过敏性鼻炎患儿淋巴细胞亚群、血清IgE水平的变化及其相关性

徐文中 刘春艳

(宁波市眼科医院检验科，宁波315040)



过敏性鼻炎患儿淋巴细胞亚群、血清IgE水平的变化及其相关性

徐文中 刘春艳①

(宁波市眼科医院检验科，宁波315040)

目的：探讨过敏性鼻炎患儿外周血淋巴细胞亚群水平、血清中IFN-γ、IL-4 、IL-5浓度水平及血清中IgE水平的变化，并分析其相关性。方法：选取过敏性鼻炎的患儿86例，同期体检的健康儿童76 例作为对照组，采用流式细胞技术检测其CD3+、CD4+、CD8+CD19+、CD4+CD25+、 CD16+56+淋巴细胞亚群的表达情况，采用双抗体夹心(ELISA )法检测者血清中IFN-γ、IL-4 、IL-5浓度水平，采用免疫比浊法检测血清中IgE水平。结果：过敏性鼻炎患儿CD19+、CD4+/CD8+、 血清IL-4 、IL-5和IgE水平较正常对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05)，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+、CD16+56+、IFN-γ较正常对照组降低(P<0.05)，过敏性鼻炎患儿CD19+B淋巴细胞和血清IgE 水平之间具有相关性。 结论：淋巴细胞的功能异常、Th1/Th2 比例失衡可能与过敏性鼻炎发病机制有关，血清IgE 、IFN-γ、IL-4 和IL-5在过敏性鼻炎患儿中起着重要作用。

淋巴细胞亚群；IL-4；IL-5；干扰素-γ；IgE；过敏性鼻炎；流式细胞技术

过敏性鼻炎是一种常见的变态反应性疾病，主要临床表现为反复发作性喷嚏、水样鼻涕和鼻塞等，近年来在儿童发病率呈上升趋势[1]，其病因比较复杂，T 、B 淋巴细胞功能紊乱，尤其以Th2占优势的免疫应答在该病的发生、发展过程中具有重要作用。本研究通过检测过敏性鼻炎患儿与健康儿童外周血中淋巴细胞亚群水平及血清中IFN-γ、IL-4 、IL-5，IgE水平的变化，探讨其在过敏性鼻炎发病中的作用。

1 资料与方法

1.1 材料

1.1.1 一般资料 选取2012年12月～2015年7月住院及门诊过敏鼻炎性发作患儿86例和健康体检的儿童76例，年龄在1～12岁，平均在6岁，同时进行淋巴细胞亚群、IFN-γ、IL-4 、IL-5和血清IgE水平检测。

1.1.2 主要试剂和设备 血清过敏原特异性IgE测定试剂和仪器分别采用BECKMAN COOLTER 的总免疫球蛋白试剂盒和IMMAGE800特定蛋白仪；淋巴细胞亚群水平测定的试剂盒为BD MultiTEST IMK kit，IFN-γ、IL-4 、IL-5测定的试剂盒和流式细胞仪(FACScalibur)均来自美国BD公司。

1.2 方法

1.2.1 T淋巴细胞亚群的检测 所有检测者均用EDTA-K2抗凝管空腹静脉抽血1.8 ml，经相应的荧光标记单克隆抗体染色，避光室温孵育20 min，用FACSLysing solution溶血处理，流式细胞仪测定CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD4+CD25+、CD16+56+淋巴细胞亚群水平。

1.2.2 血清IFN-γ、IL-4 、IL-5及IgE水平检测 所有检测者于清晨用分离胶管采集2 ml静脉血，分离血清后，常规分离血清,置-80℃冰箱待测。

2 结果

2.1T淋巴细胞亚群和IgE水平测定结果 :过敏性鼻炎患儿CD19+、CD4+/CD8+和血清IgE水平较正常对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05)，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+、CD16+56+较正常对照组降低(P<0.05)见表1。

2.2 血清中IFN-γ、IL-4 、IL-5和IgE水平 过敏性鼻炎患儿血清IL-4 、IL-5和血清IgE水平较正常对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05)，IFN-γ较正常对照组降低(P<0.05)，见表2。

2.3 过敏性鼻炎患儿外周血中CD19+淋巴细胞和血清IgE水平的相关性 我们对86例过敏性鼻炎患儿外周血中CD19+淋巴细胞及 血清IgE水平之间的相关性进行了相关性分析，结果两者存在着显著的相关性(r=0.746,P<0.05)。

3 讨论

过敏性鼻炎是机体接触变应原后主要由IgE介导的鼻黏膜非感染性炎性疾病[2]，属于速发型(Ⅰ型)变态反应，其病理可能是机体受到变应原刺激后多种免疫活性细胞参与的疾病过程。淋巴细胞是其中重要的一种细胞，有研究表明T淋巴细胞不仅参与细胞免疫，而且也作为调节细胞参与调节多种免疫反应[3]。研究中 ，过敏性鼻炎患儿CD3+、CD4+、CD8+水平较正常对照组明显降低(P<0.05)，CD3+代表T淋巴细胞水平，我们推测其降低表明过敏性鼻炎患儿T细胞免疫功能降低；CD4+是具有辅助性T细胞亚群，它可以刺激B细胞产生抗体，可以分为Th1和Th2 两种类型,它们通过所分泌的细胞因子相互调节,正常情况下,二者处于相对平衡状态以维持机体免疫功能的平衡，当机体受到异常抗原刺激时,上述平衡被打破,可引起异常的免疫应答。Th1主要参与细胞免疫,是迟发型(Ⅵ)型变态反应中的重要效应细胞，其分泌的IFN-γ是其特征因子。Th2 细胞主要刺激B细胞产生抗体,参与体液免疫,引起速发型(Ⅰ型)变态反应,维持着机体细胞免疫和体液免疫正常的功能，其主要分泌IL-4 、IL-5等细胞因子。本研究结果显示,过敏性鼻炎患儿CD4+T细胞降低，其中Th1 类细胞因子也IFN-γ降低,而Th2 类细胞因子IL-4、IL-5升高,我们分析过敏性鼻炎患儿尽管Th细胞减少，但免疫状态异常，Th2 类细胞优势表达，Th1/Th2 比例失衡在其炎性反应中起着重要作用，与Baars报道一致[4]。CD8+代表细胞毒性T细胞和抑制性T细胞，可以抑制T淋巴细胞活性和抑制B淋巴细胞产生抗体[5]，在过敏性鼻炎患儿中降低，说明其对B细胞抑制作用减弱，使B细胞产生IgE抗体增高，成为过敏性鼻炎发病的重要环节；但过敏性鼻炎患儿CD4+/CD8+比值较正常对照组升高，我们推测二者的免疫平衡功能紊乱在该疾病中过程起重要作用。CD4+CD25+调节性T细胞在机体的免疫调节中发挥作用，可通过调节Th1/Th2 平衡，抑制Th2 细胞的分化而强化Th1 细胞的活性，从而抑制变应性疾病的发生[6]。

表1 T淋巴细胞亚群和IgE水平测定结果

Tab.1 Results of T lymphocyte subsets

GroupsCasesCD3+CD4+CD8+CD19+CD16+56+CD4+/CD8+CD4+CD25+Allergicrhinitisgroup8665.07±2.9236.29±3.1223.78±2.5515.20±1.719.29±0.921.55±0.234.54±0.82Controlgroup7668.60±7.7040.37±5.1228.94±2.0810.41±1.0711.71±1.191.42±0.258.10±1.10t-3.94-6.21-14.1821.74-14.363.0723.14P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

表2 血清中IFN-γ、IL-4 、IL-5水平测定结果

Tab.2 Results of IFN-γ，IL-4 ，IL-5 and IgE levels

GroupsCasesIFN-γIL-4IL-5IgEAllergicrhinitisgroup8632.38±4.3670.14±4.3857.93±4.76362.47±153.97Controlgroup7644.84±3.4152.64±4.7538.90±4.0235.84±15.33t-20.3720.3927.3119.45P<0.05<0.05<0.05<0.05

本试验中过敏性鼻炎组明显低于对照组(P<0.05)，我们推测CD4+CD25+减少对Th2抑制作用减弱，导致Th1/Th2 失衡，可能是过敏性鼻炎发生原因之一，有报道过敏性鼻炎中CD4+CD25+调节性T 细胞存在缺陷[7]。

CD19是B淋巴细胞表面标志分子,其在过敏性鼻炎患儿中表达升高，表明B淋巴细胞活化，分化成熟为浆细胞，并分泌IgE抗体是变应性鼻炎发病的重要因素，本研究中变应性鼻炎患儿IgE升高间接表明B 淋巴细胞功能紊乱，同时过敏性鼻炎患儿CD19+和IgE水平具有正相关性。CD16+56+代表的自然杀伤细胞(NK 细胞)是机体的第一道防御屏障，在清除病毒感染中起重要作用，过敏性鼻炎中其降低，表明患儿免疫力低下，变应原刺激后应激能力减弱和其发病有关。

综上所述，过敏性鼻炎的发病与T、B淋巴细胞和NK细胞功能紊乱、血清IgE、水平相关，其和病情进展相关性有待于扩大样本进一步研究，治疗过程中要注意调节患儿免疫功能。

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[2] 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志编委会鼻科组，中华医学会耳鼻咽喉头颈外科学分会鼻科学组.变应性鼻炎诊断和治疗指南[J].中华耳鼻咽喉头颈外科杂志，2009，44(12):977-978.

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[6] 李鸣婧，张晓阳.T 淋巴细胞及细胞因子与变应性鼻炎发病机制的关系[J].医学研究杂志,2012,41(4):175-177.

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[收稿2015-06-11 修回2015-08-20]

(编辑 许四平)

Changes and correlation of lymphocyte subsets and serum levels of IgE in children with allergic rhinitis

XU Wen-Zhong,LIU Chun-Yan.Clinical Laboratory,Ningbo Eye′s Hospital,Ningbo 315040,China

Objective:To investigate the changes of lymphocyte subsets and the serum levels of IgE in the children with allergic rhinitis,and to analyze the relationship between lymphocyte subsets and IgE.Methods: CD3+，CD4+，CD8+CD19+，CD4+CD25+，CD16+56+lymphocyte subsets were measured by flow cytometry ,IFN-γ，IL-4，IL-5 of serum were detected by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)and the serum level of total IgE was detected by immuno turbidimetric assays in 86 cases of children with allergic rhinitis and 76 cases of healthy children.Results: CD19+B lymphocyte subsets，the ratio of CD4+and CD8+，IL-4 ，IL-5 and the serum levels of IgE were increased in the children with allergic rhinitis groups as compared with healthy children ,the difference has statistical significance(P<0.05);CD3+，CD4+，CD8+，CD4+CD25+，CD16+56+lymphocyte subsets and IFN-γ were lower than the control group(P<0.05);there was a correlation between B lymphocyte subsets and IgE in the children with allergic rhinitis.Conclusion: Lymphocyte dysfunction and Th1/Th2 ratio imbalance may be related to the pathogenesis of allergic rhinitis,and IgE，IFN-γ，IL-4 and IL-5 play important roles in children with allergic rhinitis.

Lymphocyte subsets;IL-4;IL-5;Interferon γ;IgE;Allergic rhinitis；Flow cytometry

10.3969/j.issn.1000-484X.2016.04.022

徐文中(1982年-)，男，主管技师，主要从事临床检验方面工作。

R765.21

A

1000-484X(2016)04-0550-03

①宁波市妇女儿童医院检验科，宁波315012。