HPV E6E7蛋白和宫颈癌的关系探讨

刘桂芳

HPV E6E7蛋白和宫颈癌的关系探讨

刘桂芳

目的 探究人乳头瘤病毒（HPV）E6E7蛋白与宫颈癌之间的关系。方法 选取本院2015年11月—2016年11月的70例宫颈癌患者作为研究对象，对其应用PCR技术进行检测，患者的检查结果中均含有E6E7基因，在此过程中应用SP检测法，得出HPV E6E7的表达情况。将患者分为癌症组、CIN组以及炎症组，并在这一过程中记录其HPV E6E7情况。结果 HPV E6与是否转移有关，HPV E7与是否转移有关。结论 HPV E6E7基因与宫颈疾病癌变的关系十分密切。

HPV；E6E7蛋白；宫颈癌；关系

随着当前时代的不断发展，分子生物学以及流行病学也进一步有所发展[1-2]，研究显示，人乳头瘤病毒与宫颈疾病密切相关，尤其是与人乳头瘤病毒（HPV）关系密切，其中原癌蛋白（E6E7）在肿瘤发生的过程中起到十分重要的控制作用[3]。本文结合本院2015年11月—2016年11月的70例宫颈癌患者作为研究对象，采用SP定量观察法对其进行了检测，并进行进一步的探究，以得出HPV E6E7是否与宫颈癌密切相关的结论，探究过程如下。

1 资料与方法

1.1 资料

选取本院2015年11月—2016年11月的70例宫颈癌患者作为研究对象，患者年龄27～75岁，平均年龄为（55.23±3.41）岁，病程持续时间为3周～2年，平均病程为（1.02±0.34）年。分别对患者的病变部位进行病理提取，从而根据结果对于患者的情况进行分类。将其分组为炎症组、CIN组以及癌症组，炎症组患者27例，CIN组患者23例，癌症组患者20例。炎症组年龄28～73岁，平均年龄为（53.43±3.53）岁，CIN组患者年龄27～71岁，平均年龄为（54.34±3.84）岁，癌症组年龄29～75岁，平均年龄为（56.34±3.22）岁，三组患者的年龄等基本资料对比，差异无统计学意义，P＞0.05，具有可比性。

1.2 患者纳入标准

（1）通过检查确定其患有宫颈癌；（2）患者其他器官未患有癌症；（3）不存在脑部以及精神疾病；（4）要求患者在治疗过程中均与医生积极配合，谨遵医嘱；（5）家属知情，并且签署了相关的知情书。满足以上条件就可以对于患者的档案进行建立，并交由相关的部门对于档案进行保管。

1.3 方法

采用的试剂包括高保真Taq DNA聚合酶（供应商：invitrogen，货号：C11304-011，029，102），核酸限制性内切酶（厂家：福建华灿制药有限公司，货号：ER192）以及T4 DNA连接酶（厂家：百奥莱博，货号：YT029）。仪器采用PCR扩增仪以及核酸电泳仪，菌种以及质粒采用的受体菌均由美国制造。首先对于PCR产物电泳以及序列进行鉴定，PCR 30次循环后首先利用1%的琼脂糖凝胶进行电泳，可以发现清晰的扩增带，这一过程中E6以及E7的扩增速度保持一致，大小以及标准均一致，说明E6、E7的基因序列相一致。

通过收集三组患者的HPV E6E7细胞，并通过切片染色技术，对三组患者的HPV E6E7进行观察，若细胞核周围出现黄色颗粒则为阳性，在这一过程中选取切片的5个视野，阳性的细胞数少于5%，则说明呈阴性。从宫颈病变活检组织中提出的DNA作为模板，也对于HPV E6E7的扩增情况进行观察，并且将扩增条件设为94℃以及7 min，重复多次循环，不断对于扩增数据进行对比，从而进一步得出准确的测定结果以方便对比。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 三组E6、E7的基因表达

炎症组、CIN组以及癌症组的HPV E7均为65%，75%以及70%，P＞0.05，差异不具有统计学意义，对于HPV E6进行对比发现数值分别为5%，30%以及45%，P＜0.05，差异有统计学意义。其中E6单倍在癌症组中阳性染色情况显著，占80%以上。

2.2 三组病理特征

HPV E6蛋白与临床分期以及肿瘤发展程度进行对比，发现也同样满足P＜0.05，差异具有统计学意义，说明存在相关性，但对于HPV E7进行对比则发现E7蛋白直接影响到患者的临床分期以及淋巴结转移情况，满足P＜0.05，差异具有统计学意义，与肿瘤分化程度密切相关。

3 讨论

早期的宫颈癌假说提出宫颈病变基本是由HPV感染所致[4]。并且有相关的研究表明[5]，很多患者HPV E6E7总阳性率较高，高达60%以上，由此可见HPV与宫颈病变密切相关，并且对于E6、E7的不同进行了探究。E7蛋白能够与PRB相结合达到致癌的效果，E6则通过与P53蛋白进行结合，而对于使得PRB的细胞调节作用丧失，造成细胞生存时间长，一些细胞在这一过程中就会转为恶性，从而危害人体。并且以上70例患者中E6、E7蛋白与主细胞的DNA亲和度很高，对DNA的转录以及表达产生较为严重的影响，且E6、E7蛋白能够使得细胞由良性转为恶性。

资料显示[6-7]，将HPV E6E7用于小白鼠的皮基底细胞，使得E6、E7原蛋白得以表达，结果小白鼠均患有了皮肤肿瘤，且结果为恶性肿瘤居多[8]。在这一过程中若只对于E7进行转入，则肿瘤为良性居多，只对于E6进行转入，则恶性肿瘤居多，由此得出结论E7与早期肿瘤有关，E6则多与晚期以及恶性肿瘤相关。

本文探究了E6E7的基因表达，可知三组对比E7基因表达过程中，P＞0.05，差异不具有统计学意义；E6基因表达过程对比，P＜0.05，差异有统计学意义。由此可见，恶性肿瘤主要为E6蛋白进行控制，而E7蛋白则只是在肿瘤发展前期对其起到作用。由此可见，HPV E6E7与宫颈癌有着十分密切的关系，在今后的过程中可以对于E6、E7蛋白情况进行广泛的应用，从而帮助这一疾病的判断以及治疗，提升对于该疾病的综合治疗效果。

[1] 汪群水，周学琴，李丽民. 细菌性阴道炎和HPV感染与宫颈癌的关系分析[J].浙江临床医学，2015，17（12）：2189-2190.

[2] 李尚辉. 不同类型HPV与宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的关系[J]. 中外医学研究，2016，14（3）：114-115.

[3] 李杰. 宫颈癌组织中VEGF和微血管密度与HPV感染的关系[J].中国妇幼保健，2015，30（2）：295-299.

[4] 纪婵. 人乳头状瘤病毒（HPV）感染与宫颈癌发病关系[J]. 齐齐哈尔医学院学报，2016，37（26）：3306-3307.

[5] 张婵，孙媛，吴茉莉. HPV病毒感染与宫颈炎症及宫颈癌之间的关系及意义分析[J]. 中国微生态学杂志，2015，27（8）：968-970.

[6] 胡滨，崔金全，邓克红，等. 宫颈癌组织高危型 HPV感染与HWAPL 蛋白表达的关系[J]. 郑州大学学报（医学版），2014，49（6）：862-865

[7] 韦洁芳. HPV感染与宫颈癌关系的探讨[J]. 中外医疗，2017，36（8）：41-42.

[8] 刘学博. HPV感染与宫颈癌关系的研究[J]. 中国当代医药，2016，23（9）：132-134.

Study on the Relationship Between HPV E6E7 Protein and Cervical Cancer

LIU Guifang Laboratory Department, Liaoyuan Maternal and Infant'sHospital, Liaoyuan Jilin 136200, China

Objective To investigate the relationship between human papillomavirus (HPV) E6E7 protein and cervical cancer. Methods 70 cases of cervical cancer from November 2015 to November 2016 in our hospital were selected as the subjects and detected by PCR technology, all contained E6 and E7 genes. In this process, SP detection method was applied, expression of HPV and E6E7 was obtained. Patients were divided into cancer group, CIN group and inf l ammatory group, and their HPV and E6E7 were recorded during the process. Results HPV E6 was related to metastasis or not, and HPV E7 was related to metastasis. Conclusion The HPV and E6E7 genes are closely related to the canceration of cervical diseases.

HPV; E6E7 protein; cervical cancer; relationship

R737

A

1674-9316（2017）19-0070-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2017.19.035

辽源市妇婴医院检验科，吉林 辽源136200