肥胖症儿童肝纤维化指标与血清GPDA活性变化的研究

谭晓霞，黄珍珍，徐晓红

(丽水市妇幼保健院检验科，浙江 丽水 323000)

肥胖症儿童肝纤维化指标与血清GPDA活性变化的研究

谭晓霞，黄珍珍，徐晓红

(丽水市妇幼保健院检验科，浙江 丽水 323000)

目的 探讨肥胖症儿童肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、血清Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)与血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)活性的变化及其在临床上的应用价值。方法 对2015年6月至2016年2月在丽水市妇幼保健院儿科门诊诊断为肥胖症的159例6～15岁肥胖症儿童(肥胖症组)和42例9～14岁正常健康儿童(正常对照组)进行肝纤维化指标与血清GPDA活性的比较，并对结果进行分析。结果 与正常对照组相比，肥胖症组HA、PCⅢ水平均明显升高(t值分别为7.403、5.405，均P<0.05)，以PCⅢ升高明显；肥胖症组GPDA活性差异有统计学意义(t=8.965，P<0.01)。肥胖症患儿治疗前后GPDA活性、HA及PCⅢ指标比较，各检测项目均出现降低，差异均有统计学意义(t值分别为6.452、5.684、4.369，均P<0.05)。PCⅢ与GPDA呈正相关(r=0.602，P<0.05)。结论 肥胖症儿童GPDA活性与PCⅢ水平的改变是其肝脏病变的早期敏感指标，两者的动态监测，对于诊断、疗效观察有一定的临床意义。

肥胖症；透明质酸；层粘连蛋白；Ⅲ型前胶原肽；胶原；甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶

肥胖症儿童发病率逐年增加是造成青少年无症状转氨酶增高的主要原因，部分可以转化为肝纤维化和肝硬化，甚至终末期肝病[1],肝纤维化为病程发展的重要环节。甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(glycylproline dipeptidyl aminopeptidase,GPDA)是一种二肽氨基肽酶，它广泛存在于肝、肾、唾液腺、结缔组织和血清中。国内外有关研究表明，肝胆疾病患者血清GPDA显著上升[2]。近年来对GPDA的研究报道，以消化系统肿瘤患者GPDA的变化多见，本文对肥胖症患儿肝纤维化指标及GPDA的变化进行研究，对其在临床上的意义进行探讨和分析。

1材料和方法

1.1研究对象

选取2015年6月至2016年2月在丽水市妇幼保健院儿科门诊诊断为肥胖症的儿童共159例为肥胖症组，其中男性97例，女性62例；年龄6～15岁，平均(10.67±2.59)岁；体质量指数(BMI)为(28.26±4.31)kg/m2，其位于2000年全国学生体质调研同年龄同性别第95百分位以上，符合肥胖儿童的诊断标准[3]。同时选取愿意在本院进行治疗的肥胖症患儿43例，进行治疗前后对比。取同期在本院体检中心接受体检的部分健康儿童为正常对照组，按序随机入组，经常规检查排除心、肝、肾、肺等疾病，共42例，其中男性29例，女性13例；年龄9～14岁，平均(11.06±1.29)岁；BMI为(16.97±1.23)kg/m2，其位于2000年全国学生体质调研同年龄同性别第85百分位以下[3]。两组患儿性别构成、平均年龄差异均无统计学意义(均P>0.05)。

1.2检测方法

1.2.1甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的测定

采用连续监测法，即GPDA催化反应底物甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐水解，生成甘氨酰脯氨酸和对硝基苯胺，后者的含量与GPDA活性呈正比。测定试剂盒由温州伊利康公司提供。测定仪器为OLYMPUS AU640全自动生化分析仪。

1.2.2肝纤维化指标的测定

采用放射免疫法，透明质酸(hyaluronic acid，HA)、层粘连蛋白(1aminin，LN)、血清Ⅲ型前胶原肽(serum type Ⅲprocollagen，PCⅢ)、Ⅳ型胶原(type Ⅳcollagen，CⅣ)试剂盒均购自上海海军研究所。测定仪器为中佳光电GC-1200γ放射免疫计数器。

1.3统计学方法

采用SPSS 19.0软件分析数据，呈偏态分布的计量资料用中位数表示，组间比较用非参数检验的两个独立样本的Mann-WhitneyU检验；血清GPDA与肝纤维化指标之间的相关性用Pearson相关分析,以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1两组儿童肝纤维化指标与甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶活性的比较

与正常对照组相比，肥胖症组的HA、PCⅢ水平升高明显(均P<0.05)，尤其以PCⅢ明显；肥胖症组GPDA活性差异有统计学意义(P<0.01),见表1。

表1 两组儿童肝纤维化指标与GPDA活性比较±S)

2.2肥胖症患儿治疗前后甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶活性、透明质酸与Ⅲ型前胶原肽的比较

选取的43例本院治疗肥胖症患儿治疗后GPDA活性、HA及PCⅢ指标均有所降低，且差异均有统计学意义(均P<0.05)，见表2。

2.3相关结果分析

肥胖症患儿GPDA与各肝纤维化指标HA、LN、PCⅢ、CⅣ经相关性分析显示均呈正相关(r值分别为0.348、0.113、0.602、0.144，均P<0.05)；其中与PCⅢ相关性较强，有一定的临床意义，进一步选择分析GPDA与PCⅢ间的相关性，回归方程为：Y=26.307X-61.782，r=0.602，P<0.05。

3讨论

肥胖的真正含义是人体内脂肪细胞增多或细胞体积增大，或者两种情况同时存在，导致体内脂肪成分显著增高。有研究表明，儿童、青少年肥胖很有可能延续至成年人，并且与许多成年期慢性疾病，如高血压、高脂血症、糖尿病及动脉粥样硬化性心、脑血管疾病有非常密切的关系，导致这些疾病的患病率和病死率急剧上升[4]，因此如何早期预防与治疗是降低此类疾病发生的一重要环节。

3.1肥胖症患儿肝纤维化指标和甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测的状况

已往研究结果证实血清肝纤维化指标HA、LN、PCⅢ和CⅣ是实验室反映细胞外基质代谢的重要血清学指标，其含量升高表明患者体内已开始启动肝纤维化，与肝纤维化的活性呈相关性[5]。因此可以认为此类指标是临床判断肝纤维化程度和评价抗纤维化治疗疗效的一种主要非创伤性指标[6-7]。本研究发现肥胖症患儿存在血清PCⅢ和HA异常，特别是PCⅢ表现异常，因此认为肥胖症患儿已存在一定程度的纤维化倾向。

GPDA于1966年被发现迄今，其生理功能尚未能完全阐明。已知GPDA与机体胶原蛋白的肽链降解及更新有关。GPDA主要是能特异性地水解N末端为甘氨酰脯氨酸的肽键，而胶原分子中富含此种结构，故某些疾病胶原代谢的变化有可能改变此酶的活性。已往文献报道血清GPDA活性升高多作为肝脏发生病变的判断指标，但对肥胖症患者GPDA活性的变化意义过去研究甚少[2]。本研究结果表明，肥胖症患儿血清GPDA水平与健康儿童相比有较大幅度上升，说明患儿肝纤维化所致肝脏已出现一定程度的损伤。

3.2肥胖症患儿肝纤维化指标和甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测两者间关联分析

本研究发现，43例肥胖症患儿治疗后GPDA活性、HA及PCⅢ水平均出现降低(均P<0.05)，提示通过治疗，肥胖症患儿纤维化趋势得到了有效减缓，肝损伤程度有所逆转。

出现肥胖症患儿血清GPDA活性上升的机制，一方面可能与这个年龄段的男孩发育旺盛，骨骼系统生长迅速，胶原含量增高剧烈有关；另一方面与肥胖症患儿出现早期肝纤维化倾向有关，肝纤维化的重要特征为结缔组织增生，而结缔组织中富含GPDA，因此在细胞分化过程中，产生较多的胶原酶，分解胶原，启动肝组织及肝细胞的正常修复[8]。GPDA作为胶原分解过程中的二肽氨基肽酶，参与了胶原的降解代谢，故患者血中GPDA浓度上升。

本研究也证实了肥胖症患儿GPDA与肝纤维化指标变化密切相关，从GPDA与肝纤维化指标的相关性分析看出，两者呈不同程度的正相关，特别与PCⅢ显示出较强相关性(r=0.602)，因此结合血清GPDA与PCⅢ的联合监测可作为了解肝损伤程度、肝纤维化程度及治疗后疗效评价的一个重要参考指标。另外，从对GPDA与肝纤维化指标的动态观察结果亦表明，肥胖症患儿各项指标术后有不同幅度下降，这从一定程度上说明GPDA与肝纤维化指标可用于临床疗效及病情监测。

[1]Brunt E M.Nonalcoholic fatty liver disease: pros and cons of histologic systems of evaluation[J].Int J Mol Sci,2016,17(1):97.

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[3]中国肥胖问题工作组.中国学龄儿童青少年超重、肥胖筛查体重指数值分类标准[J].中华流行病学杂志,2004,25(2):97-102.

[4]Tandra S, Yeh M M, Brunt E M,etal.Presence and significance of microvesicular steatosis in nonalcoholic fatty liver disease[J].J Hepatol,2011,55(3):654-659.

[5]徐铭益,陆伦根.肝纤维化血清学标志物及诊断模型的诊断价值[J].中华肝脏病杂志,2014,22(9):647-649.

[6]Szybowska P,Wojcik M,Starzyk J B,etal. Enhanced liver fibrosis (ELF) test in obese children with ultrasound-proven liver steatosis.[J].Neuro Endocrinol Lett,2015,36(7):700-705.

[7] Schiaffini,Liccardo,Alisi A,etal. Early glucose derangement detected by continuous glucose monitoring and progression of liver fibrosis in nonalcoholic fatty liver disease:anIndependent predictive factor [J]. Hormone Research in Paediatrics,2016,85(1):29-34.

[8]Schwimmer J B,Lavine J E,Wilson L A,etal. In children with nonalcoholic fatty liver disease, cysteamine bitartrate delayed release improves liver enzymes but does not reduce disease activity scores [J]．Gastroenterology,2016,151(6):1141-1154.

[专业责任编辑：帖利军]

Research of hepatic fibrosis indicators and serum glycylproline dipeptidyl aminopeptidase activity changes in obese children

TAN Xiao-xia, HUANG Zhen-zhen, XU Xiao-hong

(DepartmentofClinicalLaboratory,LishuiMaternalandChildHealthCareHospital,ZhejiangLishui323000,China)

Objective To discuss the changes of hepatic fibrosis indicators such as hyaluronic acid (HA), laminin (LN), serum procollagen peptide Ⅲ (PCⅢ), collagen Ⅳ (CIV) and serum glycylproline dipeptidyl aminopeptidase (GPDA) activity in obese children and their clinical application value. Methods Hepatic fibrosis indicators and serum GPDA activity were compared between 159 patients of 6 to 15 years old diagnosed as obesity in pediatric outpatient department of Lishui Maternal and Child Health Care Hospital from June 2015 to February 2016 (obese group) and 42 healthy children of 9 to 14 years old (control group). Results were compared between two groups. Results Compared to the control group, HA and PCIII levels in the obese group increased significantly (tvalue was 7.403 and 5.405, respectively, bothP<0.05), especially the increase of PCⅢ. The difference in GPDA activity between two groups had significant difference (t=8.965,P<0.01). Comparison to GPDA activity, HA and PCⅢ levels in obese children before treatment, they decreased after treatment and the differences were statistically significant (tvalue was 6.452, 5.684 and 4.369, respectively, allP<0.05). PCⅢ showed a positive correlation with GPDA (r=0.602,P<0.05). Conclusion Changes of GPDA activity and PCⅢ level in obese children are sensitive indicators of liver lesions at early stage. Dynamic monitoring of both indicators has clinical significance for diagnosis and clinical efficacy observation.

obesity; hyaluronic acid (HA); laminin (LN); procollagen peptide III (PCIII); collagen; glycylproline dipeptidyl aminopeptidase (GPDA)

2016-04-10

谭晓霞(1977-)，女，副主任技师，主要从事临床生化及免疫工作。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.01.008

R153.2

A

1673-5293(2017)01-0021-02