中草药复合微生态制剂对肉鸡肠道菌群和肝脏功能的影响

于佳民，谢全喜，徐 辉，亓秀晔，陈 振，徐海燕，谷 巍

（山东宝来利来生物工程股份有限公司，山东泰安271000）

添加剂

中草药复合微生态制剂对肉鸡肠道菌群和肝脏功能的影响

于佳民，谢全喜，徐 辉，亓秀晔，陈 振，徐海燕，谷 巍

（山东宝来利来生物工程股份有限公司，山东泰安271000）

为研究中草药复合微生态制剂（CHCP）对肉鸡肠道菌群和肝脏的保护作用，试验选用120只1日龄健康白羽肉雏鸡，随机分为4组，每组3个重复，每个重复10只鸡，对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ组、Ⅱ组饲喂基础日粮的同时分别饮水添加1‰CHCP、2‰CHCP。结果表明：在28、42日龄，Ⅰ组肉鸡盲肠乳杆菌数量在一定程度上高于阴性对照组3.15%、3.52%（P＞0.05），直肠乳酸杆菌数量高于阴性对照组8.6%、6.78%（P＜0.05）；14、28、42日龄，1‰CHCP组肉鸡盲肠、直肠大肠杆菌数量均低于阴性对照组，但差异不显著（P＞0.05）。28、42日龄，1‰CHCP组血清谷丙转氨酶水平低于阴性对照组41.05%（P＜0.05）、33.26%（P＜0.05）；42日龄时，1‰CHCP组血清谷草转氨酶水平低于阴性对照组37.11%（P＜0.05）；28、35、42日龄，1‰CHCP组总胆红素水平分别比阴性对照组低19.7%（P＞0.05）、27%（P＜0.05）、20.1%（P＞0.05）；35日龄时，1‰CHCP组内毒素水平比阴性对照组低45.1%（P＜0.01）。由此可见，该CHCP按1‰饮水添加可以促进肉鸡盲肠、直肠乳酸菌繁殖，降低肉鸡盲肠、直肠大肠杆菌的数量，起到调节肠道菌群，维护肠道健康的作用，且该CHCP按1‰饮水添加可降低肉鸡血清转氨酶活性、总胆红素和内毒素水平，对肉鸡肝脏具有一定的保护作用。

中草药复合微生态制剂；肠道菌群；肝脏功能；肉鸡

在我国畜禽养殖过程中，滥用饲用抗生素的现象普遍存在，药物残留导致家禽肝脏损伤，肝脏损伤后会造成激素、蛋白质的代谢异常，进而导致生产性能下降，引起家禽死亡，造成巨大经济损失。益生菌作为饲料添加剂，主要通过调节机体肠道菌群平衡，增强机体免疫力，起到预防疾病的作用（谢全喜等，2015）。肠道微生态平衡后，有害菌受到抑制或被杀灭，血浆内毒素降低，肝脏得到保护。中草药饲料添加剂因其疗效好、无副作用、无残留等特点被广泛用于畜禽生产中。益生菌与中草药二者具有协同作用，益生菌可以促进中草药的吸收和利用，中草药能够促进益生菌增殖（左风等，2002）。本试验将植物乳杆菌、粪肠球菌及中草药复配制成中草药复合微生态制剂（CHCP），通过验证CHCP对肉鸡肝脏的保护作用，以探索CHCP在家禽养殖中的应用价值。

1 材料与方法

1.1 试验材料 益生菌由植物乳酸杆菌（CCTCC M 2010150）、粪肠球菌（CCTCCM 2010046）及其代谢产物组成，植物乳酸杆菌含量1.0×109cfu/mL，粪肠球菌含量2.2×109cfu/mL。试验用中草药（茵陈10～20份，五味子10～15份，白芍5～8份，板蓝根10～20份，珍珠草2～4份，垂盆草3～5份等）均购自永春堂大药房，经鉴定符合中国药典2005年版的各项要求。丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TB）、内毒素（LPS）试剂盒均购自上海科华生物工程股份有限公司。主要仪器有卓越330全自动生化分析仪（上海科华生物工程股份有限公司）。

1.2 CHCP制备 称取中草药，混合，加入10倍重量的水，浸泡30min，加热至沸腾，第1次煎煮时间为60min，过滤，滤渣中再加入10倍重量的水进行第2次煎煮，煎煮时间为50min；过滤，滤渣中再加入8倍重量的水进行第3次煎煮，煎煮时间为30 min，合并滤液，浓缩至滤液浓度为1 g/mL；向浓缩后的滤液中加入益生菌菌粉，混合均匀，即得CHCP。

1.3 试验动物及饲养管理 试验肉鸡购自泰安大禹种禽场，按重复分笼饲养，自由采食和饮水。舍内光照、温度和湿度严格按照常规饲养管理要求控制，按常规免疫程序对雏鸡进行新城疫及法氏囊免疫。每日换食换水前进行食槽和饮水器杀菌消毒。试验期间详细记录各组饲料消耗及试验鸡的健康状况。

1.4 试验设计 120只1日龄健康白羽肉雏鸡，随机分为4组，试验Ⅰ组（1‰ CHCP）、试验Ⅱ组（2‰ CHCP）、试验Ⅲ组（阴性对照组）、试验Ⅳ组（空白对照组），每组3个重复，每个重复10只鸡。空白对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ、Ⅱ组在饲喂基础日粮的同时，第8天起白天饮水使用CHCP，12日龄攻毒大肠杆菌菌悬液（109cfu/mL，1mL/只）；阴性对照组在饲喂基础日粮的同时，仅在12日龄攻毒大肠杆菌菌悬液（109cfu/mL，1mL/只）。

1.5 测定指标和方法

1.5.1 肠道菌群数量测定 分别于14、28、42日龄从每个重复中随机抽取3只肉鸡称重，采用心脏注入空气法处死鸡只，无菌操作取盲肠、直肠内容物，在灭菌生理盐水中摇匀，用平板培养计数法计数肠道乳酸杆菌和大肠杆菌，其中乳酸杆菌接种于乳酸菌选择性培养基（LBS）上培养，在37℃生化培养箱中厌氧培养48 h后进行菌落计数；大肠杆菌则接种于伊红美兰琼脂培养基上培养，在37℃生化培养箱中有氧培养24 h后进行菌落计数；菌群数量以每克肠道内容物所含细菌群落总数的对数（lg cfu/g）表示。

1.5.2 血清生化指标 在试验肉鸡14、28、42日龄时，分别从各组中选择9只鸡宰杀采血，然后分离血清，由全自动生化分析仪检测血ALT、AST、TB的含量，ELISA试剂盒检测血清LPS。

1.6 数据统计与处理 试验数据采用SPSS 11.5进行统计，采用one-way ANOVA进行方差分析，采用LSD法进行组间多重比较，结果均以“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 CHCP对肉鸡肠道菌群的影响 由表1可知，在28、42日龄，Ⅰ组肉鸡盲肠乳酸杆菌数量高于阴性对照组3.15%、3.52%（P＞0.05）；在28、42日龄，Ⅰ组肉鸡直肠乳酸杆菌数量高于阴性对照组8.6%、6.78%（P＜0.05）。表明当肉鸡遭遇病原菌感染时，该CHCP按1‰添加可以促进肉鸡盲肠、直肠乳酸菌繁殖。在14、28、42日龄，Ⅰ组肉鸡盲肠、直肠大肠杆菌数量均低于阴性对照组（P＞0.05）。表明，当肉鸡遭遇病原菌感染时，该CHCP 按1‰添加可以降低肉鸡盲肠、直肠大肠杆菌的数量，起到调节肠道、维护肠道健康的作用。

2.2 CHCP对肉鸡肝脏保护的影响

2.2.1 CHCP对肉鸡血清中ALT水平的影响 由表2可知，14、21日龄，Ⅰ组ALT水平分别低于Ⅲ组1.68%、2.18%（P＞0.05）；28日龄时，Ⅰ、Ⅱ组ALT水平分别低于Ⅲ组41.05%（P＜0.01）、25.2% （P＞0.05），接近于空白组；42日龄时，Ⅰ、Ⅱ组ALT水平分别低于Ⅲ组33.26%（P＜0.05）、35.7% （P＜0.05）。总体来看，Ⅰ组即添加1‰CHCP对降低肉鸡血清ALT的作用效果较好。

表1 CHCP对肉鸡盲肠、直肠内容物中乳酸杆菌、大肠杆菌数量的影响lg cfu/g

表2 CHCP对肉鸡血清中ALT水平的影响U/L

2.2.2 CHCP对肉鸡血清中AST水平的影响 由表3可知，14日龄时，Ⅰ、Ⅱ组AST水平分别低于Ⅲ组 36.9%、36.93%（P＜0.05）；21、28、35日龄时，Ⅰ组AST水平分别低于Ⅲ组9.9%、4.37%、6.36%（P＞0.05）；42日龄时，Ⅰ、Ⅱ组AST水平分别低于Ⅲ组 37.11%（P＜0.05）、30.27%（P＜0.05）。总体来看，Ⅰ组即添加1‰CHCP对降低肉鸡血清AST的作用效果较好。

表3 CHCP对肉鸡血清中AST水平的影响U/L

2.2.3 CHCP对肉鸡血清中TB水平的影响 由表4可知，21日龄时，Ⅰ、Ⅱ组总胆红素水平分别比Ⅲ组低31.65%、37.36%（P＜0.05）；28日龄时，Ⅰ、Ⅱ组总胆红素水平分别比Ⅲ组低19.7%、 18.54%（P＞0.05），接近于空白组；35日龄时，Ⅰ、Ⅱ组总胆红素水平分别比Ⅲ组低 27%（P＜0.05）、8.27%（P＞0.05）；42日龄时，Ⅰ组总胆红素水平比Ⅲ组低20.01%（P＞0.05）。总体来看，Ⅰ组即添加1‰CHCP对降低肉鸡血清TB的作用效果较好。

表4 CHCP对肉鸡血清中TB水平的影响U/L

2.2.4 CHCP对肉鸡血清中LPS水平的影响 由表5可知，28日龄时，Ⅰ、Ⅱ组内毒素水平分别比Ⅲ组低22.3%、10.02%；35日龄时，Ⅰ、Ⅱ组内毒素水平分别比Ⅲ组低45.1%（P＜0.01）、27.9%；42日龄时，Ⅰ、Ⅱ组内毒素水平分别比Ⅲ组低23.41%、25.99%。表明该复合中草药微生态制剂可以降低血清内毒素水平。

表5 CHCP对肉鸡血清中LPS水平的影响U/L

3 讨论

3.1 中草药复合微生态制剂对肉鸡肠道菌群的影响 Park等（2014）研究表明，日粮中添加枯草芽孢杆菌可以显著降低肠道沙门氏菌的数量。Li等（2014）研究表明，微生态制剂可以显著提高肉鸡肠道乳酸杆菌的数量。Zhang等（2014）研究发现，饲喂复合微生态制剂后，肉鸡盲肠乳酸杆菌的数量显著升高，致病性大肠杆菌的数量显著降低。董秀梅等（2004）的研究显示，与对照组相比，复合微生态制剂组显著增加了肠道内乳酸杆菌、肠球菌的数量，同时显著降低了肠道内大肠杆菌的数量。张日俊等（2005）试验表明，益生菌能不同程度地降低仔鸡直肠、十二指肠和回肠等不同肠段的pH，进而调整肠道菌群达到正常状态。门文卉等（2016）研究表明，中草药复合微生态制剂可显著降低肠道pH值，并且使肠道益生菌的比例增加20.2%。中草药复合微生态制剂中的益生菌通过生物夺氧，降低肠道内的氧化还原电势，创造有利于厌氧菌生长的环境，扶植肠道内的优势菌群，抑制大肠杆菌的数量，使失调的肠道菌群结构调整恢复到正常状态，改善肠道健康。本试验中，当肉鸡遭遇病原菌感染时，该CHCP按1‰、2‰饮水添加均可以促进肉鸡盲肠、直肠乳酸杆菌繁殖，降低肉鸡盲肠、直肠大肠杆菌的数量，起到调节肠道菌群，维护肠道健康的作用。

3.2 中草药复合微生态制剂对肉鸡肝脏功能的影响 雷明霞等 （2013）研究表明，植物乳杆菌F22可以降低肉鸡肝脏中黄曲霉毒素的残留，进而对肝脏起到一定保护作用。门文卉等（2016）研究表明，中草药复合微生态制剂可通过提高血液中谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的活性来显著增强机体抗氧化水平。罗建杰等（2013）研究表明，屎肠球菌可能促使肉仔鸡加强肝脏对维生素的代谢速率，调节肝脏关键蛋白的丰度，减少免疫和抗氧化能量支出，从而提高生产性能和免疫机能。本试验中，当肉鸡遭遇病原菌感染时，该CHCP按1‰饮水添加可降低肉鸡血清转氨酶活性、总胆红素及内毒素水平，对肉鸡肝脏具有一定的保护作用。

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The experimentwas conducted to investigate the effect of Chinese herbal compound probiotics（CHCP）on intestinalmicroflora and liver function of broiler chickens.A total of 120 1-day-old broiler chickens were randomly allocated to 4 treatments with 3 replicates of 10 each.The control group were fed basal diet，the chickens inⅠ，Ⅱgroups were fed basal diet and 1‰，2‰CHCPby water respectively.The results showed that，at 28，42 days，the quantity of cecal Lactobacillus in 1‰CHCP group were 3.15%，3.52%higher than that of the negative control group（P＞0.05）；the number of rectal Lactobacilli were 8.6%，6.78%higher than that of the negative control group significantly（P＜0.05）.The number of E.coli in cecum，rectum contens in 1‰ CHCP group were lower than that of the negative control group at 14，28，42 days（P＞0.05）.The Alanine aminotransferase levels in 1‰CHCP group were 41.05%（P＜0.05），33.26%（P＜0.05）lower than that of the negative control group at 28、42 days respectively.The Aspartate aminotransferase levels in 1‰CHCP group were 37.11%（P＜0.05）lower than that of the negative control group at 42 days.Total bilirubin content in 1‰CHCP group were 19.7%，27%，20.1%（P＞0.05）lower than that of the negative control group respectively.The serum endotoxin levels in 1‰ CHCP group were 45.1%（P＜0.01）lower than that of the negative control group.The results suggested that 1‰ CHCP were fed by water could promote the Lactic acid bacteria in broilers cecum，rectum contens，reduce the number of E.coli in broilers cecum，rectum contens，modulate the intestinal flora，maintain intestinal health，and 1‰CHCP fed by water could reduce serum transaminase activity，total bilirubin and endotoxin levels，thus had a protective effecton broiler liver.

chinese herbal compound probiotics；intestinalmicroflora；liver function；broilers

S816.7

A

1004-3314（2016）21-0026-04

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20162107

863课题“新型抗感染功能型微生态制剂研制与应用”（2013AA102806）