孕妇孕期被动吸烟对母体血浆P-LAP、IL-6及IL-10的影响

邱其周，程贵辉，陈虹余，熊 伟，黄月娇，肖 毅

(广州医科大学附属深圳沙井医院新生儿科，广东 深圳 518104)

孕妇孕期被动吸烟对母体血浆P-LAP、IL-6及IL-10的影响

邱其周，程贵辉，陈虹余，熊 伟，黄月娇，肖 毅

(广州医科大学附属深圳沙井医院新生儿科，广东 深圳 518104)

目的 探讨孕期被动吸烟母体胎盘亮氨酸氨基肽酶(P-LAP)、白介素(IL-6)及IL-10在正常孕妇和早产孕妇血浆中的变化趋势，并分析其对早产的影响。方法 选取175例早产孕妇(28～36+6周)为研究组(早产组)，根据有无被动吸烟分为早产被动吸烟组(n=96)和早产非被动吸烟组(n=79)；同时选取177例足月孕妇为对照组(足月组)，同样根据妊娠期被动吸烟情况，分为足月被动吸烟组(n=78)和足月非被动吸烟组(n=99)。采用酶联免疫吸附法，测定以上各组孕妇在相应孕周时的血浆P-LAP、IL-6和IL-10浓度。结果 早产被动吸烟组孕妇血浆P-LAP、IL-6和IL-10浓度与足月被动吸烟组比较差异有统计学意义(tP-LAP=3.678、tIL-6=3.865、tIL-10=2.114，均P<0.05)，早产被动吸烟组孕妇血浆P-LAP、IL-6及IL-10浓度与早产非被动吸烟组比较差异有统计学意义(tP-LAP=4.479、tIL-6=4.556、tIL-10=2.202，均P<0.05)；而足月被动吸烟组孕妇血浆P-LAP、IL-6及IL-10浓度与足月非被动吸烟组比较差异无统计学意义(tP-LAP=1.170、tIL-6=1.722、tIL-10=1.423，均P>0.05)。结论 孕期被动吸烟可致孕妇P-LAP和IL-10水平降低，IL-6水平升高，引起早产分娩启动，可能是引起孕期被动吸烟孕妇早产发生的关键因素。

被动吸烟；胎盘亮氨酸氨基肽酶；白细胞介素-6；白细胞介素-10；早产

近年来，我国早产儿发生率有逐年上升趋势，据2005年中华儿科学分会的调查，我国早产儿发生率为8.1%。越来越多的证据显示，早产是一种免疫调节偏移过程，其中炎症因子在早产和正常分娩过程中均发挥了非常重要的作用。催产素酶即胎盘亮氨酸氨肽酶(placental leucine aminopeptidase，P-LAP)，是唯一能降低催产素的膜氨基肽酶，是母胎之间相互制约的屏障。有研究显示，孕期被动吸烟是导致早产的重要原因之一[1]。本研究通过监测孕期被动吸烟的不同孕周的孕妇血浆中的P-LAP 、白细胞介素-6(interleukin 6，IL-6)和白细胞介素-10(interleukin 10，IL-10)的浓度，了解孕期被动吸烟孕妇血浆中P-LAP 、IL-6和IL-10的变化趋势，探讨孕妇孕期被动吸烟可能发生的炎症变化以及对P-LAP的影响，进而分析孕期被动吸烟与早产的病因关系。

1对象与方法

1.1研究对象

随机选取2014年1月至2016年1月在广州医科大学附属深圳沙井医院接受产前检查，在产科住院、分娩的产妇作为研究对象，用横断面调查方法，对其进行问卷调查，收集孕妇在怀孕期间的被动吸烟情况，以及妊娠史、疾病史、职业、工作环境等。接受调查的孕妇最终分为4组，分娩胎龄在28～36+6周的孕妇为早产组(n=175)，同时根据妊娠期间是否存在被动吸烟，分为早产被动吸烟组(n=96)和早产非被动吸烟组(n=79)；以分娩胎龄≥37周的孕妇为足月组(n=177)，根据妊娠期间是否存在被动吸烟，分为足月被动吸烟组(n=78)和足月非被动吸烟组(n=99)。研究对象的排除标准：除入选标准的条件外，出现以下任何1种情况者即从研究对象中排除：以任何理由拒绝调查及检查者；有主动吸烟史；发现说谎或者故意隐瞒实情者；有明显的精神或神经性疾病，不能准确回答问题者；以及出生时存在宫内感染、胎膜早破、新生儿窒息、人工引产或意外引起的早产。本研究遵循的程序符合广州医科大学附属深圳沙井医院人体试验委员会制定的伦理学标准，得到该委员会批准，征得受试对象知情同意，并与之签署临床研究知情同意书。

1.2被动吸烟诊断标准

被动吸烟也被称为“二手烟”、“强迫吸烟”或“环境香烟烟雾(environmental tobacco smoke，ETS)”。世界卫生组织提出的被动吸烟定义为：被动吸烟者为不吸烟者每周至少有1天以上被动吸入吸烟者呼出的烟雾超过15min。

1.3研究方法

1.3.1标本的采集及处理

对早产孕妇于产前抽取肘静脉血5mL，对足月孕妇则于产检时在相应孕周(28～36+6周)抽取肘静脉血5mL，以上标本分别置于乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝管混匀后存于4℃冰箱内，2h内进行离心(1 000r/min×30min)去除颗粒，然后将血浆迅速小心分离置 EP管后存放于-70℃～80℃冰箱内统一保存待测。

1.3.2检测方法

主要试剂为P-LAP 酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA) 试剂盒和IL-6、IL-10 ELISA试剂盒。采用ELISA法(严格按试剂盒说明进行操作)检测母体血浆P-LAP、IL-6及IL-10。

1.4统计学方法

应用SPSS 13.0统计软件，对各组数据进行统计学分析。各组数据用均值±标准差表示，采用t检验、方差分析或卡方检验。以P<0.05作为有统计学意义的标准，P<0.01作为有显著统计学意义的标准(均为双侧P值)。

2结果

2.1孕妇的一般情况比较及孕期被动吸烟的情况

早产的孕妇175例，其中存在被动吸烟孕妇96例，而足月产的孕妇有177例，其中被动吸烟孕妇78例。在早产孕妇中被动吸烟的孕妇中学及以下教育水平比例为40.6%，大专及以上教育水平的比例为28.1%，与非被动吸烟者比较，其差异有统计学意义(P=0.041)，各组中被动吸烟孕妇与非被动吸烟孕妇的教育水平具有显著差异性(P<0.05)，提示被动吸烟情况与孕妇的文化程度有一定关系。各组孕妇的平均年龄、孕周、家庭平均收入等比较无统计学意义(均P>0.05)，见表1。

表1 各组孕妇的一般情况比较

(转下表)

(续上表)

项目早产组(n=175)足月组(n=177)被动吸烟(n=174)非被动吸烟(n=178)F1/χ21P1F2/χ22P2孕前BMI(kg/m2)0．3660．8330．2160．899 营养不良(<18．5)34(19．43)30(16．95)32(18．39)32(17．98) 正常(18．5～23．9)124(70．86)129(72．88)126(72．41)127(71．35) 超重/肥胖(≥24)17(9．71)18(10．17)16(9．20)19(10．67)孕期饮酒0．0010．9830．0010．983 无168(96．00)170(96．05)167(95．98)171(96．07) 有7(4．00)7(3．95)7(4．02)7(3．93)新生儿性别0．0120．9980．0000．914 男86(49．14)88(49．72)86(49．43)88(49．44) 女89(50．86)89(50．28)88(50．57)90(50．56)

注：P1值为早产组与足月组的比较，孕周的▲P<0.01；P2值为被动吸烟组与非被动吸烟组的比较，文化程度的﹡P<0.05。

2.2早产孕妇或足月产孕妇与被动吸烟的关系

早产组175例，其中被动吸烟孕妇96例(54.86%)，足月组177例，被动吸烟有78例(44.07%)，两组间差异有统计学意义(χ2=4.09，P<0.05)；由此可见，孕期被动吸烟可增加早产的发生风险，OR=1.54，95%CI：1.01～2.35，见表2。

表2 孕期被动吸烟对早产的影响[n(%)]

Table 2 Influence of passive smoking during pregnancy on preterm birth[n(%)]

2.3早产与足月孕妇血浆P-LAP、IL-6及IL-10水平比较

组间比较：早产被动吸烟组孕妇血浆P-LAP及IL-10含量较足月被动吸烟组孕妇低，而IL-6的含量则较足月被动吸烟组孕妇高，且差异均有统计学意义(tP-LAP=3.678、tIL-6=3.865、tIL-10=2.114，均P<0.05)；早产非被动吸烟组孕妇血浆IL-6含量较足月非被动吸烟组稍高，但其差异无统计学意义(P>0.05)，且在P-LAP及IL-10的含量比较中，差异同样无统计学意义(P>0.05)。组内比较：早产被动吸烟组孕妇血浆P-LAP及IL-10含量较早产非被动吸烟组的低，而IL-6的含量则较早产非被动吸烟组的高，且差异均有统计学意义(tP-LAP=4.479、tIL-6=4.556、tIL-10=2.202，均P<0.05)；足月被动吸烟组孕妇血浆IL-6含量较足月非被动吸烟组孕妇高，但其差异无统计学意义(P>0.05)，足月被动吸烟组与足月非被动吸烟组血浆P-LAP及IL-10含量比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 早产与足月孕妇血浆P-LAP、IL-6及IL-10水平比较

注：①早产被动吸烟组孕妇血浆P-LAP、IL-6、IL-10含量与早产非被动吸烟组比较：t=4.479，P=0.000；t=4.556，P=0.000；t=2.202，P=0.029。②足月被动吸烟组孕妇血浆P-LAP、IL-6、IL-10含量与足月非被动吸烟组比较：t=1.170，P=0.244；t=1.722，P=0.087；t=1.423，P=0.157。

3讨论

3.1被动吸烟对妊娠结局的影响

吸烟的危害不仅仅对于吸烟者本身，而且二手烟暴露人群受烟草危害严重，妇女、儿童受烟草的危害尤为严重。早产的病因是多方面的，目前可明确的早产原因有：吸烟、感染、胎膜早破、营养不良、酗酒、多胎妊娠、凝血异常、胎盘早剥等[2-3]。有研究表明，香烟中含有的尼古丁会增加早产的风险，不过其影响早产风险的机制尚不明确[4]。本研究结果显示，在早产孕妇中被动吸烟的孕妇中学及以下教育水平比例为40.6%，大专及以上教育水平的比例为28.1%，与非被动吸烟组比较的差异有统计学意义(P=0.041)，同时在所有调查的孕妇中被动吸烟与非被动吸烟教育水平比较差异也有统计学意义(P=0.017)，这说明文化程度与被动吸烟存在一定关系。本研究发现早产孕妇存在被动吸烟率为54.86%(96/175)，而足月产孕妇存在被动吸烟率为44.07%(78/177)，通过比较显示孕期被动吸烟可增加早产的发生率(P=0.043)，风险增高(OR=1.54)，研究结果与上述既往报道基本一致。

3.2孕期被动吸烟对母体炎症反应的影响

ETS是一种混合物，其内含有近5 000种已知的化学物质，如颗粒物(焦油)、尼古丁酸、一氧化碳、氰化物、酚类苯蒽等。吸烟可影响免疫系统的各个方面，孕期被动吸烟可产生大量的有害物质，激活单核巨噬细胞系统，对T淋巴细胞的促增殖作用加强，T淋巴细胞分泌促炎因子增多，而抑炎因子分泌减少。据2004年Hebisch等研究发现，妊娠期母体血清白介素始终保持在较低水平，无明显改变，而启动分娩的炎症反应使白介素水平在分娩时都升高。妊娠期间，子宫蜕膜、羊膜、绒毛膜和胎盘滋养层细胞都具有合成IL-6的能力，IL-6在母胎界面的过渡及异常生成对妊娠有害，适量的IL-6在妊娠中主要起免疫调节作用， IL-6分泌过多，则会导致其它细胞因子分泌紊乱，各细胞因子之间比例失衡，易使母体对胎儿产生类似于器官移植急性排斥反应样的免疫学反应，而出现早产等病理情况。IL-10则可以抑制其他细胞产生各种促炎症细胞因子，是强有力的免疫和炎症抑制因子，参与人体的免疫、胚胎生长发育等一系列生理过程，IL-10可以通过关闭IL-6合成的启动基因, 抑制IL-6 mRNA的表达及 IL-6的产生，抑制单核细胞前列腺素(PGs)的合成从而抑制早产发生。孕期被动吸烟可致孕妇血浆IL-6浓度升高，而IL-10浓度下降。

当催产素合成增多时会诱发子宫肌层的收缩和分娩的发动，P-LAP被认为在降解催产素的合成和保持妊娠的动态平衡方面起到重要作用，因此，通过连续监测母体血P-LAP的活性可用于监测妊娠特有疾病，P-LAP水平下降是早产和正常分娩发动的关键因素之一[5]。孕妊期间有很多因素可能导致炎症变化及细胞因子平衡紊乱，其中ETS可能就起到不小作用，其中的有害物质还可通过内皮细胞及单核细胞分泌IL-6、TNF-α等，参与机体免疫反应和炎症反应，它们的作用与组织中的含量有关，正常水平对机体有利，产生过多则会引起机体一系列炎症损伤，使胎儿失去免疫保护并引起被母体内源性免疫破坏的结果。

因此，本研究根据孕期被动吸烟导致早产发生率升高，对其进行炎症因子分析显示，早产被动吸烟组孕妇血浆P-LAP及IL-10含量较足月被动吸烟组孕妇低，而IL-6的含量则较足月被动吸烟组孕妇高，且差异均有统计学意义(均P<0.05)；早产非被动吸烟组孕妇血浆IL-6含量较足月非被动吸烟组稍高，但其差异无统计学意义(P>0.05)，且在P-LAP及IL-10的含量比较中，差异同样无统计学意义(P>0.05)。早产被动吸烟组孕妇血浆P-LAP及IL-10含量较早产非被动吸烟组的低，而IL-6的含量则较早产非被动吸烟组的高，且差异均有统计学意义(均P<0.05)；足月被动吸烟组孕妇血浆IL-6含量较足月非被动吸烟组孕妇高，但其差异无统计学意义(P>0.05)，足月被动吸烟组与足月非被动吸烟组血浆P-LAP及IL-10含量比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结果的比较结果说明孕期被动吸烟可致早产孕妇P-LAP浓度的下降，则会导致催产素的降解受阻，随即触发催产素/催产素受体系统，根据母体P-LAP浓度水平的变化，提示其中的免疫细胞因子有抑制催产素酶表达的可能性，从而使催产素酶水平降低；并且孕期被动吸烟导致孕妇体内炎症因子IL-6、IL-10发生变化，从而诱发早产的启动。

但因本研究中混杂因素多，难以控制，且样本量仍不足，研究观察时间较短，可能影响结果的客观性，因此需进一步进行多中心研究并结合动物实验，为今后预防和治疗早产提供更充足的依据及更好地落实国家控烟政策。

[1]丁鹏.被动吸烟及母亲CYP1A1、GSTM1、GSTT1基因多态性与早产关系的病例对照研究[D].广州:中山大学,2010.

[2]Ko T J,Tsai L Y,Chu L C,etal.Parental smoking during pregnancy and its association with low birth weight, small for gestational age, and preterm birth offspring: a birth cohort study[J].Pediatr Neonatol,2014,55(1):20-27.

[3]张小松,赵更力,杨慧霞,等.15家城市医疗机构早产发生情况及影响因素分析[J].中华围产医学杂志,2016,19(6):456-461.

[4]Wikstrom A K,Cnattingius S,Galanti M R,etal.Effect of Swedish snuff (snus) on preterm birth[J]. BJOG,2010,117(8):1005-1010.

[5]熊瑛,杨祖菁.母血浆P-LAP与早产发动关系的相关性临床研究[J].现代妇产科进展,2011,20(9):722-725.

[专业责任编辑： 于学文]

Influence of maternal passive smoking during pregnancy on maternal plasma P-LAP, IL-6 and IL-10

QIU Qi-zhou, CHENG Gui-hui, CHEN Hong-yu, XIONG Wei, HUANG Yue-jiao, XIAO Yi

(NeonatalDepartment,ShenzhenShajingHospitalAffiliatedtoGuangzhouMedicalUniversity,GuangdongShenzhen518104,China)

Objective To study the changes of placental leucine aminopeptidase (P-LAP), interleukin 6 (IL-6) and interleukin 10 (IL-10) in mothers with passive smoking during pregnancy in full term pregnant women and pregnant women with preterm labor and to analyze their impact on preterm birth. Methods Altogether 175 cases of pregnant women with preterm labor (28-36+6weeks) were selected in observation group (preterm group) and further divided into preterm group with passive smoking (n=96) and preterm group without passive smoking (n=79) based on whether passive smoking existed during pregnancy. At the same time, 177 cases of full term pregnant women were chosen in control group (full term group) and further divided into full term group with passive smoking (n=78) and full term group without passive smoking (n=99) according to situation of passive smoking during pregnancy. Plasma concentrations of P-LAP, IL-6 and IL-10 of above pregnant women in corresponding gestational weeks were detected using enzyme linked immunosorbent assay. Results Plasma concentrations of P-LAP, IL-6 and IL-10 in preterm group with passive smoking were significantly different from those in full term group with passive smoking (tP-LAP=3.678,tIL-6=3.865,tIL-10=2.114, allP<0.05). Plasma concentrations of P-LAP, IL-6 and IL-10 in preterm group with passive smoking were significantly different from those in preterm group without passive smoking (tP-LAP=4.479,tIL-6=4.556,tIL-10=2.202, allP<0.05). Plasma concentrations of P-LAP, IL-6 and IL-10 in full term group with passive smoking were not significantly different from those in full term group without passive smoking (tP-LAP=1.170, tIL-6=1.722,tIL-10=1.423, allP>0.05). Conclusion Passive smoking during pregnancy can cause drop of P-LAP and IL-10 levels and increase of IL-6 level, leading to start of preterm delivery, which is likely the key factor causing preterm delivery in pregnant women with passive smoking.

passive smoking;placenta leucine aminopepticlase(P-LAP);Interleukin 6(IL-6);Interleukin 10(IL-10);Preterm birth

2016-09-20

邱其周(1980-)，男，副主任医师，硕士，主要从事新生儿危重症医学研究。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.01.016

R714.1

A

1673-5293(2017)01-0044-04