人工海水培育罗氏沼虾幼体试验

黄光华，马华威,2，杨彦豪，黄立斌，冯鹏霏，吕 敏，卢小花，童桂香

( 1. 广西水产科学研究院，广西 南宁 530021； 2. 防城港市水产品质量安全检测中心，广西 防城港 538000 )

人工海水培育罗氏沼虾幼体试验

黄光华1，马华威1,2，杨彦豪1，黄立斌1，冯鹏霏1，吕 敏1，卢小花1，童桂香1

( 1. 广西水产科学研究院，广西 南宁 530021； 2. 防城港市水产品质量安全检测中心，广西 防城港 538000 )

按海盐∶MgSO4∶CaCl2∶KCl∶H3B3O3∶KBr∶EDTA∶生石灰为2000∶600∶72∶36∶24∶4∶1∶2的比例配制成人工海水，研究在该人工海水中培育罗氏沼虾幼体的可行性。结果表明，人工海水中的Mg2+、K+、Ca2+的比值为3∶1∶1，与天然海水接近，且水质无毒性作用；人工海水培育80万尾罗氏沼虾虾苗，获得68万尾幼体，成活率约为85%，蜕皮率为16.82%，特定生长率为25.34%/d，高于天然海水的培育水平。结果表明，自制人工海水可用于罗氏沼虾幼体培育。

人工海水；罗氏沼虾幼体；溶解氧；特定生长率

罗氏沼虾 (Macrobrachiumrosenbergii)是我国三大水产经济虾类之一[1-3]。罗氏沼虾幼体生长对水质特性需要极其严格，要求水中离子组成及含量比例与海水特性相近[4-5]。随着人们对罗氏沼虾的需求不断增加，内陆苗种场常通过购买海水或取用海水来养殖，这就增加了养殖成本[6-7]。近几十年来，沿海地区海水水质恶化，增加了天然海水培育虾苗的困难[8-9]。国内外也进行了一些人工海水培育虾类的探索[5,10-12]，这为人工海水培育罗氏沼虾幼体奠定了基础。本研究测定了人工海水培育的罗氏沼虾幼体的相对质量增加率、蜕皮率、成活率、特定生长率，检测了养殖过程中的水质状况，探索自制人工海水培育罗氏沼虾幼体的可行性，为人工海水培育罗氏沼虾幼体提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

试验用罗氏沼虾幼体，即溞状幼体，共80万尾，由国家级广西南宁罗氏沼虾良种场提供，其亲本为越南引进的罗氏沼虾原种后代。卤虫(Artemia)由国家级广西南宁罗氏沼虾良种场提供。

强氯精、EDTA、海盐等购于上海生物工程有限公司，其他为分析纯。

1.2 方法

1.2.1 人工海水配制

清洁淡水源于本试验场蓄水池塘，该池塘中轮叶黑草面积约60%，水质清澈透明，抽水经二级沙滤，注入蓄水池后隔日用质量浓度为5 g/m3的强氯精消毒，然后用质量浓度30 mg/L沸石粉整池泼洒，气泵冲气，次日停气待水澄清，获得清洁淡水。然后，将清洁淡水进入化盐池，将各种配制人工海水的试剂按海盐∶MgSO4∶CaCl2∶KCl∶H3B3O3∶KBr∶EDTA∶生石灰=2000∶600∶72∶36∶24∶4∶1∶2，逐一溶解，搅拌均匀，充气24 h后停气、沉淀，即为人工海水。

1.2.2 幼体培育

孵化池培育前均用10 g/m3的强氯精消毒。幼体孵化水用配制好的人工海水和处理过的淡水混合成，比重为1.002，孵化时先将水温升至30～31 ℃，然后将经15 g/m3高锰酸钾溶液浸泡15 min的抱卵亲虾放入孵化池中孵化，获得受精卵。育苗池注入配制的人工海水，受精卵按80万尾/池的密度投放。培育池上方用遮阳网覆盖。

幼体共12期，第1期开始培育，第12期结束出苗。放养后第2 d开始投喂卤虫无节幼体，每日8:00—9:00，11:00—12:00，16:00—17:00各投喂1次饵料。第9 d起辅助投喂蛋羹，分别于每日6:00—7:00、13:00—14:00各投喂1次。每次喂蛋羹1 h后，停气，吸出蛋羹。试验期间，定期用水质分析仪测定氨氮、亚硝酸盐和溶解氧量。第5、11、17、22 d参考文献 [13]的方法，测定海水的钙含量，收集蜕皮，烘干保存，每日记录蜕皮次数。经22 d培育后淡化出苗，测定虾的体长、湿体质量(初始质量和终末质量)，以杯量法估算虾苗成活率(虾龄22日龄，即第12期)。设置天然海水为对照。

1.4 数据处理与分析

试验数据用单因子方差分析及Duncans多重比较差异显著性(=0.05)。按下式计算各项指标：

相对质量增加率/%= (mt-m0)/m0×100%

蜕皮率/%·d-1=Nm/(Ns×t)×100%

特定生长率/%·d-1=(lnm2-lnm1)/t×100%

式中，mt、m0试验结束和初始时对虾的湿体质量(g)，m2、m1是试验结束和初始时对虾的干体质量(g)，t为试验持续的时间(d)，Nm为蜕皮次数，Ns为养虾数(尾)。

2 结果与分析

2.1 养殖罗氏沼虾幼体的人工海水配方

1000 kg养殖罗氏沼虾幼体的人工海水配方见表1。其中，海盐∶MgSO4∶CaCl2∶KCl∶H3B3O3∶ KBr∶EDTA∶生石灰的比例为：2000∶600∶72∶36∶24∶4∶1∶2，配比量分别依次为10000、3000、360、180、120、20、5、10 g。人工海水中，Na+、Mg2+、Ca2+和K+浓度分别为4625.3、335、116.43 mmol/L和111.83 mmol/L，Mg2+、K+、Ca2+的比值为3∶1∶1。

表1 1000 kg养殖罗氏沼虾幼体的人工海水配方 g

2.2 人工海水养殖罗氏沼虾幼体过程中的水质

人工海水养殖罗氏沼虾幼体过程中水质的检测结果见表2。由表2可知，人工海水中，氨氮、亚硝酸盐、溶解氧质量浓度均随着时间延长而增加，平均值分别为0.398、0.082、5.40 mg/L，养殖22 d后的质量浓度分别为0.69、0.115、5.585 mg/L。

2.3 罗氏沼虾幼体培育结果

80万罗氏沼虾幼体经人工海水22 d培育后，共计成活虾苗约有68万尾，成活率为85%。经人工海水培育的罗氏沼虾幼体成活率、终末质量、相对质量增加率、蜕皮率均显著高于天然海水(P<0.05)(表3)。

2.4 养殖罗氏沼虾幼体的人工海水中Ca2+的含量

养殖罗氏沼虾幼体的2种水体中Ca2+的含量增加比率均随着养殖时间的延长而增加。5 d和11 d时，2种水体中的Ca2+含量增加比率无显著差异，而在17 d和22 d，人工海水中的Ca2+含量增加比率显著高于天然海水(P<0.05)(表4)。

2.5 不同时间罗氏沼虾幼体的特定生长率

罗氏沼虾在人工海水和天然海水中的特定生长率均呈增加趋势，且在人工海水中的特定生长率比在天然海水高(图1)。

图1 不同时间罗氏沼虾幼体的特定生长率

水质指标检测时间/d357911131416182022平均值氨氮0.130.310.450.170.330.510.580.210.430.570.690.398亚硝酸盐0.0530.0670.0740.0650.0850.0940.0970.0610.0810.1120.1150.082溶解氧5.325.285.375.385.295.275.435.525.575.425.585.40

表3 罗氏沼虾幼体培育22 d后的最终结果 (N=3, 平均值±标准差)

注：标字母a的平均值表示组间差异显著(P<0.05).下同.

表4 人工海水在养殖罗氏沼虾幼体过程中Ca2+含量变化(N=3, 平均值±标准差) %

3 讨 论

配制人工海水中，Mg2+、K+、Ca2+的浓度和配比对幼体成活率影响至关重要[1,9]。天然海水的Na+、Mg2+、Ca2+、K+浓度分别是4133.1、420.26、130.74、142.32 mmol/ L，Mg2+、K+、Ca2+的配比系数均为3∶1∶1[4-5]。本试验中，人工海水的Na+、 Mg2+、Ca2+、K+浓度以及Mg2+、K+、Ca2+之间配比均接近于天然海水，符合罗氏沼虾幼体养殖所需水质特性，可用于罗氏沼虾幼体培育。

三态氮中，非离子氨和亚硝酸盐对罗氏沼虾苗种有较强的毒性，其含量随着养殖时间延长逐渐上升，而硝态氮影响甚微，不构成毒性[8,14-15]。溶解氧保持在约5.5 mg/L能使幼体和虾仔更健康、成活率更高[11]。因此，降低氨氮、亚硝酸盐含量，保持溶解氧约5.5 mg/L对育苗效果具有重要意义。本试验在投喂后1 h吸污，吸出剩余的残饵，比之前用小环藻(Cyclotellasp.)法[5]和过滤法[8]更为简单有效。本试验中，罗氏沼虾幼体对人工海水的氨氮、亚硝酸盐含量与陈佳毅等[7-8,15]报道的耐受范围略有不同，这可能是体质、试验材料及生产和试验环境等因素不同所致[3-5]。从氨氮、亚硝酸盐监测指标及溶解氧的平均值处在约5.5 mg/L综合来看，笔者自制的人工海水对罗氏沼虾的幼体基本无毒性，可用于罗氏沼虾幼体培育。

虾类的生长与Ca2+含量密切相关[16]。养殖水体的钙含量不能满足虾类生长时，会影响虾的生长发育，甚至死亡[17-19]。在本试验中，与天然海水相比，随着养殖时间延长，人工海水的钙离子含量增加比率高，罗氏沼虾幼体在人工海水中的特定生长率高于天然海水，可以初步推断出人工海水能使罗氏沼虾幼体有较好生长。笔者认为，在自制的人工海水养殖过程中，水体自身变化可能对罗氏沼虾的生长发育有影响，特别是Ca2+含量水平变化，因此，需要进一步探讨罗氏沼虾幼体的生长发育与Ca2+含量变化的关系。

罗氏沼虾仔虾有相互残杀习性，本试验后期，除了适时投足饵料外，在培育池中悬挂网片，给仔虾提供攀爬空间，降低其残杀率，有助于提高出苗率。配制人工海水的原料经过严格筛选，纯度较高，盐化后水质比较干净，虽然该配方配制方便，但盐化工作强度大，比较麻烦，需要进一步解决。

4 结 论

本研究用的人工海水对罗氏沼虾幼体培育无毒性，随着养殖时间延长，Ca2+含量增加比率较天然海水高，能有效提高罗氏沼虾幼体的蜕皮率和存活率，表明罗氏沼虾的生长发育受Ca2+浓度影响。进一步探讨罗氏沼虾幼体的生长发育与人工海水中Ca2+浓度的关系很有必要。

[1] 姜增华. 扬州地区罗氏沼虾养殖模式、相关技术及发展对策的研究[D]. 南京：南京农业大学，2015.

[2] Luo W, Zeng C, Yi S K, et al. Heterosis and combining ability evaluation for growth straits of blunt snout bream (Megalobramaamblycephala) when crossbreeding three strains[J]. Chinese Science Bulletin, 2014, 59(9):857-864.

[3] Amstrong D A, Stephenson M J, Knight A W. Acute toxicity of nitrite to larvae of the giant Malaysian prawn,Macrobrachiumrosenbergii[J]. Aquaculture, 1976(9):39-46.

[4] Yang F, Qian Y Q, Ma W M, et al. MSG is involved in sperm gelatinolytic activity in the prawn,Macrobrachiumrosenbergii[J]. Chinese Science Bulletin, 2013,58(18):2113-2118.

[5] 黄光华，江林源,卢小花,等．小环藻在罗氏沼虾人工育苗中的应用研究[J].安徽农业科学，2011,39(13):7849-7850.

[6] 赵朝阳,周鑫,王桂芹,等.马氏沼虾蚤状幼体发育特征及其与罗氏沼虾幼体的形态差异[J]. 水生生物学报,2011,35(4)：659-665.

[7] 陈佳毅，孙龙生，吴骏，等. 氨氮和亚硝氮对不同发育阶段罗氏沼虾幼体的急性毒性研究[J]. 水产养殖，2015，36(10)：1-6.

[8] 毕英佐，李桂峰，李海燕，等.罗氏沼虾育苗水体氨氮、亚硝酸盐氮的变化规律及对幼体的影响[J]. 华南农业大学学报，2002，23(3)：67-70.

[9] 江林源，黄光华，卢小花，等. 罗氏沼虾健康育苗技术[J]. 南方农业学报，2011，42(4)：446-449.

[10] Lee S W, Najiah M, Wendy W, et al. Multiple antibiotic resistance and heavy metal resistance profile of bacteria isolated from giant freshwater prawn (Macrobrachiumrosenbergii) hatchery[J]. Agricultural Sciences in China, 2009,8(6):740-745.

[11] 张煜,臧维玲,刘永士,等．淡水养殖凡纳滨对虾的瞬时耗氧速率与体长、溶氧水平关系研究[J]．湖南农业科学,2010(9):136-139.

[12] Lin F, Liu L, Qian D, et al. Development of nucleic acid sequence-based amplification assay for detection ofMacrobrachiumrosenbergiiNodavirus[J]. Agricultural Biotechnology, 2014(3):42-45.

[13] 王茂林. 海水中钙镁离子对褐牙鲆幼鱼生长和生理影响的实验研究[D]. 青岛：中国海洋大学，2009.

[14] 臧维玲，江敏，张建达，等.亚硝酸盐和氨对罗氏沼虾幼体的毒性[J]. 上海水产大学学报，1996，5(1)：15 -22.

[15] 戴习林，臧维玲，杨鸿山，等. Cu2+、Zn2+、Cd2+对罗氏沼虾幼虾的毒性作用[J]. 上海海洋大学学报，2001，10(4):298-302.

[16] 王慧，房文红，来琦芳. 水环境中Ca2+、Mg2+对中国对虾生存及生长的影响[J]. 中国水产科学，2000，7(1)：82-86.

[17] 候纯强. 水中钙浓度对凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)蜕皮和生长的影响及生理生态学机制[D]. 青岛：中国海洋大学，2011.

[18] Greenway P. Calcium balance and moultng in the crustacean [J]. Biol Rev, 1985, 60(3):425-454.

[19] Chan S M, Rankin S M, Keeley L L. Characterization of the molt stages inPenaeusvannamei: setogenesis and haemolymph levels of total protein, ecdysteroids and glucose[J]. Biol Bull, 1988, 175(2):185-192.

LarvaRearingofMalaysianPrawnMacrobrachiumrosenbergiiinArtificialSeaWater

HUANG Guanghua1, MA Huawei1,2, YANG Yanhao1, HUANG Libin1, FENG Pengfei1, LÜ Min1, LU Xiaohua1,TONG Guixiang1

( 1.Guangxi Academy of Fishery Sciences, Guangxi 530021, China；2. Fangchenggang Aquatic Products Quality and Safety Testing Center, Fangchenggang 538000, China )

Chemicals MgSO4∶CaCl2∶KCl∶H3B3O3∶KBr∶EDTA∶ lime stone were mixed at a ratio of 2000∶600∶72∶36∶24∶4∶1∶2 to make artificial sea water where Malaysian prawnMacrobrachiumrosenbergiilarvae were reared to research feasibility of Malaysian prawn larva rearing in artificial sea water. The water quality detection proved that artificial sea water prepared by a ratio of Mg2+, K+and Ca2+=3∶1∶1, closed to natural sea water, was non-toxic. In the artificial sea water, 680 thousands of postlarvae was obtained with survival rate of 85%,ecdysis rate of 16.82%, and specific growth rate of 25.34%/d, higher than those in nature sea water. The findings indicate that artificial seawater can be used for Malaysian prawn larva rearing.

artificial sea water;Macrobrachiumrosenbergiilarva; dissolved oxygen; specific growth rate

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.06.022

S968.22

A

1003-1111(2016)06-0727-04

2016-02-19；

2016-04-18.

广西直属公益性科研院所基本科研业务费项目(GXIF-2012-08).

黄光华(1975—)，男，工程师；研究方向：罗氏沼虾良种选育. E-mail: 1394823783@qq.com. 通讯作者：童桂香(1976—)，女，工程师；研究方向：水产养殖. E-mail: 463543285@qq.com.