2013年-2015年宜春市麻疹实验室监测结果分析

谢海珍，陈玉红，黄秋艳

(宜春市疾病预防控制中心，江西宜春336000)

2013年-2015年宜春市麻疹实验室监测结果分析

谢海珍，陈玉红，黄秋艳

(宜春市疾病预防控制中心，江西宜春336000)

目的分析宜春市2013年-2015年麻疹监测结果，探寻麻疹流行特点和变化规律，为控制和消除麻疹提供有力依据。方法收集宜春市各医疗机构于2013年-2015间所有麻疹疑似病例血清学和病原学样本(咽拭子)，血清样本采用ELISA检测麻疹病毒IgM抗体，咽拭子样本采用荧光PCR进行麻疹病毒核酸检测，并对检测结果进行分析。结果麻疹疑似病例血清标本699例，血清阳性标本17例，咽拭子标本651例，病毒核酸阳性标本11例。时间分布主要集中在4-9月；年龄主要分布在小年龄＜8月龄、3龄组及40岁以上年龄组。结论有必要对疑似的所有发热、出疹病例开展麻疹核酸PCR及血清IgM同步检测。全面提高目标人群免疫水平，达到控制、消除的目的。

麻疹；IgM；核酸检测；病原学检测

1 材料与方法

1.1 标本采集由宜春市辖区内各市、区、县疾控中心根据《全国麻疹监测方案》要求对所有麻疹疑似病例采集血清学样本699例和病原学样本（咽拭子）651例，同时采集到静脉血、咽拭的疑似病例共62例；静脉血常规分离血清，咽拭子标本保存在3ml麻疹病毒标本运输液(含5%牛血清、终浓度2000U/ml青霉素、200μg/ml链霉素和25U/ml制霉菌素的细胞培养液)中，冷藏运送。

1.2 标本检测

1.2.1 检测程序血清标本采用ELISA检测麻疹病毒IgM抗体，咽拭子标本采用荧光PCR进行麻疹病毒核酸检测。2013年1-4月份麻疹疑似病例病原学咽拭子标本直接送省疾控中心进行麻疹核酸检测，5月份以后的标本由市疾控中心进行麻疹核酸检测，所有麻疹核酸检测阳性的标本再送省疾控中心进行病毒分离。

1.2.2 麻疹病毒IgM抗体检测采用《麻疹病毒IgM抗体诊断试剂盒(酶联免疫捕捉法)》(珠海海泰生物制药有限公司)检测麻疹IgM抗体，严格按照试剂盒说明书进行操作，在有效期内使用。结果计算S/N值(S/N值=样品A值/阴性对照A值平均值，阴性对照A值平均值＜0.07，按0.07计算，阴性对照A值平均值≥0.07，则按实际值计算)。S/N值≥2.1，判为阳性，S/N值＜2.1，判为阴性。酶标仪是安图2010型。

1.2.3 麻疹病毒核酸检测

1.2.3.1 病毒RNA提取按照美国Promega公司生产的Maxwell16 Viral Total Nucleic Acid Purification Kitey及配套仪器Maxwell16 Instrument操作说明提取病毒RNA。

1.2.3.2 Realtime RT-PCR检测提取的病毒RNA按照广州达安基因试剂公司提供的试剂盒说明配置反应体系，经50℃反转录15min，95℃变性15min，再按94℃×15s→55℃×45s，循环40次，反应体系为25μl。荧光通道检测选用FAM通道。

1.2.3.3 结果判断扩增曲线无对数增长期或Ct值＞38判为阴性，曲线有明显的对数增长期且Ct值≤38判为阳性。

2 结果

2.1 麻疹病毒病原学检测结果及流行病学特征

2.1.1 麻疹病毒血清IgM抗体及核酸检测结果2013年-2015年全市共检测麻疹疑似病例血清标本699例，血清阳性标本17例，咽拭子标本651例，病毒核酸阳性标本11例。其中血清IgM抗体及核酸同时为阳性标本10例。2013年没有阳性病例，2014年麻疹血清IgM抗体和核酸检测阳性者为同一人，实验室诊断病例1例，2015年实麻疹血清IgM抗体阳性16例，其中核酸检阳性者9例，另有一例血清IgM抗体阴性而核酸阳性，故实验室诊断病例17例，2013年-2015年宜春市实验室诊断病例共计18例。见表1。

表1 麻疹疑似病例标本检测阳性率

2.1.2 流行病学特征18例实验室诊断病例地区分布仅在袁州区、高安市、万载县、铜鼓县4个市、区县，分别为袁州区6例、高安市7例、万载县1例、铜鼓县1例。时间分布主要集中在4-9月份（见图1）；年龄主要分布在小年龄＜8月龄及〈18岁以上年龄组（见表2），最小发病年龄为4月龄，最大为43岁。麻疹疫苗免疫史：无MCV免疫史6例，免疫史不详9例，免疫史不详的比例与年龄没有很明显相关性。

图1 2013-2015年宜春市麻疹实验室诊断病例月分布图

表2 2013年～2015年宜春市麻疹病例发病年龄构成比

3 讨论

宜春市近年来麻疹发病接近消除的水平，但2015年麻疹疫情出现抬头趋势，消除麻疹的目标也面临很大挑战。为加大对麻疹疫情监控力度，尽早对麻疹疑似病例进行实验室确诊，及时阻断麻疹病毒传播，2013年4月，宜春市在血清学诊断基础上，引进了麻疹病毒realtime RT-PCR检测技术，建立了麻疹和风疹病毒病原学核酸快速诊断实验室网络，进一步缩短麻疹病例实验室诊断时间，弥补ELISA法检测血清特异性IgM抗体在发病早期存在一定程度的漏检[3]。ELISA法是基层麻疹监测网络实验室通用的检测手段，但一些处于感染早期(出疹3d内)或免疫功能低下的患者体内麻疹IgM抗体滴度比较低，容易造成漏检[4，5]。且风疹与麻疹在临床上难以鉴别，为确保控制和消除麻疹工作的及时有效性，有必要对疑似的所有发热、出疹病例开展麻疹和风疹的PCR(real－time PCR)及特异性免疫球蛋白M(IgM)同步检测。本调查中有1例核酸检测阳性而血清IgM为阴性，所以对早期血清IgM阴性的疑似病例也可用此法复检，可增加疑似病例的麻疹诊断率。但也要结合麻疹疫苗接种史、核实接种疫苗等情况综合判断，避免假阳性[6]。

调查表明，18例病例主要分布在袁州区及高安市两个人口密度较大的区、市；而且麻疹发病有明显的季节特征，主要集中在4-9月，发病高峰在春、夏季，因此，在麻疹高发季节来临前，应加强对托幼机构、学校等场所的疫情监测，有针对性地开展强化免疫的相关措施，避免麻疹暴发流行；袁州区6例病例全部是9个月及以下婴儿，且均未接种过麻疹疫苗，发病率较高的主要原因是该时期的婴幼儿尚未到麻疹疫苗的基础免疫时间，其自身遗传母亲相应抗体的水平较低，建议加强袁州区常规免疫规划管理，提高人群免疫成功率，扩大易感人群疫苗接种范围，定期开展挨家挨户“扫荡式”的查漏补种工作，对高危人群适时开展强化免疫，消除免疫空白，而高安市7例均为18岁以下病例，大部分人麻疹病例免疫史不详，致使免疫空白、免疫失效和免疫裂隙，成为发病的主要原因。也有可能是随着其接种麻疹疫苗的时间比较久远、体内麻疹抗体水平已明显下降、极易感染麻疹病毒而致病[7，8]。由此可见，成人已成为麻疹发病的高危人群，应适时开展大龄儿童的强化免疫工作[9]。

麻疹阳性病例中，有6例血清IgM抗体阳性而核酸检测为阴性，提示我市麻疹病例咽拭子标本采集还是存在很大问题，而且近年我国其他省份都开始出现新的基因型别，因此，需要进一步提高阳性病例咽拭子标本采集率和病毒分离率，尽可能获得更多的毒株，及时发现新的基因型别，为麻疹防控策略提供科学依据[10]。

建议各级疾控中心高度重视加强特殊人群如边远贫困地区儿童的免疫接种，有针对性的强化免疫，如加强成年人的麻疹疫苗接种，尽可能消除免疫空白地区，全面提高目标人群免疫水平，达到控制、消除、消灭麻疹的目的。同时定期开展人群免疫成功率调查和健康人群免疫水平监测，对本市有效控制麻疹的发生有着重要意义。

【致谢】感谢江西省疾病预防控制中心疾病控制检验所对本研究的大力支持。

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R511.1，R446.62

A

1674-1129(2016)06-0791-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.06.034麻疹是一种传染性很强的呼吸道传染病，严重危害儿童健康，2013年，我国国务院《卫生事业发展“十二五”规划》提出了要努力实现消除麻疹的目标[1]。2013年4月起江西省麻疹/风疹疑似病例病原学的核酸快速诊断网络正式建立并开始运转[2]。宜春市自建立麻疹核酸实时荧光定量PCR (real－time PCR)实验室以来，为控制和消除麻疹工作起到了推进作用。为了进一步提高麻疹监测水平，科学地分析现阶段麻疹流行因素，探索麻疹发病原因，本研究对2013年-2015年宜春市麻疹实验室监测的1350份疑似麻疹病例的样本结果进行分析。

2016-07-26；

2016-11-30)