The optimum inclusion conditions were established as follows∶ the inclusion temperature was 30℃ and time was 30min， the ratio of volatile oil to β-CD was 1∶8， and the ratio of β-CD to water was 1∶2. The stability test showed the content of atractylodin has no significant difference. Conclusion：The optimized conclusion technology is stable and the quality of compounds can be controled.

关键词：苍术素；β-CD；包合物；稳定性

Key words： atractylodin；β-cyclodextrin；inclusion compounds；stability

中圖分类号：TQ461 文献标识码：A 文章编号：1006-4311（2017）04-0112-03

0 引言

苍术为菊科植物北苍术的干燥根茎，具有燥湿健脾、祛风散寒、明目之功效，用于风寒感冒、风湿痹痛、水肿、夜盲、脘腹胀满、泄泻、脚气痿痹等病症的缓解与治疗。[1]具有中枢神经抑制、抗病毒、抗胃溃疡、抗缺氧等功效挥发油[2，3]是苍术中一味重要的活性成分。但是这种成分在光、热作用下易挥发，性能不稳定，放置时间越长越容易变质[4-6]。β-环糊精包合中药挥发油可以阻断其与光热的接触，使其保持稳定性能，目前这种方法已在中药制剂领域广泛传播[7-10]。本实验采用正交设计刷选挥发油的最佳包合工艺，并首次对工艺的稳定性进行了研究。

1 实验材料

实验所用仪器、试药详见表1。

2 方法与结果

2.1 苍术挥发油的提取

用蒸汽从适量苍术（制）饮片中提取挥发油[9]，密封存放在棕色试剂瓶中备用。

2.2 苍术挥发油β-CD包合工艺

2.2.1 制备包合物

按照配比要求称量出一定量电费β-CD，与纯化水混合加热至成为混悬液，然后添加苍术挥发油拌制均匀，再通过胶体磨按1500r/min的转速研磨一段时间后将物料取出，静置24h后抽滤，50℃干燥，用无水乙醇洗涤3次，晾干后得到疏松状白色包合物粉剂。

2.2.2 挥发油包合率、空白回收率和包合物收率的测定[11] 精密称取包合物10g，至圆底烧瓶中，加纯化水适量，按2015版《中国药典》附录XD挥发油测定法测定，即得。

空白回收率的测定：精密量取苍术挥发油10ml，置圆底烧瓶中，加纯化水适量，按2015版《中国药典》附录XD 挥发油测定法测定，即得。

空白回收率（%）=收集挥发油量（ml）/加入挥发油投量（ml）×100%

包合率（%）=[包合物中挥发油量/（加入的挥发油量×空白回收率）]×100%

包合物收率=β-CD包合物质量（g）/[β-CD质量（g）+挥发油加入量（g）]×100%

2.2.3 正交试验设计 根据预实验，采用L9（34）正交试验表，以挥发油包合率为考察指标，考察研磨时间、包合温度、挥发油与β-CD的比例及β-CD与水的比例等四个因素，并结合生产实际，每个因素设计3个水平，见表2。

结果表明，以挥发油包合率作为考察指标，研磨时间对挥发油包合率有显著影响，从表3中可知：A2>A3>A1，B3>B2>B1，C2>C1>C3，D3>D2>D1，故最佳包合工艺应为A2B3C2D3，但从K值来看，B2B3数值较为接近，为了提高生产效率，确定A2B2C2D3为苍术挥发油的最佳包合工艺，即最佳研磨时间为30min，包合温度30℃，苍术挥发油：β-CD=1：8，β-CD：纯化水=1：2。

2.3 包合物样品制备

称取160gβ-CD，掺入纯化水320g加热混合搅拌到30℃，使之成为混悬液，再添加20ml苍术挥发油拌制均匀，胶体磨研磨（转速：1500r/min）30min，放出物料，静置24h，抽滤，50℃干燥，无水乙醇洗涤3次，晾干，得白色疏松状包合物粉末163g，包合物收率：90.5%。

2.4 包合物中苍术素含量测定[12]

2.4.1 色谱条件

Agilent 6890气相色谱仪；HP-5石英毛细管色谱柱（5% Phenyl Methyl Siloxane）（30m×0.32mm×0.25μm）；进样口温度：230℃；检测器温度（FID）：240℃；分流比：25∶1；程序升温：初始温度80℃，保持2min，以每分钟20℃升至160℃，保持6min，测定；载气：氮气，流速：1.0ml/min；进样：2μl。

2.4.2 线性关系考察

精密称取苍术素10mg，置100ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度，作为对照品溶液；精密吸取正十五烷100mg，置100ml量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，作为内标溶液；精密吸取对照品溶液0.2，0.5，1.0，2.0，5.0ml置10ml量瓶中，并分别加入内标溶液1ml，最后加乙醇至刻度，混匀，进样测定，以对照品峰面积和内标峰面积比值为纵坐标，对照品浓度与内标浓度比值为横坐标，绘制标准曲线。结果：苍术素浓度在2～50μg·m1-1范围内线性关系良好，其回归方程为Y=3.527X+1.316×10-3，r=0.9998。

2.4.3 苍术挥发油中苍术素的含量测定

精密称取苍术挥发油10mg，置于100ml容量瓶中，用乙醇稀释至刻度。摇匀，精密吸取2.0ml，置10ml容量瓶中，加入内标溶液1ml，加乙醇至刻度，混匀，进样测定。结果苍术挥发油中苍术素的平均含量为20.5%。

2.4.4 包合物中苍术素的含量测定

精密称取包合物1.0g，置于100ml圆底烧瓶中，加入50ml无水乙醇，加热回流1h，放冷，称重，并用无水乙醇补足减失重量，摇匀，过滤；精密吸取2ml过滤液及内标溶液1ml置于10ml容量瓶中，补加乙醇至规定刻度，摇匀，进样测定，计算得包合物中苍术素的平均含量为2.21%，RSD1.2%（n=6）。

2.5 光、热、湿对包合物中挥发油的稳定性的影响研究

2.5.1 抗光性实验

称取苍术挥发油β-CD包合物（2.3项制备样品）和按制备投料比直接混匀所制得的苍术挥发油与β-CD的混合物（以下简称混合物）各若干份，照射10d（强度4000 lx），于0，1，3，6，10d时取样，包合物与混合物外观颜色及性状均没有变化，测定结果见表4。

2.5.2 热稳定性实验

按配比要求分别称取若干份包合物和混合物，分别于静置在40℃、60℃、80℃恒温干燥箱内10d，然后在0，1，3，6，10d时取样测验，得到表5所示测验结果。测验结果表明，发现两种物质的性状和外观颜色都比较稳定，没有任何显著性的变化。

2.5.3 湿稳定性实验 按照配比要求分别称取适量包合物和混合物，静置在相对湿度为75%和92.5%的室温环境下10d，分别在第0，1，3，6，10d時取样，包合物与混合物外观颜色及性状均没有变化，测定结果见表6。

表6结果表明苍术挥发油包合物湿稳定性明显优于苍术挥发油混合物。

3 小结

如超声波法、冷冻干燥法、饱和水溶液法等目前常用的苍术挥发油包合方法大都属于实验室制取的范畴，而实验室制取方法限制因素众多，无法实现规模化生产，这在一定程度上阻碍了其产业化发展路径。

本文基于苍术挥发油的特点所进行的制取方法的研究恰恰适用于产业化生产模式，主要是在确保保肾片产品功效的前提下，用胶体磨法制取苍术挥发油β-CD包合物，同时针对保肾片产品特点科学的采用正交实验法，最终形成了一套适用于规模化生产要求的包合工艺：研磨时间30min，包合温度30℃，苍术挥发油：β-CD=1：8，β-CD：纯化水=1：2。该包合法快速、简便明显优于其他相关文献[13-15]，而以苍术素含量为指标计算的包合率高达85.86%，亦表明该法简便、高效，能够顺利实现产业化生产。稳定性实验结果表明，白色包合物对光、热、湿气具有一定的低于作用，能够有效保持苍术挥发油的稳定功效。

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