干细胞标志物CD133、PSCA和Oct-4在胃癌组织中表达及其临床意义

沈可欣 王亚东 王 芸 张佳宇 谌 通 李永超

(吉林大学中日联谊医院，吉林 长春 130033)

干细胞标志物CD133、PSCA和Oct-4在胃癌组织中表达及其临床意义

沈可欣 王亚东 王 芸1张佳宇 谌 通 李永超

(吉林大学中日联谊医院，吉林 长春 130033)

目的 探讨胃癌组织中肿瘤干细胞标志物CD133、前列腺干细胞抗原(PSCA)和Oct-4的表达情况及其在胃癌中的诊断意义。方法 胃癌根治手术后病例60例，留取胃癌、癌旁组织及正常组织标本，免疫组化法检测组织中CD133、PSCA和Oct-4的表达情况。结果 与正常胃组织相比，癌旁组织组中CD133和Oct-4蛋白的表达水平略有提高(P<0.05)，胃癌组织中CD133和Oct-4蛋白的表达水平显著增高(P<0.01)；正常胃癌组织中PSCA蛋白有明显表达，癌旁组织中仅有少量表达，但是在胃癌组织中没有PSCA蛋白表达。结论 肿瘤干细胞标志物CD133、PSCA和Oct-4联合分析可以作为胃癌的临床诊断的分子标记。

胃癌；CD133；PSCA；Oct-4

癌干细胞是恶性肿瘤发生的启动细胞，其表达数量与肿瘤发生、发展、治疗耐受及疾病预后密切相关。所以，探讨胃癌中肿瘤干细胞的表达情况，有利于了解胃癌的发生、发展程度和提高诊断疾病和判定预后的作用。CD133抗原是鉴定和分离干细胞和祖细胞的重要分子标记〔1〕，同时也有研究认为其可以作为癌症的预后指标〔2〕。前列腺干细胞抗原(PSCA)可在特殊癌症细胞中起到一定的抗癌作用，但是在前列腺癌以及上皮恶性肿瘤中其与肿瘤的进展呈正相关，在其他组织中还没有更好的定位〔3〕。Oct-4在胚胎干细胞和生殖细胞中高表达，也在恶性肿瘤，如精原细胞瘤、中枢系统生殖细胞肿瘤、卵巢无性细胞瘤和胚胎性癌中高表达〔4〕。本研究拟分析胃癌手术患者组织标本中CD133、PSCA和Oct-4的表达及临床意义。

1 材料与方法

1.1 药品及主要试剂 CD133蛋白抗体(美国 Abcam公司)，PSCA蛋白抗体(美国 Abcam公司)，Oct-4蛋白抗体(美国 Abcam 公司)，SP免疫组化试剂盒(Broad Spectrum，博奥森)。

1.2 标本收集 术前和患者充分沟通，签署知情同意书。收集中日联谊医院胃肠外科胃癌根治手术的临床病例60例，留取胃癌、癌旁组织及正常组织标本并分为三组：正常对照组、癌旁组和胃癌组。入选标准：患者术前没有任何基础疾病；没有任何放射性以及重金属工作史；术前没有化疗及放疗史。

1.3 检测方法 通过免疫组化(SP法)检查胃癌组织中CD133、PSCA和OCT-4蛋白表达。每张切片在400×镜下随机选择5个视野，用Motic Image Advanced 3.2图形分析系统对每张免疫组化切片所有阳性细胞进行总的灰度分析。

2 结 果

与正常胃组织相比，胃癌癌旁组中CD133和Oct-4蛋白的表达水平略有提高(P<0.05)，胃癌组织中CD133和Oct-4蛋白的表达水平显著增高(P<0.01)，见图1和图2。正常胃癌组织中PSCA蛋白有明显表达，胃癌癌旁组织中仅有少量表达，在胃癌组织中没有PSCA蛋白表达，见图3。

图2 三组Oct-4蛋白的表达(DAB，×400)

图3 三组PSCA蛋白的表达(DAB，×400)

3 讨 论

现阶段的研究认为胃癌的发病机制与遗传因素、吸烟、幽门螺杆菌感染及饮食相关，近些年提出了“肿瘤干细胞理论”对胃癌的研究进展提供了新的思路，其观点认为在肿瘤中有一小部分具有干细胞特性的肿瘤细胞，其具有侵袭、转移及抵抗化疗的特征，其在适应的环境中可以无限制的进行增值和分化。经过查阅文献，我们发现了现阶段对干细胞的研究主要通过分子标记物对干细胞进行鉴别和分离。本研究在正常组织中，CD133蛋白没有表达，在癌旁组织中其有少量表达，而在癌组织中大量表达，说明在胃癌组织中有胃癌干细胞的表达。陈军〔5〕的研究通过免疫荧光方法也证明了在胃癌中CD133蛋白的高表达，其研究结果与本研究一致。PSCA作为前列腺癌诊断的金指标，近年研究发现其在正常的胃癌组织中有表达，本研究发现，在正常对照组中PSCA有表达，但是在胃癌组中其表达明显降低，所以我们怀疑PSCA可能有抗癌作用。张文涛〔6〕对西北地区胃癌发病风险相关性研究中通过组织芯片技术发现在正常的胃组织中有PSCA的表达，在胃癌组织中表达下调，这同时也说明了PSCA可能对胃癌有抗癌的作用。本研究中我们发现了胃癌组织中Oct-4蛋白高表达，但其在正常组织中没有表达，这说明了胃癌组织中有胃癌干细胞的存在。陈忠〔7〕的研究中也发现了Oct-4蛋白在胃癌组织中高表达，同时其也通过RT-PCR方法检测到了胃癌组织中Oct-4基因的高表达在癌旁组织低表达，所以说Oct-4表达情况与胃癌发生情况相关。

综上，我们发现胃癌组织中CD133、PSCA和Oct-4蛋白表达与胃癌发病情况相关，其可能与胃癌干细胞有关系，将其联合分析可以作为胃癌检测和诊断的分子标记。

1 黄 婧，何爱娜，姚 阳.CD133作为肿瘤干细胞标志物的研究进展〔J〕.癌症进展，2012；9(10)：462-5.

2 Zhao P，Li Y，Lu Y.Aberrant expression of CD 133 protein correlates with Ki-67 expression and is a prognostic marker in gastric adenocarcinoma〔J〕.BMC Cancer,2010;10(1):1-6.

3 Tsang YH，Lamb A，Romero-Gallo J，etal.Helicobacter pylori CagA targets gastric tumor suppressor RUNX3 for proteasome-mediated degradation〔J〕.Oncogene，2010；29：5643-50.

4 Kotoula V，Papamiehos SI，LambroPoulos AF.Revisiting OCT4 expression in peripheral blood mono-nuclear cells〔J〕.Stem Cells，2008；26：290-1.

5 陈 军.胃癌干细胞干性特征及化疗药物对其影响的初步研究〔D〕.重庆第三军医大学，2013.

6 张文涛.前列腺干细胞抗原基因(PSCA)单核苷酸多态性及基因表达与胃癌发病风险的相关性研究〔D〕.西安：第四军医大学，2014.

7 陈 忠.干细胞标记物Oct4、Nanog和ABCG2在胃癌中的检测及诊断意义〔D〕.苏州：江苏大学，2009.

〔2016-06-03修回〕

(编辑 郭 菁)

吉林省卫生厅和财政厅联合课题(3D5140503430)

李永超(1975-)，男，主治医师，主要从事胃肠道肿瘤研究。

沈可欣(1983-)，男，主治医师，主要从事胃肠道肿瘤研究。

R735.2

A

1005-9202(2017)01-0046-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.01.020

1 吉林省肝胆病医院