针灸治疗慢性心肌缺血模型猪综合影像评价优化方案

2017-01-12方继良贾术永张金铃李远竞佟海滨张今朝朱秀玲荣培晶梁繁荣

中国中西医结合影像学杂志 2017年2期

关键词：巴比妥钠心电小猪

包岩，方继良，贾术永，张金铃，贺毅，高波，李远竞，佟海滨，赵青，刘欢，何勋，张今朝，朱秀玲，荣培晶，梁繁荣

（1.中国中医科学院广安门医院a放射科b核医学科c超声科，北京 100053；2.中国中医科学院针灸研究所，北京 100700；3.首都医科大学附属安贞医院放射科，北京100029；4.成都中医药大学，四川成都 610075）

经验交流

针灸治疗慢性心肌缺血模型猪综合影像评价优化方案

包岩1a，方继良1a，贾术永2，张金铃2，贺毅3，高波1b，李远竞1c，佟海滨1a，赵青1a，刘欢1a，何勋2，张今朝1a，朱秀玲1a，荣培晶2，梁繁荣4

内关穴；针刺；小猪慢性缺血心脏模型；诊断显像

冠心病是一种严重威胁人类健康和生命的疾病，具有较高的致残率和死亡率。心肌缺血是引起冠心病的常见病因。目前关于综合影像学评价中华小型猪慢性心肌缺血已有相关报道，但缺乏心电图、心肌缺血白蛋白等指标，以及 MRI的T1mapping、CT冠脉成像的综合评价报道，特别是缺乏针灸治疗慢性心肌缺血前后的多项评价指标的报道。本实验选用中华小型猪23只，行超声心动图、心电图、实验室检查及CT、MRI心脏成像后，于冠状动脉左前降支近中段交界区置入蛋白缩窄环；4周时，建立慢性心肌缺血模型，行第2次上述检查，最后针刺前肢内关穴和（或）后肢足三里穴治疗；2周后，行第3次上述检查。本文将讨论这些评价指标综合应用优化的实验方案［1-3］，给相关研究者提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料选用健康中华小型猪23只，体质量在18～25 kg，年龄≤1龄。所有动物研究完全符合国家《实验动物管理条例》，经阜外心血管病医院动物实验伦理委员会批准（批号：2013-1-25-973）。实验中死亡8只（造模前2只、造模型后6只）。

1.2 麻醉方案肌内注射氯胺酮（剂量0.28 mL/kg体质量）与戊巴比妥钠（剂量15 mg/kg体质量），或戊巴比妥钠（剂量15 mg/kg体质量）与速眠新Ⅱ（剂量0.1 mL/kg体质量）2种方法。

1.3 心电图采用12导全心电图，记录各导联的缺血情况［4］。

1.4 超声心动图采用彩色超声诊断仪（HITACHI Ascendus）检测左心功能及形态。

1.5 实验室检查采前腔静脉血，检测血清CK-MB、IMA、cTnT、AngⅡ，检测缺血状态［5-7］。

1.6 MRI扫描使用Siemens Skyra 3.0 T MRI扫描仪及心脏序列。查阅相关资料，测试2只后，得到优化方案，先行心脏定位扫描：行二腔心、四腔心及短轴位的定位；再行心脏电影：四腔心、两腔心及短轴位心底-心尖8层，检测心功能及运动状态；T1maping：短轴位心尖-乳头肌-心底部3层，两腔心1层；负荷心肌灌注扫描：药物ATP使用参照0.15 mg·min-1·kg-1比例泵入，3 min 30 s开始MRI扫描，共6 min；扫描同时高压注射对比剂Gd-DTPA（剂量0.1 mL/kg体质量），流率5 mL/s，盐水20 mL，扫描左室短轴3层，四腔心1层，连续50次，从平扫到强化扫描，检测心肌血供状态；复制心脏电影层面，延迟开始时追加对比剂（剂量0.1 mL/kg体质量），流率2 mL/s，20 mL盐水；延迟10 min后，检测心肌延迟强化显像，心肌缺血、坏死或纤维化情况［8-10］。

1.7 CT扫描使用Siemens Flash第2代双源64排CT机。试验5只后，获得优化方案，先分别行冠状位、矢状位定位像扫描；再行钙化积分扫描，观察伪影情况，发现伪影时，及时调整电极片；与心脏MRI一样方式行ATP微量泵入，3 min 30 s后，同时高压注射碘海醇（370 mgI/mL）30 mL，流率3 mL/s，再以同样流率注入0.9%氯化钠注射液10 mL冲管；ATP注射液继续泵入到6 min注射完毕，高压注射碘海醇时行双能量心肌增强扫描；延迟5 min，再行增强扫描后静息时行双能量心脏扫描［9，11-12］。

1.8 埋针方法取右侧内关穴（实验组）或后足三里穴（对照组），先电针20 min，后埋针。通过测试开始的2只猪，发现由于小猪的皮肤较厚，无法使用常规针具达到穴位的刺激作用，遂自制针具进行埋针。将7号埋线针的内芯取出，用95%酒精消毒；将内芯截取为每段1.5 cm，用砂纸把所截取内芯的2段打磨光滑；将处理好的内芯泡在75%的医用酒精中待用。用镊子夹取一段已经消毒备用的内芯，从针孔放置在穿刺针套管的前端（9号），从套管尾孔插入一段针芯。右手持针柄，左手夹住套管中下段，将针刺入皮肤后，快速刺入皮下或肌层；退针后，用碘酒消毒针孔，并用消毒纱布包扎好。

2 结果

本实验23只小型猪，死亡8只，15只行影像学检查，其中12只心脏MRI扫描顺利，占80%；14只心脏双能量CT扫描成功，占93%，其中5只采用超声心脏扫描，均检查顺利。心脏综合影像学检查成功的小猪中，90%图像清晰度达到诊断需要。

3 讨论

3.1 麻醉注意事项 ①实验前12 h禁食水，以免在实验中呕吐。②氯胺酮与戊巴比妥钠联合应用效果最佳，从实验的麻醉效果看，小型猪在注射麻药后数分钟均进入麻醉状态，且苏醒所需时间短，对呼吸、心率影响较小。③在缺少氯胺酮时，采用戊巴比妥钠与速眠新Ⅱ联合，注意戊巴比妥钠配制时间不易太久，否则易出现结晶，影响麻醉效果，建议实验前5 h内配制。④麻醉后注意保暖，因速眠新Ⅱ影响体温，如不注意保暖易引起麻醉意外。⑤戊巴比妥钠与速眠新Ⅱ2种药物不能用同一注射器、注射部位也不能过近，否则会产生凝结现象而失效，影响麻醉效果。⑥戊巴比妥钠与速眠新Ⅱ联合应用时，应注意观察小型猪呼吸情况，因戊巴比妥钠影响呼吸，如发现呼吸浅快，应注射解毒剂或行胸部按压辅助呼吸，以免发生麻醉意外。

3.2 心电图经验 ①备皮要干净，因小型猪前胸壁欠规则，必要时需人工按压电极片紧贴小猪前胸壁。②扫描开始因小猪心电T波高尖，CT或MRI心电门控技术常误认为R波，出现一次心跳算2次假高心率状态，心电突发异常，舒张期和收缩期分界不清，图像重建出现双期重影现象，此时须换另一种心电门控方式直到触发正常。③扫描时，如出现心率突然变快或紊乱，应即刻停止扫描，经药物稳定心率后继续扫描。④需采用专用MRI心脏电极片，否则有磁性易导致心电不稳或检测不到心电。

3.3 CT扫描技术优化 ①试验猪在行CCTA前经过药物处理后，使心率稳定在60～80次/min；②虽无法进行严格的屏气准备，但呼吸幅度不是太大，除去呼吸指令的延时时间，可更加有效追踪到对比剂到达冠脉主干位置。

3.4 MRI扫描优化猪的心脏结构虽与人类似，但其心房心室更加平行于身体冠状面，定位时应注意。

3.5 超声心动图注意事项在探头检测处，备皮要干净，保障耦合剂与探头接触良好。

3.6 实验扫描顺序优化实验中个别小猪先行CT扫描，后行MRI扫描，结果发现图像质量不佳，可能因为MRI扫描时间长，受心律和心率影响更大；CT扫描时间短，受心律和心率影响较小，图像质量易得到保障。因此，之后均先行MRI检查再行CT扫描。

3.7 取穴方法取右侧内关穴或足三里穴。取穴方法应结合比较解剖学，采用类似人体经穴取穴法。

总之，本实验采取心脏MRI、心脏CT、超声心动图、心电图及血清心肌酶测定多种方法探索针灸治疗慢性心肌缺血模型猪的疗效，故实验难度明显增加，实验流程复杂且较长。优化实验方案后，实验成功率、图像质量明显提高，结果较稳定。

［1］宋春华.冠心病心绞痛针灸作用机理研究进展［J］.针灸临床杂志，2008，24（4）：49-51.

［2］余情，胡玲，吴子建，等.针灸治疗冠心病的国内研究进展［J］.中国中医急症，2013，22（7）：1183-1186.

［3］刘少忠，黄连军，赵世华，等.慢性心肌缺血的实验性动物模型初步研究报告［J］.中国综合临床，2002，18（8）：685-686.

［4］方继良，周晟芳，荣培晶，等.内关穴埋针疗法对慢性心肌缺血模型猪心电图改变的影响［J］.中国中西医结合杂志，2016，36（12）：1470-1474.

［5］刘亚千，李春海，陈华.小型猪采血技术［J］.实验动物科学，2008，25（5）：65-67.

［6］何本炎，邓梅仙.猪前腔静脉注射法的应用体会［J］.中国兽医杂志，1994，20（12）：22-23.