犬新型病毒性呼吸道疾病的研究进展

王文佳，王一斐，常艳，兰亚莉，师志海

(1．河南牧业经济学院制药工程学院，河南郑州450046; 2．河南省农业科学院畜牧兽医研究所，河南郑州450008)

犬新型病毒性呼吸道疾病的研究进展

王文佳1，王一斐2，常艳2，兰亚莉2，师志海2

(1．河南牧业经济学院制药工程学院，河南郑州450046; 2．河南省农业科学院畜牧兽医研究所，河南郑州450008)

犬传染性呼吸道疾病(CIRD)，是一种由多种致病因子引起的复杂性传染病，症状包括咳嗽、鼻分泌物和喷嚏等。一直以来，犬副流感病毒、犬II型腺病毒、犬I型疱疹病毒，被认为是CIRD的主要病毒性病原体，且往往并发，或伴发支气管败血波氏杆菌感染。虽有疫苗可对这些病原体提供保护作用，但在已接种的犬群中仍会暴发呼吸道疾病，则提示CIRD还有尚未知晓的病原体。

近年来，陆续报道的CIRD相关的新型病原体，主要包括犬流感病毒(CIV)、犬呼吸道冠状病毒(CRCoV)、犬肺病毒(CnPnV)、犬冠状病毒泛热带变异株等。本文从病原学、发病机理和流行病学、临床症状、诊断等方面进行简要概述，旨在为疾病的早期诊断、有效防控提供参考。

1 犬流感病毒

1．1 病原学2004年在美国佛罗里达州的灵缇犬中首次检测到CIV。遗传进化特性显示，该病毒的8个基因片段均与H3N8马流感病毒的基因片段亲缘关系最密切。回顾性血清学调查表明，该病毒可能在1999—2000年就由马直接传播给犬的。随后，世界各地陆续出现H5N1、H3N2、H1N1、H5N2、H3N1、H9N2和H6N1［1］流感病毒感染犬的报道。

1．2 发病机理和流行病学该病主要发生于群居犬只，无年龄差异。2004年，从1只因食入鸭肉而引起严重呼吸道疾病并死亡的患犬上分离到H5N1禽流感病毒。2009年，中国和美国出现H1N1流感病毒感染犬的散在病例，且在意大利检测到血清阳性犬只［2］。多种流感病毒在犬只中同时存在，禽源H3N2、马源H3N8、H1N1以及由流行的H1N1和H3N2重组的新型H3N1流感病毒均可感染犬。其中，禽源H3N2流感病毒在犬群中广泛存在，亚洲和美洲均已检测到。

1．3 临床症状CIV感染的临床症状，主要包括厌食、精神沉郁、咳嗽及眼鼻分泌物［3］。临床症状恶化或发展为肺炎则往往意味着存在继发性细菌感染。

试验性感染时，常表现出不同程度的上呼吸道症状，造成纤毛上皮损伤，而导致对其他致病原的易感性。然而，与其他犬呼吸道病毒感染相比，CIV感染更容易导致下呼吸道症状。大多数CIV感染犬常会出现气管炎、支气管炎和肺炎。

1．4 诊断目前，RT-PCR为诊断CIV感染的首选方法，并广泛应用。

2 犬呼吸道冠状病毒

2．1 病原学CRCoV属于冠状病毒科，β-冠状病毒属，同牛冠状病毒(BCoV)和人冠状病毒OC43毒株亲缘性最高。CRCoV与犬肠道冠状病毒(CCoV)，一种α-冠状病毒，在血清学和遗传学方面截然不同。

2．2 发病机理CRCoV对犬呼吸道组织，尤其是上呼吸道具有极强的亲嗜性。CRCoV可破坏犬上呼吸道黏液纤毛的清除功能，导致上呼吸道易发生继发感染。CRCoV不仅直接对细胞造成损伤，且还可通过对宿主免疫系统的不明显损伤而致病［4］。冠状病毒通过多种方法来对抗宿主的抗病毒反应，从而使病毒在宿主体内进行复制和传播。已经证实，其他β-冠状病毒可抑制抗病毒效应基因的激活。体外研究表明，CRCoV在感染早期还能够抑制促炎细胞因子和趋化因子的诱导。然而，CRCoV的这种抑制作用机理尚不清楚，也不清楚这些结果是否与体内一致。

2．3 临床症状由CRCoV引起的CIRD的早期阶段，常表现轻微的呼吸道症状，包括鼻分泌物、喷嚏和干咳。

2．4 诊断仅仅依靠临床症状来诊断CRCoV感染是不可能的，因为CRCoV感染没有示病指征。目前已有使用ELISAs和免疫荧光法检测CRCoV和BCoV抗原的报道，并且将会被越来越广泛地应用。

3 犬肺炎病毒

3．1 病原学CnPnV最早于2010年在美国被发现。序列分析显示，CnPnV与一些重要的人和动物呼吸道病原体的亲缘性较高，包括人类和牛呼吸道合胞病毒，人类偏肺病毒，鸟类肺炎病毒等，并且与小鼠肺炎病毒(MPV)的亲缘性最高［5］。2011年，CnPnV的全基因组序列测序完成，该病毒被确认为属于副黏病毒科，肺炎病毒亚科，肺炎病毒属。

3．2 发病机理和流行病学CnPnV感染犬的发病机理尚不清楚，有待更深入研究。其他肺炎病毒，可通过接触患者的呼吸道分泌物传播，且气道上皮细胞是感染CnPnV的主要靶器官。将CnPnV试验性接种BALB/c小鼠后，可有效地在肺脏中复制，且可在细支气管上皮细胞中检测到病毒抗原［6］。

尽管在犬呼吸道疾病中检测出了CnPnV，但在疾病发生发展过程中CnPnV的致病性尚需更多地探索研究。广泛开展血清学调查和监测将成为必要，以确定该病在全球的流行情况。

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3．3 诊断目前，该病惟一的诊断方法为首次发现该病毒时所采用的定量RT-PCR。诊断样品包括鼻咽拭子、气管冲洗液和支气管肺泡灌洗液，以及尸体剖检采集的肺脏和上呼吸道样品。

4 犬冠状病毒泛热带变异株

4．1 病原学CCoV历来被认为是一种低毒力的肠道致病原，常可从腹泻病犬及无临床症状犬的粪便中检测分离到。2005年，从犬病变的肺脏中检测到CCoV。犬感染CCoV的临床症状主要表现在胃肠道和神经系统，但在病犬肺脏中检测到CCoV，表明其在CIRD发病机制中有可能起到一定的作用。为与纯粹的嗜肠道病毒相区别，将肺脏中新发现的病毒命名为犬冠状病毒泛热带变异株。

与CRCoV(一种β-冠状病毒)相比，CCoV属于α-冠状病毒属，和猫冠状病毒(FCoV)及猪传染性胃肠炎病毒亲缘关系非常密切。CCoV可分为与FCoV I型亲缘关系密切的CCoV I型，和CCoV II型，II型又可进一步分为IIa和IIb。

4．2 发病机理和流行病学试验性感染表明，2．5月龄犬比6月龄犬表现出更为严重的临床症状。感染犬的淋巴细胞可减少到不足正常时的60%，且CD4+T淋巴细胞减少可持续至感染后30天。

该病在意大利首次暴发，后相继在法国和比利时［7］、希腊［8］发生。临床症状包括呕吐、腹泻和抽搐。采用RT-PCR在所有病犬肺脏中均检测到CCoV，且肺脏存在亚临床间质性肺炎和肺泡水肿的病变。Takano等的研究显示，在CCoV感染的犬中，CCoV-Ⅰ和CCoV-Ⅱ的感染率分别为88.9%和7．4%［9］。

4．3 临床症状病犬常表现为嗜睡、呕吐、出血性腹泻和神经症状，患犬于临床症状出现数天后死亡。剖检可见出血性肠炎、血性腹腔积液、肺脏多灶性实变、肝脾表面出血、淋巴结表面点状出血、肾脏多灶性出血。

组织病理学检查显示，在支气管、细支气管和肺泡内存在纤维蛋白脓性渗出物;支气管和细支气管上皮细胞变性;纤维素样血管坏死;肺泡出血和水肿。肠外病变包括脾脏内淋巴缺失和急性肾脏梗塞。

4．4 诊断通过应用犬或猫细胞系从肠外组织中分离病毒，或应用RT-PCR从肠外组织中检测病毒，均为确诊方法。其他诊断方法尚未得到证实。

5 小结

犬是人类重要的伴侣动物，其健康越来越受到人们的重视。CIRD是一种复杂的不断变化的传染病，也是临床中最常见的疾病之一，该病的预防和控制倍受兽医师和宠物主人的关注。随着犬与人类的关系日益亲密，更应加强对CIRD的全面调查。兽医要时刻警惕新型病毒感染犬的可能性，以及犬中的新型病毒通过人-犬的亲密接触而增加感染人的机会。因此，犬的新型病毒不仅影响犬的健康，也对公共卫生安全构成严重威胁。

参考文献:

［1］Lin H T，Wang C H，Chueh L L，et al．Influenza A(H6N1)Virus in Dogs Taiwan［J］．Emerg Infect Dis，2015，21(12):2154-2157．

［2］Dundon W G，De Benedictis P，Viale E，et al．Serologic evidence of pandemic(H1N1)2009 infection in dogs，Italy［J］．Emerg Infect Dis，2010，16(12):2019-2021．

［3］Zeng X J，Lin Y，Zhao Y B，et al．Experimental infection of dogs with H3N2 canine influenza virus from China［J］．Epidemiol Infect，2013，141(12):2595-2603．

［4］Mitchell J A，Brooks H W，Szladovits B，et al．Tropism and pathological findings associated with canine respiratory coronavirus (CRCoV)［J］．Vet Microbiol，2013，162(2-4):582-594．

［5］Decaro N，Pinto P，Mari V，et al．Full-genome analysis of a canine pneumovirus causing acute respiratory disease in dogs，Italy［J］．PLoS One，2014，9(1):e85220．

［6］Percopo C M，Dubovi E J，Renshaw R W，et al．Canine pneumovirus replicates in mouse lung tissue and elicits inflammatory pathology［J］．Virology，2011，416(1-2):26-31．

［7］Zicola A，Jolly S，Mathijs E，et al．Fatal outbreaks in dogs associated with pantropic canine coronavirus in France and Belgium［J］．J Small Anim Pract，2012，53(5):297-300．

［8］Decaro N，Cordonnier N，Demeter Z，et al．European surveillance for pantropic canine coronavirus［J］．J Clin Microbiol，2013，51 (1):83-88．

［9］Takano T，Yamashita S，Murata-Ohkubo M，et al．Prevalence of canine coronavirus(CCoV)in dog in Japan:detection of CCoV RNA and retrospective serological analysis［J］．J Vet Med Sci，2016，78 (2):341-345．

S855．3

A文章标号:0529-6005(2017)01-0070-02

2016-05-26

河南省农业科学院科研发展专项资金(20153606);河南省农业科学院2016年度院自主创新基金项目(2016IC52)

王文佳(1987-)，女，实验师，硕士，主要从事动物病原学分离鉴定工作，E-mail:wangwenjia052@163．com

师志海，E-mail:szhvet@163．com