佩兰的化学成分

杨锦强，杨念云，吴南

（南京中医药大学药学院，江苏南京210023）

·实验研究·

佩兰的化学成分

杨锦强，杨念云，吴南

（南京中医药大学药学院，江苏南京210023）

目的研究佩兰Eupatorium fortunei Turez的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH－20凝胶柱色谱，以及重结晶等技术，对佩兰的化学成分进行分离纯化，并通过1H－NMR，13C－NMR，质谱等技术对化合物进行结构鉴定。结果从佩兰中分离得到8个化合物，分别为1－O－ －D－吡喃葡萄糖基－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羟基棕榈酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇（化合物1），1－O－ －D－吡喃葡萄糖－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羟基二十四烷酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇（化合物2），蒲公英甾醇（化合物3），蒲公英甾醇乙酸酯（化合物4），2－O－ －D－吡喃葡萄糖基反式肉桂酸（化合物5），异鼠李素－3－O－芸香糖苷（化合物6），尿嘧啶（化合物7），3，5－二羟基苯甲酸（化合物8）。化合物1和化合物2为脑苷脂类化合物。结论所有化合物均为首次从该佩兰中分离得到。

佩兰；脑苷脂类；蒲公英甾醇；2－O－ －D－吡喃葡萄糖基反式肉桂酸

佩兰为菊科泽兰属植物佩兰Eupatorium fortunei Turez的地上部分，又名香草、小泽兰、大泽兰、鸡骨香，主产于华东、华南和西南等地区，喜温暖湿润气候，高温高湿环境生长较快。其为多年生草本植物，味微苦，性寒，具有清热解暑、芳香化湿、健胃开胃、发表去湿、和中化浊、杀虫抑菌的功效，可治疗胸闷腹满、无汗发热、口中甜腻、伤暑头痛、口臭等症状[1]。近年来，对于佩兰化学成分的研究主要集中在其挥发油成分，而对其他成分的研究相对较少。本研究中对佩兰的化学成分进行系统分离鉴定，为进一步研究其药理作用和合理利用佩兰资源提供理论依据。现报道如下。

1 仪器与试药

仪器：Bruker ARX－300型和DRX－500型核磁共振仪(德国Brucker公司)；Zabspec质谱仪，LCQ－Advantage质谱仪(美国Waters公司)；薄层层析硅胶板，柱层析色谱硅胶（100－200目，200－300目，300－400目)，均购自青岛海洋化工厂分厂；Sephadex LH－20凝胶色谱柱（Pharmacia公司）。

试药：佩兰（市售品），由南京中医药大学吴南教授鉴定为Eupatorium fortunei Turez，标本保存于南京中医药大学生药学实验室。所有有机试剂均为分析纯（南京化学试剂股份有限公司）。

2 方法与结果

2.1 化学成分的提取

称取干燥的佩兰地上部分10 kg（经粉碎），用水回流提取3次，每次2 h，过滤收集，合并提取液；再用无水乙醇回流提取3次，每次2 h，过滤收集，合并提取液；合并水提液和醇提液，减压浓缩至无醇味，得含水浸膏；依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到石油醚层部位、乙酸乙酯层部位、正丁醇层部位；分别减压回收溶剂，得到浸膏。

2.2 化合物的分离

将石油醚部位浸膏硅胶干法上柱，进行硅胶柱层析色谱分离，经石油醚－乙酸甲酯系统梯度洗脱，得到130个馏分，薄层层析分析，合并馏分。将编号P－21馏分结晶，进一步纯化得化合物4（8 mg）；将编号P－37馏分结晶，进一步纯化得化合物3（35 mg）。

将乙酸乙酯部位浸膏硅胶干法上柱，进行硅胶柱层析色谱分离，经二氯甲烷－甲醇系统梯度洗脱，得到102个馏分，薄层层析分析，合并馏分。将编号E－63～74的馏分合并上硅胶柱，经二氯甲烷－甲醇系统梯度洗脱（100∶0，10∶1，8∶1），编号A－21馏分结晶，进一步纯化得化合物2（8 mg）；将编号E－75～83的馏分合并上Sephadex LH－20凝胶柱，经甲醇洗脱，洗脱馏分中S－7为纯化合物，得化合物1（5 mg）；编号E－91馏分结晶，进一步纯化得化合物5（10 mg）。

将正丁醇部位浸膏硅胶干法上柱，进行硅胶柱层析色谱分离，经二氯甲烷－甲醇系统梯度洗脱，得到104个馏分，薄层层析分析，合并馏分。将编号B－6馏分结晶，进一步纯化得化合物7（10 mg）；编号B－23馏分结晶，进一步纯化得化合物8（25 mg）；编号B－36馏分结晶，进一步纯化得化合物6（1 mg）。

2.3 结构鉴定

2.3.1 化合物1

白色无定型粉末（甲醇）。ESI－MS(m/z):732.5[M＋H]＋，714.8[M－OH]＋，570.5[M＋H－162]＋，551.4[M－H－179]＋，298.0[M＋H－255－179]＋。1H－NMR（500 MHz，ACETONE－d6）δ：0.88（6H，t，J＝6.5Hz，2 x Me），1.29[s，（CH2）n]，4.33（1H，d，J＝7.5Hz，1″－H），3.55（1H，m，6″－Ha），3.65（1H，m，6″－Hb），3.63（1H，m，1－Ha），3.74（1H，m，1－Hb），4.03（1H，m，2－H），3.37（1H，m，3－H），3.31（1H，m，4－H），3.88（1H，m，2′－H），7.51（1H，d，J＝8.5 Hz，N－H）。以上数据与文献[2]报道一致，故鉴定化合物1为1－O－β－D－吡喃葡萄糖基－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羟基棕榈酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇。

2.3.2 化合物2

白色无定型粉末（甲醇）。ESI－MS(m/z):844.2[M＋H]＋，816.5[M－OH]＋，682.5[M＋H－162]＋，664.4[M－H－179]＋，478.3[M＋H－367]＋，460.4[M＋H－367－H2O]＋，298.0[M＋H－367－179]＋，280.2[M＋H－367－179－H2O]＋。1H－NMR（500 MHz，DMSO－d6）δ：0.85（6H，t，J＝6.5 Hz，2 x Me），1.23[s，（CH2）n]，4.14（1H，d，J＝7.5 Hz，1″－H），3.43（1H，m，6″－Ha），3.65（1H，m，6″－Hb），3.63（1H，m，1－Ha），3.79（1H，m，1－Hb），4.10（1H，m，2－H），3.36（1H，m，3－H），3.34（1H，m，4－H），3.83（1H，m，2′－H），7.50（1H，d，J＝9 Hz，N－H），5.32（1H，9－H），5.39（8－H）。13C－NMR（125 MHz，DMSO－d6）δ：14.39（Me），22.54，24.90，26.08，27.12，17.42，29.14，19.43，29.51，29.64，69.34（C－1），70.49（C－4″），71.04（C－4），71.39（C－2′），73.92（C－2″），74.68（C－3），76.99（C－3″），77.36（C－5″），103.94（C－1″），129.83（C－9），130.31（C－8），174.23（C－1′）。以上数据与文献[2－3]报道一致，故鉴定化合物2为1－O－β－D－吡喃葡萄糖－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羟基二十四烷酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇。

2.3.3 化合物3

白色片状结晶（二氯甲烷－乙醇）。ESI－MS(m/z):426[M]＋。1H－NMR（300 MHz，CDCl3）δ：4.69（1H，brs，H－30a），4.56（1H，brs，H－30b），3.18（1H，dd，J＝11 Hz，5.4 Hz，H－3），1.68（3H，s，H－30），1.01（3H，s，H－26），0.95（3H，s，H－27），0.94（3H，s，H－23），0.83（3H，s，H－25），0.79（3H，s，H－28），0.76（3H，s，H－24）。13C－NMR（75 MHz，CDCl3）δ：38.75（C－1），28.01（C－2），77.01（C－3），38.11（C－4），55.35（C－5），18.35（C－6），35.62（C－7），40.90，（C－8），50.49（C－9），37.01（C－10），21.39（C－11），25.20（C－12），39.10（C－13），42.11（C－14），27.32（C－15），38.30（C－16），34.33（C－17），48.36（C－18），39.40（C－19），153.92（C－20），26.23（C－21），40.03（C－22），27.48（C－23），15.38（C－24），16.12（C－25），16.01（C－26），15.53（C－27），20.97（C－28），109.31（C－29），25.75（C－30）。以上数据与文献[4－5]报道一致，故鉴定化合物3为蒲公英甾醇。

2.3.4 化合物4

白色粒状结晶（乙酸乙酯）。ESI－MS(m/z):468[M]＋。1H－NMR（300 MHz，CDCl3）δ：4.64（1H，brs，H－29a），4.59（1H，brs，H－29b），4.48（1H，dd，J＝5.5 Hz，11 Hz，H－3），2.03（3H，s，COCH3），1.02（3H，s，H－30），0.99（3H，s，H－26），0.88（3H，s，H－27），0.85（3H，s，H－23），0.84（3H，s，H－25），0.84（3H，s，H－28），0.81（3H，s，H－24）。13C－NMR（75 MHz，DMSO－d6）δ：38.95（C－1），26.14（C－2），79.89（C－3），37.71（C－4），54.59（C－5），18.16（C－6），33.39（C－7），40.06（C－8），49.56（C－9），37.31（C－10），21.41（C－11），23.31（C－12），39.22（C－13），40.34（C－14），27.61（C－15），38.21（C－16），35.10（C－17），49.56（C－18），39.50（C－19），153.88（C－20），25.61（C－21），38.67（C－22），28.86（C－23），17.65（C－24），16.35（C－25），15.95（C－26），14.44（C－27），19.23（C－28），107.23（C－29），25.09（C－30），170.63（COCH3），21.24（COCH3）。以上数据与文献[4－6]报道一致，故鉴定化合物4为蒲公英甾醇乙酸酯。

2.3.5 化合物5

白色粉末。ESI－MS(m/z):349[M＋Na]＋。1H－NMR(500 MHz，DMSO－d6)δ:7.22（1H，d，J＝8.0 Hz，H－3），7.40（1H，t，J＝7.7，H－4），7.06（1H，t，J＝7.5 Hz，H－5），7.71（1H，d，J＝7.7 Hz，H－6），7.94（1H，d，J＝16.0 Hz，H－7），6.55（1H，d，J＝16.0 Hz，H－8），5.03（1H，d，J＝7.0 Hz，H－1′）。13C－NMR（125 MHz，DMSO－d6）δ:121.9（C－1），155.6（C－2），115.1（C－3），131.4（C－4），123.3（C－5），128.0（C－6），138.7（C－7），119.6（C－8），167.8（C－9），100.0（C－1′），73.3（C－2′），77.0（C－3′），69.6（C－4′），76.7（C－5′），60.6（C－6′）。以上数据与文献[7]报道一致，故鉴定化合物5为2－O－β－D－吡喃葡萄糖基反式肉桂酸。

2.3.6 化合物6

淡黄色粉末。ESI－MS(m/z):623[M－H]－。1H－NMR(500 MHz，DMSO－d6)δ：12.58（1H，s，OH－5），7.99（1H，d，J＝2 Hz，H－2′），7.51（1H，dd，J＝2 Hz，8.5 Hz，H－6′），6.90（1H，d，J＝8.5 Hz，H－5′）6.43（1H，d，J＝1.5 Hz，H－8），6.20（1H，d，J＝1.5 Hz，H－6）5.44（1H，d，J＝7.5 Hz，H－1″），4.42（1H，s，H－1‴），3.85（1H，s，3′－OCH3），3.06～3.64（10H of 3－O－glc，3－O－rha），1.05（1H，d，J＝3 Hz，H－6‴）。以上数据与文献[8－9]报道一致，故鉴定化合物6为异鼠李素－3－O－芸香糖苷。

2.3.7 化合物7

白色无定型粉末。ESI－MS(m/z):112[M]＋（100），68（60）。1H－NMR(500 MHz，ACETONE－d6)δ:10.78(1H，s，H－1)，10.96（1H，s，H－3），5.64（1H，d，J＝7.6 Hz，H－5），7.38（1H，d，J＝7.6 Hz，H－6）。以上数据与文献[10]报道一致，故鉴定化合物7为尿嘧啶。

2.3.8 化合物8

白色结晶性粉末（二氯甲烷－乙醇）。ESI－MS(m/z):155[M]＋。1H－NMR（500 MHz，ACETONE－d6）δ：12.78（1H，s，COOH），9.67（2H，s，3，5－OH），6.99（2H，d，J＝3.0 Hz，H－2，6），6.68（1H，t，J＝3.0 Hz，H－4）。13CNMR（125 MHz，DMSO－d6）δ:169.3（COOH），158.8（C－3，5），133.4（C－1），112.6（C－2，6），108.5（C－4）。以上数据与文献[11－12]报道一致，故鉴定化合物8为3，5－二羟基苯甲酸。

3 讨论

本研究中首次从佩兰中分离出脑苷脂类（化合物1和化合物2）、蒲公英甾醇、蒲公英甾醇乙酸酯等成分。脑苷脂是酰基鞘氨醇上以糖苷键结合1分子六碳糖而成的化合物，脑苷脂类成分已用于治疗神经系统疾病，国外脑苷脂类成分已应用于改善老年性脑功能衰退[13]。此外，脑苷脂类成分具有抑制肿瘤和调控细胞生长、抗病毒等药理活性，应用前景十分广阔[14－15]。蒲公英甾醇，蒲公英甾醇乙酸酯是蒲公英烷型五环三萜类化合物，有研究发现，此类化合物具有抗菌、抗炎、抗病毒、调节血糖、免疫调节、降血压和抗肿瘤活性[16]。本研究中系统分离了佩兰的化学成分，丰富了佩兰化学成分的种类，为其质量标准的制订和质量控制，以及为进一步研究药理活性和合理利用资源提供了理论依据和参考。

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Chemical Constituents of Eupatorium Fortunei Turez

Yang Jinqiang,Yang Nianyun,Wu Qinan
(College of Pharmacy,Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing,Jiangsu,China210023)

ObjectiveTo study the chemical constituents of Eupatorium fortunei Turez.M ethodsThe chemical constituents of Eupatorium fortunei Turez were isolated and purified by silica gel column,Sephadex LH－20 chromatography and recrystallization and the compounds were identified by1H－NMR,13C－NMR and Mass spectrometry.ResultsEight compounds were isolated and elucidated fromEupatoriumfortunei Turez,they were 1－O－β－D－glucopyranosyl－(2 S,3 S,4 R,8 E)－2－[(2′－R)－2′－hydroxypalmitoyl－amino]－8－octadecene－1,3,4－triol(Compound 1),1－O－β－D－glucopyranosyl－(2 S,3 S,4 R,8 E)－2－[(2′－R)－2′－hydroxydocosanosylamino]－8－octadecene－1,3,4－triol(Compound 2),taraxasterol(Compound 3)taraxasterol acetate(Compound 4),trans－melilotoside(Compound 5),isorhamnetin－3－O－rutinoside(Compound 6),uracil(Compound 7),3,5－dihydroxybenzoic acid(Compound 8),respectively.Compound 1 and Compound 2 were cerebroside compounds.Conclusion All compounds were isolated from Eupatorium fortunei Turez for the first time.

Eupatorium fortunei Turez;cerebroside;taraxasterol;trans－melilotoside

R282.71；R284.1

A

1006－4931(2017)21－0004－03

10.3969/j.issn.1006－4931.2017.21.002

2015年国家中医药管理局资助项目[201507002]。

杨锦强（1990－），在读硕士研究生，研究方向为天然药物生产加工与品质评价，（电子信箱）13770676634＠163.com。

吴南，教授，硕士研究生导师，博士研究生导师，研究方向为中药天然药物资源化学，（电子信箱）qnlxw＠yahoo.com.cn。

2017－08－06）