丙泊酚和依托咪酯用于雄性SD大鼠麻醉效果的比较

石福，张益，喻田

丙泊酚和依托咪酯用于雄性SD大鼠麻醉效果的比较

石福，张益，喻田△

目的 序贯法测定雄性SD大鼠静脉麻醉丙泊酚和依托咪酯的95%有效剂量（ED95），比较2种麻醉药物的效能和麻醉维持时间。方法28只雄性SD大鼠随机分成丙泊酚组和依托咪酯组，每组14只。以翻正反射作为意识的判定指标。根据公式Y=Ymin+（Ymax-Ymin）/［1+10log（ED50-X）×m］拟合大鼠翻正反射消失的剂量-反应性曲线。分别测定丙泊酚和依托咪酯的ED95和大鼠静脉注射等效剂量的2种药物后麻醉持续时间。结果测得两组SD大鼠丙泊酚ED95为9 mg/kg，依托咪酯ED95为1.5 mg/kg，丙泊酚与依托咪酯ED95的比值为6。丙泊酚组大鼠麻醉维持时间（465.6±18.5）s，依托咪酯组麻醉维持时间（233.7±9.3）s，两组差异有统计学意义（P＜0.05）。结论以ED95为等效剂量，丙泊酚组麻醉维持时间长于依托咪酯组。

二异丙酚；依托咪酯；麻醉；大鼠，Sprague-Dawley；序贯法；95%有效剂量；翻正反射

丙泊酚和依托咪酯具有相似的药理学特性。两者主要通过作用于抑制性γ氨基丁酸（GABA）受体，降低促觉醒神经核团神经元，即结节乳头体核组氨酸能神经元［1］、基底前脑胆碱能神经元［2］、穹窿区促食欲素能神经元［3］的活性，增加视前腹外侧核GABA能神经元［4］的活性，从而发挥催眠作用，致大鼠意识消失。有研究显示，翻正反射可用于评估大鼠意识状态，给予/停用麻醉药后反射消失/恢复，可作为全麻判断意识消失的指标［5］。本研究以翻正反射判定意识状态，采用序贯法［6］测定丙泊酚和依托咪酯的95%有效剂量（ED95），并记录单次静脉注射ED95药物后大鼠翻正反射恢复时间，以期获得大鼠活体麻醉实验数据，为相关实验提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验动物28只健康雄性SD大鼠饲养于本实验室SPF级动物房，体质量250～320 g，购自重庆第三军医大学医学实验动物中心，动物许可证号:SCXK（渝）2012-0005。采用随机数字表法将28只雄性SD大鼠分成丙泊酚组和依托咪酯组，每组14只。

1.2 实验材料小动物固定器、医用脱脂棉球、75%乙醇、双氧水、一次性橡胶手套、24G密闭静脉留置针、5 U/mL肝素生理盐水、医用胶布、一次性注射器（1 mL）、微量进样器（100 μL）、1%丙泊酚（意大利Astrazeneca SPA公司），0.2%依托咪酯（江苏恩华药业有限公司）。

1.3 实验方法

1.3.1 穿刺置管分别将SD大鼠在清醒状态下置于固定器内，尾部外露，保证大鼠呼吸通畅。大鼠尾静脉穿刺置管成功后，将其放入鼠笼内静置15 min。

1.3.2 ED95的测定静脉注射丙泊酚累积剂量从4 mg/kg开始，每30 s以1 mg/kg的剂量递增，累积总量为10 mg/kg。依托咪酯麻醉起始剂量为0.8 mg/kg，每30 s以0.1 mg/kg的剂量递增，累积总量为1.6 mg/kg。每次静脉注射药物后，位于仰卧位的大鼠在30 s之内未能翻转过来，则视为翻正反射消失阳性，反之则视为翻正反射消失阴性。最后，通过记录每种麻醉药物剂量-翻正反射消失的对应数据，计算出每个剂量下致大鼠翻正反射消失的百分比。依据剂量-反应平衡公式：Y=Ymin+（Ymax-Ymin）［/1+10log（ED50-X）×m］。Y表示麻醉的百分率，Ymin和Ymax代表的Y的最小值和最大值，ED50表示麻醉药物致半数大鼠意识消失的剂量值，X表示对数化后的药物浓度，m表示拟合曲线整体的斜率。计算出丙泊酚和依托咪酯致大鼠翻正反射消失的ED95。

1.3.3 翻正反射消失的持续时间大鼠置于仰卧位，单次静注等效的ED95丙泊酚或依托咪酯后观察，直至大鼠能主动独自翻转至俯卧位，认为翻正反射恢复。记录注药后大鼠翻正反射消失及持续时间。

1.4 统计学方法数据采用SPSS 18.0统计软件处理，计量资料采用均数±标准差表示，组间比较采用独立样本t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.12 种麻醉药物ED95的测定结果丙泊酚致大鼠翻正反射消失的ED50和ED95分别为7.11 mg/kg和9.00 mg/kg，依托咪酯ED50和ED95分别为1.19 mg/kg和1.50 mg/kg，丙泊酚与依托咪酯ED95的比值为6。两药致大鼠翻正反射消失的剂量-反应性曲线见图1。

Fig.1 The dose-response curve showing percentage rates of lost righting reflex after intravenous administration of propofol and etomidate图1 丙泊酚和依托咪酯致大鼠翻正反射消失的剂量-反应性曲线

2.2 两药致大鼠翻正反射消失持续时间比较单次静脉注射9.00 mg/kg丙泊酚和1.50 mg/kg依托咪酯致大鼠翻正反射消失的平均持续时间分别为（465.6±18.5）s和（233.7±9.3）s，前者长于后者（n=14，t=11.180，P＜0.05）。

3 讨论

良好的麻醉效果是实施动物实验的一个重要前提，在对实验动物实行预定的手术操作前，必须要对动物进行较理想的麻醉。丙泊酚和依托咪酯是临床上常用的短效静脉麻醉药［7］，如今也越来越多地用于动物实验麻醉。目前已有研究报道丙泊酚腹腔给药用于SD大鼠的基础研究，测得丙泊酚的ED95为140 mg/kg，翻正反射恢复的平均时间为92.6 min［8］。迄今，丙泊酚和依托咪酯用于SD大鼠静脉麻醉的剂量尚鲜见定量研究。故本实验采用序贯法测得了静脉注射丙泊酚致SD大鼠意识消失的ED95为9 mg/kg，翻正反射恢复的平均时间为（465.6±18.5）s。显然，静脉麻醉相比腹腔麻醉不仅所需要的丙泊酚剂量较小，而且麻醉恢复时间较短。

此外，腹腔麻醉还存在如下缺点：（1）腹腔麻醉的可控性差，药物浓度很难达到稳定状态。有文献报道单次大鼠腹腔注射麻醉的死亡率在10%～20%［9］。（2）由于丙泊酚和依托咪酯溶液是白色脂肪乳，腹腔注射时会对腹腔手术视野造成一定的影响。（3）腹膜血浆屏障的存在增加了腹腔给药的起效时间［10］。

本实验得出的丙泊酚静脉麻醉ED95为9 mg/kg，这与文献采用的丙泊酚静脉麻醉剂量10 mg/kg［11］相近。采用静脉注射丙泊酚和依托咪酯后大鼠翻正反射均在10 s内迅速消失；翻正反射在10 min内均能恢复，做到了快速诱导和安全苏醒。实验鼠体质量250～320 g，采用100 μL的微量进样器进行梯度给药确保了给药的精准性。

综上所述，静脉注射丙泊酚（9 mg/kg）和依托咪酯（1.5 mg/kg）麻醉诱导起效快，麻醉苏醒过程中大鼠生命体征平稳，无死亡，保证了动物实验的顺利进行，为相关研究提供了一个可靠的麻醉药物剂量。

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（2016-07-15收稿 2016-09-29修回）

（本文编辑 李鹏）

Comparison of anesthetic effects of propofol and etomidate in male SD rats

SHI Fu,ZHANG Yi,YU Tian△
Guizhou Key Laboratory of Anesthesia and Organ Protection，Zunyi Medical College,Zunyi 563000，China△

ObjectiveTo measure 95%effective doses(ED95)of propofol and etomidate by using up-down intravenous administration method,and compare the potency ratio and the anesthesia duration of them.MethodsTwenty eight male SD rats were divided into two groups randomly:the propofol group and the etomidate group．Loss of righting reflex was regarded as the judgment index of unconsciousness.The dose-response curve was made according to the formula of Y=Ymin+(Ymax-Ymin)/[1+10log（ED50-X）×m].Values of ED95 of propofol and etomidate were calculated,and the anesthesia duration periods after administration of the two equivalent dose drugs were measured respectively.ResultsThe values of ED95 were 9 mg/kg and 1.5 mg/kg for propofol and etomidate.The ED95 ratio for propofol and etomidate was 6.There was a significant difference in anesthesia duration between propofol group(465.6±18.5)s and etomidate group(233.7±9.3)s(P＜0.05).ConclusionThe anesthesia duration of propofol is longer than that of etomidate,taking the ED95 as equivalent dose.

propofol;etomidate;anesthesia;rats,Sprague-Dawley;up-down method;95%effective dose;righting reflex

R614.24

A

10.11958/20160625

国家自然科学基金资助项目（81560237）

遵义医学院麻醉与器官保护基础研究重点实验室（邮编563000）

石福（1990），男，硕士在读，主要从事全麻机制研究

△通讯作者E-mail:zyyutian@126.com