益气活血风静胶囊对麻醉犬脑血流量和脑血管阻力的影响Δ

2016-12-22张军霞林红军张婷婷李振国周继春河南省食品药品检验所郑州450000

中国药房 2016年34期

张军霞，林红军，张婷婷，陈炜，李振国，周继春（河南省食品药品检验所，郑州 450000）

张军霞＊，林红军，张婷婷，陈炜，李振国，周继春（河南省食品药品检验所，郑州 450000）

目的：研究益气活血风静胶囊对麻醉犬脑血流量（CBF）及脑血管阻力（CVR）的影响，为其临床应用提供药理学依据。方法：将18只Beagle犬随机分为假手术组（纯化水）、阳性对照中药组[脑心通胶囊，0.3 g（生药）/kg]、阳性对照化学药组（尼莫地平，7×10－3g/kg）和益气活血风静胶囊高、中、低剂量组[2.52、1.26、0.63 g（生药）/kg）]，每组3只。犬麻醉后十二指肠给药，分别于给药前和给药30、60、120 min后测定血压、心率和CBF、CVR的变化。结果：给药30、60、120 min后，阳性对照中药组、阳性对照化学药组和益气活血风静胶囊高剂量组犬CBF明显增加，阳性对照化学药组和益气活血风静胶囊高剂量组犬CVR明显减小，阳性对照化学药组犬血压和心率降低，与假手术组比较差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。结论：益气活血风静胶囊可减小麻醉犬CVR、增加CBF，对血压及心率无影响。

益气活血风静胶囊；脑血流量；脑血管阻力；Beagle犬

益气活血风静胶囊是根据益气活血法中医理论，分别提取人参和牡丹皮中具有抗脑缺血活性的人参总皂苷、丹皮酚和牡丹皮总苷，混合制备而成的自主研发的中药五类新药[1]。人参中富含多种不同极性的皂苷类成分，是人参抗脑缺血损伤的主要有效成分，能减少短暂性脑缺血神经元死亡、促进脊髓神经元存活和生长，起到保护再灌注损伤的作用[2-4]；丹皮酚具有抗炎、抗心肌细胞及脑细胞缺血缺氧损伤及缺血再灌注损伤等作用[5-6]；芍药苷具有抗血栓、抗心肌或脑组织损伤、保护神经元等作用[7-8]。前期研究表明，益气活血风静胶囊具有抗脑水肿、缩小脑梗死面积、抗血栓和改善血流变等抗脑缺血活性，且其作用强度优于人参总皂苷、丹皮酚和牡丹皮总苷单独使用。本研究通过考察益气活血风静胶囊对麻醉Beagle犬脑血流量（Cerebral blood flow，CBF）及脑血管阻力（Cerebral vascular resistance，CVR）的影响，探究其对缺血性脑血管病方面的作用，为其临床应用提供药理学依据。

1 材料

1.1 仪器

CP225D电子天平（德国Sartorius公司）；PowerLab/8SP多导生理仪（澳大利亚埃德公司）。

1.2 药品与试剂

益气活血风静胶囊（河南中医学院一附院制剂室自制，批号：101022，规格：每克内容物相当于4.2 g生药）；脑心通胶囊（陕西步长制药有限公司，批号：1112121，规格：0.4 g/粒）；尼莫地平片（山东新华制药股份有限公司，批号：1111142，规格：20 mg/片）；戊巴比妥钠（上海化学试剂采购供应站试剂厂，Serva进口分装，批号：80-06-03）；苯巴比妥钠（凡科维化学公司，批号：20120210）；肝素钠注射液（天津药业焦作有限公司，批号：12020741，规格：2 ml∶12 500 u）；0.9%氯化钠注射液（河南科伦药业有限公司）；水为自制纯化水。

1.3 动物

健康成年Beagle犬18只，♂，普通级，体质量8.4～9.5 kg，购自上海新冈实验动物场[生产许可证号：SCXK（沪）2007-0009，动物质量合格证号：2007000900030]。

2 方法

2.1 分组、造模与给药

将18只犬随机分为6组，每组3只，分别为假手术组（给予纯化水）、阳性对照中药组[脑心通胶囊，0.3 g（生药）/kg，为临床等效剂量的2.2倍]、阳性对照化学药组（尼莫地平片，7 mg/kg，为临床等效剂量的2.0倍）和益气活血风静胶囊高、中、低剂量组[2.52、1.26、0.63 g（生药）/kg，为临床拟用等效剂量的4.9、2.4、1.2倍]。

犬禁食不禁水14 h后，ip 3%戊巴比妥钠溶液15 mg/kg（0.5 ml/kg）和10%苯巴比妥巴钠溶液100 mg/kg（1 ml/kg）联合麻醉，仰位固定。将犬颈部、剑突下3 cm沿腹中线、右侧腹股沟处剪毛，沿颈部正中线切口，分离出左侧颈总动脉，并结扎其同侧椎动脉和颈外动脉。将血流探头挂在颈总动脉上，测定的颈总动脉流量便代表了CBF。自腹中线切口，打开腹腔，找到胃幽门下端的十二指肠，选一肠系膜无血管区以止血钳穿过固定一段十二指肠，以针进行一荷包缝线，在荷包缝线中心部以眼科剪刀剪一小口，将清洗干净的导尿管插入十二指肠，收紧荷包缝线，将导尿管固定，引出导尿管。周围组织彻底止血，逐层缝合腹壁，以动脉夹夹住导尿管游离端。分离股动脉，连接血压探头观察股动脉平均压。四肢皮下插入针状电极记录标准Ⅱ导心电图[9-11]。动物手术完毕后稳定30 min，待颈总动脉流量、血压、心率稳定后，记录给药前血压和心率指标作为给药前对照。各组犬进行十二指肠给药，给药容积均为5.0 ml/kg。

2.2 指标检测

实时记录各组犬给药后30、60、120 min的血压、心率。然后将犬处死，开颅取出全脑称质量，将全脑质量除以2，得一侧脑质量，按公式分别计算给药30、60、120 min后CBF和CVR：CBF[ml（/100 g·min）]＝颈总动脉血流（ml/min）×100 g/一侧脑质量（g）；CVR[mm Hg·100 g·min/ml]＝血压（mm Hg）/CBF [ml（/100 g·min）]（1 mm Hg＝0.133 3 kPa）。

2.3 统计学方法

3 结果

3.1 益气活血风静胶囊对麻醉犬血压和心率的影响

与给药前比较，仅阳性对照化学药组犬血压和心率显著降低（P＜0.05）；给药后，仅阳性对照化学药组犬血压和心率较假手术组明显降低（P＜0.05），结果见表1、表2。

3.2 益气活血风静胶囊对麻醉犬CBF的影响

与给药前比较，假手术组、阳性对照中药组和益气活血风静胶囊中、低剂量组犬在给药后30～120 min内CBF略有波动，但差异无统计学意义（P＞0.05）；阳性对照化学药组和益气活血风静胶囊高剂量组犬给药30、60、120 min后CBF均显著增加（P＜0.05或P＜0.01）。与假手术组比较，阳性对照中药组、阳性对照化学药组和益气活血风静胶囊高剂量组犬在给药后30～120 min内CBF明显增加（P＜0.05或P＜0.01）。CBF测定结果见表3。

表1 各组麻醉犬血压的测定结果（±s，n＝3，mm Hg）Tab 1 Results of blood pressure determination of anesthetized dogs in each grou（p±s，n＝3，mm Hg）

注：与给药前比较，＊P＜0.05；与假手术组比较，#P＜0.05Note：vs.before medication，＊P＜0.05；vs.sham operation group，#P＜0.05

组别假手术组阳性对照中药组阳性对照化学药组益气活血风静胶囊高剂量组益气活血风静胶囊中剂量组益气活血风静胶囊低剂量组剂量0.3 g（生药）/kg 7×10－3g/kg 2.52 g（生药）/kg 1.26 g（生药）/kg 0.63 g（生药）/kg给药前122.60±1.00 126.56±21.83 104.81±16.10 106.50±21.78 137.47±30.35 130.22±8.27给药后30 min 124.90±2.33 112.42±26.96 77.59±25.37＊#110.16±20.38 134.96±28.60 126.27±6.03 60 min 118.93±4.54 118.98±25.61 82.89±34.94＊#112.82±23.44 132.53±22.18 126.36±9.90 120 min 120.19±4.24 116.64±19.16 72.35±16.77＊#114.83±15.66 133.48±15.76 120.71±8.32

表2 各组麻醉犬心率的测定结果（±s，n＝3，次/min）Tab 2 Results of heart rate determination of anesthetized dogs in each grou（p±s，n＝3，times/min）

注：与给药前比较，＊P＜0.05；与假手术组比较，#P＜0.05Note：vs.before medication，＊P＜0.05；vs.sham operation group，#P＜0.05

组别假手术组阳性对照中药组阳性对照化学药组益气活血风静胶囊高剂量组益气活血风静胶囊中剂量组益气活血风静胶囊低剂量组剂量0.3 g（生药）/kg 7×10－3g/kg 2.52 g（生药）/kg 1.26 g（生药）/kg 0.63 g（生药）/kg给药前160±9 166±31 158±14 143±10 160±25 174±16给药后30 min 159±29 169±24 140±21＊#140±7 156±24 178±10 60 min 159±29 170±24 140±21＊#144±12 156±24 177±8 120 min 154±30 178±12 144±18＊#144±12 156±24 178±9

表3 各组麻醉犬CBF的测定结果[±s，n＝3，m（l/100 g·min）]Tab 3 Results of CBF determination of anesthetized dogs in each group[±s，n＝3，m（l/100 g·min）]

注：与给药前比较，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；与假手术组比较，#P＜0.05，##P＜0.01Note：vs.before medication，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；vs.sham operation group，#P＜0.05，##P＜0.01

组别假手术组阳性对照中药组阳性对照化学药组益气活血风静胶囊高剂量组益气活血风静胶囊中剂量组益气活血风静胶囊低剂量组剂量0.3 g（生药）/kg 7×10－3g/kg 2.52 g（生药）/kg 1.26 g（生药）/kg 0.63 g（生药）/kg给药前166.00±22.32 157.67±30.29 167.88±41.83 154.13±40.18 159.17±22.36 161.71±38.30给药后30 min 168.25±18.00 182.93±40.14#324.16±46.47＊＊##199.39±23.79＊##165.42±25.58 173.08±30.85 60 min 172.55±12.05 178.58±37.33#331.58±51.00＊＊##194.52±25.43＊＊##163.93±28.69 170.93±33.34 120 min 162.92±6.17 166.52±25.42#328.61±56.97＊＊##192.70±11.64＊＊##158.74±24.96 166.99±11.74

3.3 益气活血风静胶囊对麻醉犬CVR的影响

与给药前比较，假手术组、阳性对照中药组和脑心通胶囊中、低剂量组犬在给药后30～120 min内CVR略有波动，但差异均无统计学意义（P＞0.05）。与假手术组比较，阳性对照化学药组和益气活血风静胶囊高剂量组犬在给药后30～120 min内CVR明显减小（P＜0.01）。CVR测定结果见表4。

表4 各组麻醉犬CVR的测定结果（±s，n＝3，mm Hg·100 g·min/ml）Tab 4 Results of CVR determination of anesthetized dogs in each grou（p±s，n＝3，mm Hg·100 g·min/ml）

注：与给药前比较，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；与假手术组比较，##P＜0.01Note：vs.before medication，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；vs.sham operation group，##P＜0.01

组别假手术组阳性对照中药组阳性对照化学药组益气活血风静胶囊高剂量组益气活血风静胶囊中剂量组益气活血风静胶囊低剂量组剂量0.3 g（生药）/kg 7×10－3g/kg 2.52 g（生药）/kg 1.26 g（生药）/kg 0.63 g（生药）/kg给药前0.67±0.07 0.89±0.29 0.68±0.39 0.97±0.20 0.93±0.24 0.78±0.19给药后30 min 0.70±0.05 0.83±0.37 0.26±0.12＊##0.49±0.04＊##0.86±0.21 0.81±0.17 60 min 0.69±0.02 0.91±0.39 0.27±0.14＊##0.38±0.07＊＊##0.85±0.16 0.75±0.12 120 min 0.74±0.05 1.04±0.48 0.26±0.17＊##0.42±0.08＊##0.87±0.16 0.72±0.03

4 讨论

脑缺血性疾病对人类健康和生命造成很大威胁，但到目前为止，对该病的防治仍未取得重大突破，寻找防治该病的药物受到国内外学者的极大重视。脑缺血后病理生理的改变有诸多因素参与，如能量代谢耗竭、兴奋性氨基酸毒性、细胞内钙（Ca）超载、毒性氧自由基产生、酸中毒、花生四烯酸产生等[12-13]。尼莫地平是一种Ca2+通道阻滞药，能通过有效地阻止Ca2+进入细胞内，抑制平滑肌收缩，以解除血管痉挛。其对脑动脉的作用最强，能够扩张脑血管，增加CBF，显著减少血管痉挛引起的缺血性脑损伤，故在本研究中以其为阳性对照化学药。脑心通胶囊主要通过改善“血瘀”，降低血浆黏度、还原黏度、血小板黏附率而抑制血栓形成、延长凝血时间，以增加CBF并减小CVR，同时对心脏功能也有明显改善，且无明确的不良反应，故在本研究中以其为阳性对照中药。本研究选用脑心康胶囊和尼莫地平片两个阳性对照药物，旨在进行益气活血风静胶囊与相同药理作用、相同剂型和相同给药途径的已上市的药品进行比较，明确受试制剂的药效及剂量。

本研究结果表明，益气活血风静胶囊在增加CBF和减小CVR方面优于脑心通胶囊，其在2.52 g（生药）/kg的剂量下能显著增加犬CBF和减小犬CVR，起效时间为给药后30 min，并对血压和心率均无显著影响。结合前期研究结果可知，益气活血风静胶囊能通过清除自由基以及抑制病理状态下一氧化氮过度生成来改善大鼠脑组织内神经元变性、坏死，减轻脑组织因缺血而造成的损伤，这提示该制剂可以用于缺血性脑血管疾病的治疗。但为了获得最佳临床药效，益气活血静风胶囊中人参皂苷及牡丹皮最佳配伍比例尚需进行进一步药理学实验筛选，各有效成分产生药效的作用机制仍有待进一步深入研究。

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Effects of Yiqi Huoxue Fengjing Capsules on Cerebral Blood Flow and Cerebral Vascular Resistance in Anesthetized Dogs

ZHANG Junxia，LIN Hongjun，ZHANG Tingting，CHEN Wei，LI Zhenguo，ZHOU Jichun（Henan Provincial Institute of Food and Drug Control，Zhengzhou 450000，China）

OBJECTIVE：To observe the effects of Yiqi huoxue fengjing capsules on the cerebral blood flow（CBF）and cerebral vascular resistance（CVR）in anesthetized dogs.METHODS：18 Beagle dogs were randomly divided into sham operation group（purified water），positive control TCM group[Naoxintong capsules，0.3 g（crude drug）/kg]，positive control pharmaceutical chemicals group（nimodipine，7×10－3g/kg）and Yiqi huoxue fengjing capsules low-dose，medium-dose and high-dose groups [0.63，1.26，2.52 g（crude drug）/kg）]，with 3 dogs in each group.They were given relevant medicine via duodenum.CBF，CVR，blood pressure and heart rate of the dogs were measured before medication and 30，60，120 min after medication.RESULTS：30，60，120 min after medication，CBF increased in positive control TCM group，positive control pharmaceutical chemicals group and Yiqi huoxue fengjing capsule high-dose group，while CVR decreased significantly in positive control pharmaceutical chemicals group and Yiqi huoxue fengjing capsules high-dose group，blood pressure and heart rate of positive control pharmaceutical chemicals group decreased，with statistical significance compared to sham operation group（P＜0.05 or P＜0.01）.CONCLUSIONS：Yiqi huoxue fengjing capsules can increase CBF and decrease CVR，and they have no effect on blood pressure and heart rate in anesthetized dogs.

Yiqi huoxue fengjing capsules；Cerebral blood flow；Cerebral vascular resistance；Beagle dog

R285

1001-0408（2016）34-4774-03

2016-05-11

2016-08-06）

（编辑：林静）

河南省科技创新人才计划项目（No.144200510028）

＊副主任药师，硕士。研究方向：创新药药理、药效、毒理评价。电话：0371-63388238。E-mail：zjx312@163.com

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.34.07