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新鲜仙人掌和芦荟的抑菌实验研究*

2016-12-23张颖颖唐心恬

光明中医 2016年24期
关键词:水煎液芦荟仙人掌

张 文 玄 静 张颖颖 唐心恬



【实验研究】

新鲜仙人掌和芦荟的抑菌实验研究*

张 文1玄 静1张颖颖2唐心恬3

目的 测定新鲜仙人掌和芦荟对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等5种常见细菌的抑菌作用,以及二者在抑菌方面的差异。方法 采用MH(B)营养肉汤递倍稀释法,分别研究二者在醇提与水煎两种方法下对五种常见细菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果 经醇提得到的两种药液,其抑菌效果明显高于水煎液,而仙人掌醇提液对几种常见细菌均有抑制作用,并且对金葡萄球菌的抑菌效果明显高于其它药液,芦荟醇提液对铜绿假单胞菌抑菌效果较明显。结论 此实验结果可为临床治疗某些致病菌引起的感染时,选择仙人掌还是芦荟药物提供参考依据。

仙人掌;芦荟;醇提液;水煎液;最小抑菌浓度

芦荟属百合科芦荟属的多年生草本植物,其中含有多种生物活性成分,具有健肤美容、健胃消炎等作用,临床研究表明,其有抑菌、抗病毒、抗氧化等作用[1],多用于保健和治疗疾病[2];仙人掌属仙人掌科仙人掌属植物,味淡性寒,《陆川本草》中记载其有消炎解毒、排脓解肌的作用,并可食用和药用[2~4]。两种药物在功用上具有很大的相似性,在某种病的治疗上可相互替代。本实验主要研究比较二者经不同方法提取所得的药液在相同致病菌条件下各自的抑菌效果,从而为临床上某些疾病或感染治疗时选择仙人掌或芦荟药液提供参考依据,以及为抗金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等5种细菌的新药开发及临床应用等提供一定参考依据。

1 材料与仪器

1.1 药物 新鲜仙人掌、新鲜库拉索芦荟。供试菌株:金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003、铜绿假单胞菌CMCC(B)10104,变形杆菌CMCC(B)49027、肺炎克雷伯菌CMCC(B)46117、伤寒沙门菌CMCC(B)14028,由山东中医药大学微生物教研室提供。MH(B)营养肉汤购自北京奥博星生物公司。

1.2 仪器 旋转蒸发器,低温循环(真空)泵,SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵,电子精密天平,由山东中医药大学实验室提供。

1.3 实验方法

1.3.1 提取物制备 醇提液:将芦荟30 g、仙人掌30 g分别用80%乙醇浸泡24 h,经回流、抽滤和旋蒸后最终得到29 ml仙人掌提取液(0.3869 g/ml)、30 ml芦荟提取液(1.2103 g/ml),并经0.22微米无菌过滤器过滤后备用。水煎液:将芦荟30 g、仙人掌30 g分别进行煎煮,冷却后得到提取液,余下残渣第二次加水煎煮,2次液体合并、抽滤后得到34 ml仙人掌水煎液(0.1488 g/ml)、38 ml芦荟水煎液(0.2534 g/ml),并经0.22微米无菌过滤器过滤后备用。

1.3.2 MIC测定 ①细菌培养基的制备:MH(B)营养肉汤分装后于121℃高压灭菌20 min。②实验菌液的制备:以比浊管调整菌液浓度为1×106CFU/ml。③微量稀释法抑菌实验:参照NCCLS标准采用微量稀释法进行。在96孔板中每孔加入培养基100μl,然后在第1行中加入100μl药液,从第1行中吸取100μl混合液加入第2行,依次类推至第6行,得到2、4、8、16、32、64倍稀释的药物。第7行每孔加入双抗10μl作为阳性对照,第8行直接加入菌液作为阴性对照。同时设立药物稀释梯度和培养基空白作为对照。每种药物重复2次。分别加入各菌液10μl,37℃培养24 h后取出观察现象。

2 结果

醇提液的抑菌效果明显高于水煎液。仙人掌醇提液对几种常见细菌均有抑制效果,其对金葡萄球菌有明显的抑制作用,其最小抑菌浓度(MIC)为0.0121 g/ml;芦荟醇提液对铜绿假单胞菌的抑制效果强于仙人掌醇提液,其最小抑菌浓度(MIC)为0.1513 g/ml,但其对肺炎克雷伯菌则无明显效果。MIC测定阴性对照中细菌生长良好,阳性对照孔无明显生长,培养基空白无污染。仙人掌醇提液、仙人掌水煎液以及芦荟醇提液、芦荟水煎液最小抑菌浓度(MIC)测定结果见表1。

表1 四种药液对5种常见细菌的MIC

注:“—”表示无有效数据

3 讨论

当前,医疗滥用抗生素现象在中国非常普遍,然而抗生素的滥用更加剧了细菌的耐药性,其会导致更多种多重耐药菌的出现[5]。通过研究中草药,从中药中提取有效抗菌成分,利用中药来研究抗生素类物质可缓解新型抗生素研发的压力,甚至为开发新型治疗药物提供可能。本实验的抑菌研究结果表明,仙人掌的醇提液对几种常见细菌如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌等均有抑制作用,且对金葡球菌有明显抑制效果,所以在临床上对由金葡球菌引起的化脓性感染、毛囊感染等采用含仙人掌成分的药物治疗,可取得较好的疗效。芦荟的醇提液对铜绿假单胞菌的抑制效果明显强仙人掌,故在临床上,对由绿脓假单胞菌引起的手术伤口感染、烧伤创面感染等采用含芦荟成分的药物治疗,同样可取得较好疗效。本研究成果将为把仙人掌与芦荟用于抗金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等5种细菌的新药开发以及临床应用等提供一定的参考依据。

[1] 孙振红,魏凯,谭燕玲,等.芦荟粗提物抑菌及抗病毒作用的研究[J].中国预防兽医学报,2011,33(9):694-698.

[2] 李婷,宫春波,侯晓东,等.芦荟汁抑菌作用研究[J].华南热带农业大学学报,2006,12(3):36-39.

[3] 赵声兰,陈朝银,段家贵.仙人掌提取物的抑菌作用研究[J].食品工业科技,2003,24(5):40-43.

[4] 叶波.仙人掌醇提物的抑菌实验[J].江西中医学院学报,2008,20(3):80-82.

[5] 梁士兵,王育纯,孙娜,等.中草药芦荟、苦参对五种常见细菌的体外抑菌研究[J].光明中医,2016,31(4):498-499.

Study and comparison on the flesh Chinese Herbal Medicine Aloe and Cactus extracorporeal inhibition

ZHANG Wen1XUAN Jing1ZHANG Yingying2TANG Xintian2

(Shandong University of Traditional Chinese Medicine,Ji Nan,Shan Dong,250355,China)

Objective Using the flesh herbs ,to mensurate and compare the extracorporeal inhibition effect Of the Aloe vera extraction and Cactus extraction in two different ways for Staphylocaccus aureus, P.aeruginosa and the other three kinds of common bacterium.Methods using MH(B) dilution methods that dilute the consistence of nutritive gravy by decreasing times to mensurate the minimal inhibitory concentration(MIC)that the aloe extraction and cactus extraction in two different ways engender the foundation of inhibition for the five common bacteria.Results Both of them had the inhibiting foundation for the given common bacterium.But the inhibition effect of two herbs extracted by ethanol is better than that extracted by water.And the inhibition of the cactus extracted by ethanol is better than the others for the given five common bacteria,especially for Staphylocaccus aureus,the inhibition of the aloe extracted by ethanol is much significant for P.aeruginosa.Conclusion The experimental results can provide a reference to choose the Aloe or Cactus for the clinical treatment of infection caused by Staphylocaccus aureus and P.aeruginosa.

Aloe;Cactus;alcohol extract;water decortion;minimal inhibitory concentration.

山东中医药大学SRT项目(No.2015501)

1.山东中医药大学中医学院本科生2014级(济南 250355);2.山东中医药大学微生物教研室(济南 250355);3.山东中医药大学中医学院导员办公室(济南 250355)

10.3969/j.issn.1003-8914.2016.24.019

1003-8914(2016)-24-3579-02

�集会

2017-10-10)

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