肥胖大鼠心外膜脂肪巨噬细胞数量和血清脂肪因子的研究

肥胖大鼠心外膜脂肪巨噬细胞数量和血清脂肪因子的研究

张彩坤 张豪英 邢冬杰

目的探讨肥胖大鼠心外膜脂肪（EAT）巨噬细胞（M）数量和血清脂肪因子水平。方法18只SD大鼠随机分为对照组9只和肥胖组9只，分别饲以基础饲料和高脂饲料。80天后采血并取EAT。脂肪标本行CD68抗体标记的免疫组化检测。检测瘦素、脂联素和内脏脂肪素。结果肥胖组M数量高于对照组。与对照组相比，肥胖组脂联素显著降低，而内脏脂肪素、瘦素显著升高。肥胖组M数与内脏脂肪素、瘦素呈正相关，与脂联素呈负相关。结论肥胖大鼠EAT M数增多，并与全身慢性炎症关系密切。

肥胖；心外膜脂肪；巨噬细胞

心外膜脂肪（epicardial adipose tissue，EAT）作为一种心脏和冠状动脉周围的内脏脂肪，近年逐渐受到重视[1]。脂肪组织慢性炎性反应的重要标志是巨噬细胞（macrophage，M）大量浸润，M在慢性低度炎症性疾病如动脉粥样硬化的致炎机制中发挥重要作用[2]。本研究拟探讨肥胖大鼠EAT中M和血清脂肪因子水平改变，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 实验动物

以18只成年雄性SD大鼠为研究对象，随机分为对照组9只和肥胖组9只，分别饲以基础饲料和高脂饲料。

1.2 实验方法

1.2.1 脂肪因子检测 80天后断头处死大鼠，采用ELISA法检测血清瘦素、脂联素和内脏脂肪素。

1.2.2 免疫组化染色及M观察 取EAT，常规石蜡包埋，5 μm厚连续切片。所用抗体为兔抗鼠一抗（CD68抗体）和生物素标记山羊抗兔二抗，常规行免疫组化染色。光镜400×视野下每张切片随机选取4个视野，计数M。

1.3 统计学方法

采用SPSS 13.0统计分析。两独立样本间比较用t检验。M与脂肪因子行相关分析。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组间EAT M数量比较

肥胖组M数量为（45.6±22.5）/mm2，高于对照组的（21.8± 11.7）/mm2，差异具有统计学意义（t=6.357，P=0.000）。

2.2 两组间血清脂肪因子比较

与对照组相比，肥胖组脂联素显著降低[（6.21±2.96）μg/mlvs. （8.57±3.43） μg/ml，t=2.204，P=0.040]，而内脏脂肪 素 [（4.66±2.10） ng/mlvs. （3.05±1.48） ng/ml，t=2.497，P=0.031]、瘦素[（9.43±4.47） ng/mlvs. （6.33±3.65） ng/ml，t=2.722，P=0.018]显著升高。

2.3 肥胖组M数量与脂肪因子相关性分析

肥胖组M数与内脏脂肪素（r=0.203，P=0.034）、瘦素（r=0.258，P=0.015）呈正相关，与脂联素（r=-0.239，P=0.019）呈负相关。

3 讨论

先前关于动脉粥样硬化的研究多专注于血管壁病变，而探讨冠脉周围脂肪组织对动脉粥样硬化影响的研究较少。本研究探讨了胸腔内重要的内脏脂肪组织EAT M数量，发现肥胖组EAT的M数显著升高。前面学者[3]探讨小鼠附睾脂肪M特点，发现肥胖小鼠M浸润程度更为明显，与本研究结果相似。陈新忠等以冠心病患者为研究对象[4]，结果示冠脉外膜有大量M浸润，在外膜与血管外脂肪交界处可见明显M聚集带。从本研究的实验结果推测，这些M可能来自于EAT，意味着M导致的EAT慢性炎症参与了冠脉粥样硬化的发生。

本实验发现，肥胖组脂联素水平显著降低，而内脏脂肪素、瘦素显著升高，与前面的研究相似[5]。此外，本研究发现，EAT中M数显著相关于脂肪因子水平，提示M参与了肥胖大鼠的慢性全身炎症。内脂素主要来源于白色脂肪组织中的M[6]。瘦素是一种促炎因子，而脂联素为一种抗炎因子，所以M数量与瘦素水平呈正相关，而与脂联素呈负相关。新近研究证实，炎症在动脉粥样硬化发生发展过程中发挥重要作用[7-8]。可以推测，由于EAT与冠状动脉密切的解剖关系，EAT可通过旁分泌等方式作用于冠状动脉管壁，参与冠脉粥样硬化的形成。因此，改善EAT的慢性炎症是防治冠脉粥样硬化的一个潜在靶点。

综上所述，本研究表明，肥胖大鼠EATM数量增多，并且与全身慢性炎症关系密切。

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Study on Macrophage in Epicardial Adipose Tissue and Serum Fatty Cytokine Level in Obese Rats

ZHAGN Caikun ZHANG Haoying XING Dongjie Department of Western Medicine Education, Shandong College of Traditional Chinese Medicine, Yantai Shandong 264100, China

ObjectiveTo explore the characteristics of macrophage in fi ltration in epicardial adipose tissue(EAT) and serum fatty cytokine level in obese rats.Methods18 SD rats were selected and randomly divided into the control group and the obese group. After 80 days, the control group were fed with basal diet and the obese group were fed with high fat diet. EAT were detected by immunohistochemistry with CD68 antibody. Serum leptin, adiponectin and visfatin were detected.ResultsThe number of macrophage in the obese group were significantly higher than the control group. Thelevel of leptin and visfatin in the obese group were signi fi cantly higher and adiponectin was signi fi cantly lower than the control group. The number of macrophages was negatively correlated with adiponectin and was positively correlated with visfatin and leptin.ConclusionThe number of macrophage in EAT in obese rats are increased, and macrophage is closely associated with chronic systemic in fl ammatory.

obesity; epicardial adipose tissue; macrophage

R589．2

A

1674-9316（2017）09-0130-02

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．09．075

山东中医药高等专科学校西医教学部，山东 烟台 264100

张彩坤